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18%分离胶跑酶解蛋白,60mg/ml 上样量10ul,80V浓缩胶120v分离胶跑出条带呈Y型且拖尾严重,求解

相关实验:甲醛变性凝胶电泳鉴定 RNA 实验

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花花是只喵

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5 个回答

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dxy_gwrp7ndq

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如果蛋白含二硫键的话,还原剂量不足,可能会导致蛋白在跑胶过程中的动态成键,也可能形成拖尾。"拖尾"现象是电泳中最常见的现象。这常常是由于样品溶解不佳引起的,克服的办法是在加样前离心,选用合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液,加增溶辅助试剂。另一方法是降低凝胶浓度。

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府宅

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1.最主要的原因是蛋白样品在制样时,煮沸时间不够,没有充分被SDS包被,变性不充分。

2.样品有降解

3.上样量太大,分不开

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dxywode

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Tris-Cl PH值不对,或者忘记加SDS。

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未来9

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可从以下方面考虑改进
1. 浓缩胶的长度不够
2. 分离胶浓度偏低
3. 跑胶电压过高
4. 检查转膜时有无带动凝胶和膜的相对位移因素
5. 显影时间过长

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bamboopiggy

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看marker没问题,胶的问题就不大,你试试把蛋白浓度降到40mg/ml

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