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western blot 实验 显影时PVDF膜上很多这种点点,很影响显影,请问怎么回事

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_nxooiyw2

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3 个回答

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土井挞克树

有帮助

通常是由转膜时样品液体残留导致的。在样品液体转移到新的膜上的过程中,样品液体会从液体到气态的转化过程中逸出,而逸出的液体在转移过程中就会在新的膜上留下白斑。同时,如果在转膜过程中发生气泡,也有可能在膜上留下白斑。建议在转膜时仔细清洗PVDF膜和过滤器,使其表面干净。同时,可以尝试在转膜时加入足够的样品液体,避免膜表面产生空气的泡沫,减少白斑的产生。如果已经出现白斑,可以尝试重复转膜操作或者重新制备样品以消除白斑的影响

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于小鱼鱼1998

有帮助

这可能是pvdf膜被污染了,更换新的pvdf膜,使用前可以用pbs润洗

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loveliufudan

有帮助

有以下几种可能的原因和解决方法:

1. 污染:点点可能是由于污染引起的。确保在实验过程中使用无尘环境,减少灰尘和其他颗粒物的污染。注意在操作前彻底洗手,并使用无粉末的手套。

2. 高背景信号:点点可能是由于高背景信号引起的。高背景信号可能由非特异性结合或其他干扰引起。确保洗涤步骤充分,遵循正确的抗体稀释比例和孵育条件。

3. 异常蛋白:点点可能是由于样品中存在异常蛋白引起的。在样品制备过程中,注意避免蛋白的降解或异常修饰。确保在样品制备过程中使用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,以减少蛋白降解和异常修饰的影响。

4. 胶体金或其他标记物残留:如果您在实验中使用了胶体金或其他标记物(如荧光标记),可能残留在膜上形成点点。确保充分洗涤膜以去除残留的标记物。


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