关于用 cre 小鼠和 loxp 小鼠获得条件敲除小鼠的问题

kaolaheqie

2013-10-09

目前 cre的小鼠和带 loxp 的小鼠都有，问题是往下怎么操作？？对这个 cre 小鼠的描述是：Cre recombinase under the control of the mouse calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha promoter.这个具体是怎么操作的？这个启动子不会在哪个时段自发的进行表达这个激酶么？然后重组酶自发的产生活性。。。从而使得 loxp 之间的片段被删除而得到敲除的小鼠。因为我也看到了有的是 cre 鼠和 loxp 鼠杂交之后，cre 重组酶会在小鼠到达某个年龄之后自动会有表达。产生的后代将直接是敲除的小鼠，所以对上面的有疑问，还请对这方面熟悉的大神给点指导。。

3 个回答

过客一名

2013-10-18

有帮助

同楼上tntztyx的答案，Cre小鼠和LoxP小鼠交配后，若产生的后代，则可能有基因型为 CAMK2 Cre + / LoxP+的，该基因型小鼠的Cre受CAMKII的启动子调控，即理论上应与正常小鼠的CAMKII的表达的时间特异性和细胞类型特异性一致，Cre表达后，在该时期的这些细胞中发生敲除。不知道楼主的Cre鼠和loxP鼠的分别的Cre和loxP是几个拷贝，如果是单拷贝，可以在小鼠出生后进行基因型PCR检测。具体就是，根据具体的Cre基因相关序列和LoxP相应的基因结构的序列，适合位置设计合适的引物，提DNA检测，双阳性就是喽~

tntztyx

2013-10-17

有帮助

cre 采用的是calcium/calmodulin-dependent protein kinase IIalpha promoter ，启动活性就由CAMKII的启动子决定，与基因组中camkII的启动活性类似，当然有表达特异性可能有变化，毕竟是模式改变的转基因动物

roby_0_0_2000

2013-10-11

有帮助

这个实验，不知道对你有用不？http://www.biomart.cn/experiment/29.htm也可以在那里提问，增加一点机会。