DrAynia
转染6孔板为例,Lipo3000说明书上给了3.75和7.5两个量,怎么确定用哪一个合适,我看好多人说这是一个范围,可以根据自己的细胞转染的情况确定加多少,所以lipo3000的量跟转染效率有怎么样的关系?是加的越多转染效率会越高吗?
我做的是瞬转没有荧光标记的,想要看效率得做pcr和wb,如果lipo3000不同的量都要试一遍的话工作量会很高,目前用用3.75和7.5两个量试了一下,细胞状态的话7.5的会细胞死的会更多一点,pcr结果有差别,7.5的会转染效率高一点,但转染差别不大,wb还没做完,所以我该用哪一个,其他的量都还没试过。可以折中用5ul吗?对实验结果有影响吗?
有没有人做过这方面的研究,可以指导一下吗?我做的是内模癌细胞过表达(HHUA,HEC-1B,Ishikawa等细胞)
土井挞克树
有关系的,我一般都是用预实验摸一个合适的浓度再做。
Dr_劉医生
那建议3.75和7.5两个量都用,做完后绘制一个曲线,找一下可能存在的最佳拐点
juyue2010
使用带有GFP的智力,做一个转染条件摸索,看在哪个lipo用量下,细胞活率正常,GFP阳性率还高。