丁香实验_LOGO丁香通
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册

有大神知道棕榈酸诱导H9C2心肌细胞的高脂模型怎么做吗?

user-title

小鱼儿吐泡泡泡


wx-share
分享

4 个回答

user-title

毛利小五郎的徒弟

有帮助

采用即用型棕榈酸(PA)试剂处理HepG2细胞,一般用0.3 mM PA处理24小时,

user-title

周末也要努力呀

有帮助

棕榈酸可以用来诱导H9C2细胞高脂模型。以下是一种常用的实验步骤:


1. 培养H9C2细胞:将H9C2细胞培养在适当的培养基中,通常使用DMEM培养基,含有10%胎牛血清和1%抗生素。


2. 细胞预处理:将H9C2细胞分为对照组和实验组。对照组继续在正常培养基中培养,实验组则进行棕榈酸处理。


3. 棕榈酸处理:将棕榈酸溶解在适当的溶剂中(如无菌的乙醇),制备成一定浓度的棕榈酸溶液。将此溶液加入到实验组的培养基中,使最终浓度达到所需的浓度。


4. 处理时间:根据需要,将H9C2细胞在棕榈酸溶液中处理一定的时间,通常为24小时。


5. 细胞采集:在处理结束后,用适当的方法将细胞从培养皿中收集起来,如用胰酶消化细胞层。


6. 测定指标:可以通过多种方法来测定H9C2细胞高脂模型的指标,如细胞内脂质含量的测定、脂质代谢相关基因的表达分析等。



user-title

小鱼儿吐泡泡泡user-title

您好,我想问一下我看到有些人是棕榈酸在75%的乙醇溶,有些写着在0.1m的氢氧化钠溶液中溶解。这两者有什么区别或者影响吗?哪个效果更好呀?

user-title

高山云初

有帮助

方法:不同浓度(0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol 激H9C2心肌细胞24h,用 MTT 比色法检细胞增殖情况;选择浓度为0.4 mmol / L PA 刺激H9C2心肌细胞12、24、48h,用 MTT 比色法检测细胞增殖情况;不同浓度 PA 刺激H9C2心肌细胞24h后用 ROS 试剂盒检测细胞活性氧发生情况、用 Tunel 试剂盒检测细胞凋亡情况.结0.4mmol/ L PA 刺激H9C2心肌细胞24h时,细胞增殖水平明显被抑制.与 control 组相比, PA 浓度为0.2mmol/ L 时,细胞 ROS 水平及 Tunel 凋亡水平均有所增加,另外,细胞出现轻微凋亡相关形态学改交;当0.4mmol/ L PA 刺激H9C2心肌细胞24h时,细胞 ROS 和 Tunel 水平均出现明显增加,细胞质与细胞核均发生明显的细胞凋亡现象.结论 PA 浓度为0.4mmol/ L 刺激H9C2心肌细胞24h时即可建立

user-title

huarenqiang5

有帮助

操作步骤:


1. 针对不同细胞种类及实验目的,棕榈酸钠所用浓度不同,一般与细胞培养基按1:100-1:20稀释,终浓度为100-500umol/L。


2. 对于首次使用,建议采用浓度梯度处理细胞,摸索针对特定细胞、达到特定效果的适宜浓度。


3. 需要经0.22μm滤器过滤除菌,待细胞生长至80-100%汇合度时,换成新鲜含血清(一般10%)培养基,按适当浓度滴加棕榈酸钠,对照组加入等量高脂对照,轻柔混匀后将细胞放入细胞孵箱中继续培养。


4. 加入20-48小时后,收集细胞,进行下一步分析。



提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序