提出来的蛋白浓度太低，比如低于1ug/ul，有什么办法提高蛋白浓度吗?

1、增加细胞量，比如两瓶细胞一起提蛋白。2、减少裂解液用量，比如200ul，浓度可能会加倍。3、延长裂解时间。4、改变方法：

减少裂解液体积，或者增加样本量

可以试试用超滤柱超滤，或者将蛋白沉淀后重悬，或者用5x的loading，增大上样体积。

1、细胞量少2、裂解液量过大3、裂解不充分。针对以上，以下供楼主参考：1、增加细胞量，比如两瓶细胞一起提蛋白。2、减少裂解液用量，比如200ul，浓度可能会加倍。3、延长裂解时间，并且反复吹打，10min吹打一次。4、改变方法：用细胞刮刀将细胞刮下，离心收集细胞，在离心管里裂解细胞（如有超声，可以加超声）。这种方法，可以每瓶细胞只加100Ul左右的裂解液，浓度大概在5-10mg/ml.

可以少加RIPA，或者把贴臂细胞消化下来后取细胞沉淀再加裂解液，看能否提高浓度，能杂出条带就有希望，每次都做内参，同一张膜做，看下趋势是否还是随机