丽娜娜
最近新养了THP-1细胞,电转质粒用G418筛选后发生了贴壁,且能持续增值,应该是没有发生分化的吗,但是不知道变成了什么细胞??
或者大家有什么好的筛选建议吗
汤姆卜丽波
如果你确定不了可以提个蛋白跑一下看看,建议瞬转筛还是加一个荧光标志更好辨别
dxyc42u
也有可能是细胞激活了,激活后的细胞会出现贴壁
川川川川4
我用慢病毒感染过thp1,偶尔会有少量细胞贴壁。抗性筛选这步,我用的puromycin,此步不会诱导或加剧贴壁,G418没试过。 pma或者某些病毒感染(比如sftsv),会刺激thp1贴壁的,会不会你实验体系的某个试剂/容器有脏东西~
此外,可以学习下你的电转杯规格和电转参数吗?😀
丽娜娜
电转杯用的是lonza的,参数是根据它们官网推荐的程序。
请问你用puromycin筛选的浓度是多少呀,一般筛选几天呢?
毛利小五郎的徒弟
考虑存在分化,分化后的细胞爱贴壁。