ERK-JNK通路求助

一般是先得到目的蛋白，然后从目的蛋白的上游分子开始做起。

ERK信号通路激活能够促进细胞增殖,而JNK信号通路的激活与细胞凋亡关系密切,两者还参与多种疾病的病理生理变化过程.JNK信号转导通路与神经退行性病变或其他神经系统相关疾病有着密切联系.

ERK-JNK通路是细胞内的一个重要信号传导通路，涉及到细胞生长、分化、凋亡和应激等生理过程。下面是关于ERK-JNK通路的一些相关知识和筛选该通路相关蛋白的步骤：

1. ERK-JNK通路概述：ERK（Extracellular signal-regulated kinase）和JNK（c-Jun N-terminal kinase）是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族的成员，它们参与细胞对外界刺激的应答。ERK主要参与细胞增殖和生存的调控，而JNK参与应激和细胞凋亡的调控。

2. ERK-JNK通路的活化：ERK和JNK的活化通常涉及到上游的蛋白激酶激活级联反应。典型的ERK激活路径包括Ras/Raf/MEK/ERK信号传导链路，而JNK的激活路径包括MAP3K（如MEKK1、ASK1等）/MAP2K（如MKK4、MKK7等）/JNK信号传导链路。

3. 筛选ERK-JNK通路相关蛋白的步骤：

- 确定目标蛋白：根据您的研究兴趣，选择ERK-JNK通路中您感兴趣的特定蛋白因子作为目标。

- 细胞系和刺激条件：选择适当的细胞系和刺激条件来激活ERK-JNK通路。这可能包括使用生长因子、细胞刺激物、细胞应激等。

- 细胞裂解和蛋白提取：使用细胞裂解缓冲液裂解细胞，并提取细胞中的总蛋白。确保提取过程中使用磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂来保护蛋白质的完整性。

- SDS-PAGE和Western Blot：将提取的蛋白质进行SDS-PAGE电泳分离，并转移到膜上进行Western Blot分析。使用特异性的抗体来检测和定量目标蛋白质的表达水平。

- 蛋白质检测和分析：通过Western Blot检测目标蛋白的磷酸化状态或总蛋白水平，以评估ERK-JNK通路的活化程度。此外，可以进行其他蛋白交互作用或下游效应蛋白的检测。