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科研学霸天团，48小时有问必答

问孟德尔随机化审稿意见如何回复！求助！

dxyc42u

增大样本量再次验证看看结果还是阴性的吧

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问差异分析是关注上调蛋白还是下调蛋白

bamboopiggy

两个方向都要关注，但是一般造成差异的是某个通路的上调，所以优先关注上调的，如果分析不出来，再看下调的也可以

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问孟德尔随机化vcf转化txt

loveliufudan

可以考虑以下几种解决方案：1.使用高性能计算机：考虑更换较高性能的计算机或虚拟机，以加快数据处理速度。2.减小数据范围：选择关键基因或区域来减小数据范围，以减少需要处理的数据量。3.使用数据分段处理方法：将数据分为几个小部分处理，并最终合并结果。4.搜寻其他GWAS数据：搜索关于冠心病的其他GWAS数据，如果有更少SNP的数据可用，则可以使用。

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问病理组学

毛利小五郎的徒弟

病理组学范围太大啦，你先具体哪个方向再深度学习一下。

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问克隆基因

毛利小五郎的徒弟

结果区是灰色，说明没有结果产生，可能是样本问题可能是设置参数问题

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问协同效应

毛利小五郎的徒弟

把数据导入image，然后选择维度分析即可

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问请问我提取质粒，野生型和突变型浓度一个300一个600，为啥送测序，测不出来啊？

AUG-Met

可能是提取过程或者样品运输过程中出现了降解，可以直接送测菌液，一般测序质粒和菌液价格是一样的

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问请问一下乳腺癌4T1细胞系ER PR Her2 EGFR的表达情况？

huarenqiang5

根据激素受体ER、PR及人表皮生长因子受体 2 （HER2）的表达，乳腺癌分子分型主要有：LuminalA 乳腺癌、LuminalB乳腺癌、三阴性乳腺癌、HER-2阳性（HR阳性）乳腺癌。 Luminal A型乳腺癌：指ER阳性、PR阳性（高表达）、HER-2阴性的乳腺癌； Luminal B型乳腺癌：指ER阳性、 PR 阳性

2 回答146 围观

问碧云天碱性磷酸酶

李亚彪111

酶标仪检测碱性磷酸酶，有没有标准品？每板做一组标准品，再绘制标准曲线，测得的OD值通过标准曲线可求得酶活性

3 回答390 围观

问求助 | IP的input组出现了小分子量强表达杂带是怎么回事？

loveliufudan

这种情况可能是因为在293T细胞中表达质粒的转染过程中，在转染后的细胞中产生了一种杂合物，这种杂合物可能是由目的蛋白和其他蛋白组成的。在进行Western Blot检测时，这种杂合物被误认为是目的蛋白，因此出现了一条强杂带。在进行磷酸化质谱分析时，这种杂合物可能已经被分解，因此没有再次出现。建议您使用其他方法（如质谱）进行验证，或者使用不同的细胞系进行转染，以避免这种杂合物的产生。

2 回答261 围观

问寻找过表达质粒

Marchers

试试pCL-Eco，这个适合鼠源不适合人源细胞，可以用小鼠原代细胞。

2 回答100 围观

问Chip提纯DNA问题

dxy_9rkll7e2

当你的DNA浓度太低的时候，A260/A280等参数是测不准的，这个是没关系的，正常建库测序即可

2 回答135 围观

问回归分析P值大于0.05的指标可以做ROC曲线么，

loveliufudan

在二元回归分析中，p值是用来衡量回归系数与零的差异性的，如果p值大于0.05，说明该指标与结果变量之间没有显著相关性。但是在ROC分析中，p值是用来衡量预测模型的效果的，如果p值小于0.05，说明该指标对于预测结果是有效的。所以，如果在二元回归分析中p值大于0.05，但在ROC分析中p值小于0.05，可能是因为该指标与结果变量之间存在非线性关系，而ROC分析可以更好地发掘这种关系。所以,使用ROC

2 回答1509 围观

问CHIP实验中用超声打断DNA后，解交联，RNase以及蛋白酶K处理后，纯化后跑胶，应如何改进？

毛利小五郎的徒弟

电压设置大一些，然后增加上样量。

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问凝胶电泳条带随时间消失或变淡

清清冷风

因为EB往负极移动，电泳时间越久，条带处亮度越弱。PCR条带出，没有EB了，背景会变暗，相对高背景处，条带基本看不清晰，甚至看不到。建议：电泳液高于胶面1毫米左右，不要太多，不要多天使用同一电泳缓冲液，醋酸会挥发。

4 回答102 围观

问扫描电镜结果分析

239 围观

问有没有大佬知道提取病毒核酸的配方怎么配制啊，无苯酚氯仿

loveliufudan

无苯酚氯仿是一种常用于病毒核酸提取的溶剂，通常在配制病毒核酸提取液时会使用。提取病毒核酸的具体配方如下：配制10mM缓冲液：将40.8mg抗坏血酸和4.4mg抗坏血酸钠溶解在800μl水中，再加入200μl无苯酚氯仿，搅拌均匀即可。配制病毒核酸提取液：将10mM缓冲液和淀粉（或其他淀粉类物质）按照一定的比例混合，具体配比可根据实验所需进行调整。淀粉可以促进病毒核酸的沉淀，从而方便核酸的回收。在配制

4 回答215 围观

问泡沫细胞的标志物？

毛利小五郎的徒弟

泡沫细胞表面PAS反应弱阳性。

2 回答141 围观

问包涵体复性后做凝胶阻滞实验

huarenqiang5

EMSA中蛋白可以用包涵体获得。

2 回答101 围观

问昆虫杆状病毒传代后发现长菌，该怎么处理？

huarenqiang5

如果抗体这些都一样，主要考虑是操作上的问题。

2 回答104 围观

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