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细胞状态调整到最好,其他的条件每个实验室都不一样,要做预实验摸索
loveliufudan
以下是一些可以考虑的电转条件选择的要点:
1. 细胞状态:确保细胞处于最佳状态。通常,细胞应该在对数生长期,并且健康状态良好。细胞密度应适中,不要太过稀疏或过于密集。
2. 转染试剂:选择合适的转染试剂,如磷脂体转染试剂(lipofectamine)或电转专用试剂。根据试剂的说明书,按照推荐的配比来制备转染复合物。
3. DNA质量和浓度:使用高质量的DNA,如纯净的质粒DNA。确保DNA浓度适当,通常在1-2 μg范围内。过高或过低的DNA浓度都可能影响转染效率。
4. 电转参数:电转参数包括电压、脉冲宽度和脉冲数等。这些参数会因设备和实验室的不同而有所差异。建议首先参考相关文献或常用的电转方案,并根据实验室的经验进行优化。
5. 转染后处理:转染后的细胞需要适当的处理,包括培养基的更换、抗生素选择和细胞培养条件的调整。这有助于提高转染效率和细胞存活率。
土井挞克树
CCL136电转条件可以将程序设置为U-023,DNA用量为2μg,细胞密度为5x10^6 cells/ml
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