请问elisa实验中，空白、阳性对照、阴性对照均显色，可能是什么原因？

想要利用生物素亲和素系统、通过间接elisa和双抗原加心elisa，检测样本中的抗体。使用了间接elisa试剂盒中的抗原包被板，索莱宝的生物素标记羊抗人IgG，自制NHS-biotin标记的羊抗人IgG，自制NHS-Biotin标记的抗原，索莱宝链霉亲和素标记HRP，其他试剂均使用试剂盒中自带的试剂，包括样本稀释液、洗涤剂、显色剂、终止剂等。结果如下
我想请问，为什么会产生这样的结果，为什么自制的试剂空白孔、阳性对照孔、阴性对照孔均显色，我知道当然是自制的试剂肯定有问题，但是如果是没有标记好，应该不显色才对呀，怎么会都显色呢，除了自制的试剂其他都是用商品化的试剂，洗板也是用的洗板机，问题出在哪里呢？
生物素标记物的制备：抗原或抗体200μL即1mg（母液为PBS），200μL 即2mg B-NHS（溶于DMSO），混匀，置于冰盒中反应2 h；置于室温下反应0.5 h；置于0.05 M CB中透析。加入等体积甘油（即400μL），分装，-20°C避光保存。