天一湖医者
可能是因为一抗浓度过低吧,可以试试用1:500的一抗浓度,二抗用的1:2000试试看
whilt-shirt
是不是你的actin已经过期不能使用了或者对应二抗选用不对
Eason老歌迷
你可以先拿丽春红染色看看内参区域有没有条带。一般不会出现这种情况,因为内参都是恒定表达的。有一种可能是actin发强光后在极短的时间内猝灭了(是在做肿瘤方面的课题么,最近我们也在做),你可以尝试下,我们发现有些条带会在发光液孵育完后半分钟内便猝灭消失,原因可能是在极短的时间内发光物质被大量消耗殆尽,同时也可以考虑降低二抗浓度(大约降低一半左右即可。)