我是卡坦精
组织经过液氮速冻后冻在-80,现在想做冰冻切片,可以直接从-80拿出来梯度蔗糖脱水吗?脱完水做冰冻切片会有影响吗?还有做完切片怎样能够防止脱片?救救孩子叭!谢谢大家!
huarenqiang5
需要在冰冻切片机中平衡温度大概20-30分钟,再在-20摄氏度下进行冰冻切片。对于脂肪组织需要更低一些的温度,一般在-25摄氏度左右切片。
土井挞克树
如果你在速冻之前已经对标本进行过处理的话是可以直接脱水制片的
loveliufudan
有以下几个建议:
脱水处理:组织经过液氮速冻后冻在-80℃中可以进行梯度蔗糖脱水处理,但需要注意逐渐加入蔗糖,并充分脱水,以避免组织内部的水分对切片质量的影响。同时,也要注意蔗糖的渗透压梯度选择,以保证组织结构的完整性和切片的质量。
冰冻切片:脱水处理后,可以进行冰冻切片,但是需要注意的是,在切片前应该完全将样品脱水,否则在切片过程中可能会因为冰晶形成而导致组织破裂,影响切片质量。
防止脱片:在切片后,为了防止脱片,您可以将切片浸泡在PBS缓冲液中,或使用带有切片网格的切片盒进行处理。在切片过程中,也要注意切片的厚度和切片角度等因素,以保证切片的完整性和质量。
最后提醒一下,为了获得更好的切片质量,建议在进行样品处理和切片前做好充分的准备工作,并严格控制各个步骤的操作时间和温度。