筛选shRNA跑q跑不出来怎么办

12孔板，3T3细胞，转染试剂：lipo3000，按说明书上添加量，每孔2ul lipo3000,2ul P3000， 2.5ug cDNA，转染时间24小时，trizol法提RNA，逆转录和qPCR试剂盒做别的样品没问题。qPCR结果空白组没问题，转染组包括NC组跑出来的结果要么CT值很高，要么直接跑不出来（同样品的内参也是一样）。引物没问题，溶解曲线很正常。请问这是怎么回事呢？