SunshineFerry
各位大神,有知道WB背景有很多竖纹可能的原因,和改善方法吗?第二次重复时,目的蛋白显影没有竖纹,Make显影出现竖纹。实在不知到原因处在哪?
Eason老歌迷
想问一下,你是1.0的板还是1.5的板,厚胶容易发生。还有你这是条带笑脸,说明凝胶不均匀冷却,或者是电泳系统温度偏高。
天一湖医者
1.泳道间有粘联,可能是转膜过程中胶受力不均匀所致
2. 单独SDS-PAGE,如果用考染,是否也有“声波状”竖条纹?如果有,可能是核酸杂质。你在蛋白提取时候,加入少量核酸酶,即可解决。
3. 是否已排出WB的背景?这种现象,经常见于封闭不佳的情况。所以建议你首先排出WB背景问题。优化封闭条件,封闭液中注意不要出现固体颗粒物。这种情况在用脱脂奶粉时常见。
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