小鼠睾丸注射

小鼠睾丸注射的实验步骤:1.麻醉小鼠:40-80mg/kg，注射时浓度一般为0.5%，腹腔注射。2.调节显微操作台的操作臂，将玻璃针尾部用打火机熏烤一下，装进操作臂内，旋好固定旋钮。3.小鼠昏迷后，用胶带固定四肢于硬纸板上。4.备皮:剪去小鼠腹部的毛。注意:剪下的毛妥善处理，勿污染小鼠腹腔。此步骤可不做5.开腹:逐层打开腹腔，表皮至肌层。6.将睾丸拉出腹腔:于膀胱旁边寻找与睾丸相连的脂肪垫，轻轻拖出腹腔，小鼠的睾丸和附睾顺势被拖出腹腔。7.调节三叉光源的亮度及显微镜放大倍数(尽量≤2倍)。8用尖头镊找出输出小管，并调整硬纸板角度，使小鼠输出小管的方向大约与玻璃针方向平行。9.双手操作，夹起输出小管，将其中一段套入玻璃针头部，并顺势平行将输出管向玻璃针方向移动。10.左手固定输出小管位置，右手旋动进液旋钮，将台盼蓝注射进输出小管内。(约5μl)11.注射结束后逐层关腹，最后将酒精棉敷于小鼠腹部防止感染。12拎起小鼠脊背肌肉，注射0.1ml0.5%戊巴比妥纳防止感染。

注射方法：

腹腔注射1.2%三溴乙醇 (0.2 m L/10g体重) 麻醉8周龄的C57BL/6J小鼠, 用碘伏消毒阴囊及腹部的皮肤, 在耻骨联合上方沿腹中线做1~2cm皮肤切口, 拉出一侧睾丸, 置于预先消毒的滤纸上。体视显微镜下观察睾丸网, 并用自制的针尖为10μm的玻璃注射针, 将含有1×Trabs Dux和1%台盼蓝病毒液 (2×107U·m L-1) 缓慢地注入睾丸网中。每侧睾丸注射约30μL的病毒液。注射后, 还纳睾丸, 缝合切口。将小鼠单独饲养, 并于注射后第7、15、30和42天, 将已注射的雄鼠和雌鼠1∶1合笼交配, 次日检查阴道栓, 记录配种情况。见阴道栓者, 继续饲养待其产仔