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分子量小于10KD,western blot一直跑不出来,而且膜很扭曲

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_iv9zsqv5

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5 个回答

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inventbiotech

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分子量小的蛋白WB不好跑,一个是因为蛋白提取时容易提取不到,发生丢失。再加之跑电泳,转膜这些过程他也很容易丢失,太小了,电泳跑得快,转膜也跑得快,但是这一切都得是在提取蛋白时,提取到了这些小蛋白,建议使用不容易发生蛋白丢失的柱式法总蛋白提取技术进行蛋白的提取

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秋秋欣欣

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分子量小配15%的胶然后转膜时间一定要控制好

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balalaLy

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10以下要用高浓度的胶,但15%以上的胶大分子的又分不开,所以建议你用梯度胶,梯度胶是从4-20%的浓度梯度。

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Eason老歌迷

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条带扭曲,可能是你配胶没有混匀。分子量太小的蛋白你不能转膜转太长时间,容易转过了,你可以适当缩短转膜时间。

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天一湖医者

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可以选择0.2μml的膜,同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起,再转移。其他按步骤即可。

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