DC细胞的抗原提呈实验步骤？

DC细胞抗原提呈实验步骤如下：

1. 培养和收集DC细胞：使用培养基（如RPMI 1640）培养DC细胞，通常使用骨髓源或外周血单个核细胞（PBMC）分离的细胞。收集细胞后，用PBS洗涤细胞。

2. 处理抗原：选择合适的抗原，如蛋白质、多肽或细胞裂解物。将抗原处理成合适的浓度。

3. 刺激DC细胞：将DC细胞与抗原共同培养。通常使用1-2μg/mL的抗原浓度。培养时间可以根据实验需要而定，一般为24-48小时。

4. 收集细胞：将培养的DC细胞收集起来，用PBS洗涤细胞。

5. 表面标记：使用适当的抗体标记DC细胞表面的抗原。常用的标记抗体有CD11c、CD80、CD86等。

6. 流式细胞术：使用流式细胞仪对标记的细胞进行分析。通过检测细胞表面标记物的表达情况，可以评估DC细胞的抗原提呈能力。

7. 数据分析：根据流式细胞术的结果，分析DC细胞的抗原提呈能力。可以比较不同处理组的细胞表面标记物表达水平，评估抗原提呈的效果。

1、将人单核细胞加入DC-GROW培养基中混匀，培养得到溶液A

2、取溶液A，调节温度至36-38℃，孵育3.5-4.5h，除去非粘附细胞，向粘附细胞中加入培养基，继续孵育，至有细胞集落生成时，加入肽库得到溶液B；继续孵育23-25h得到负载抗原未成熟DC细胞溶液

S1、将人单核细胞加入DC-GROW培养基中混匀，培养得到溶液A；

S2、取S1中得到的溶液A，调节温度至36-38℃，孵育3.5-4.5h，除去非粘附细胞，向粘附细胞中加入培养基，继续孵育，至有细胞集落生成时，加入肽库得到溶液B；继续孵育23-25h得到负载抗原未成熟DC细胞溶液；

S3、取S2中得到的负载抗原未成熟DC细胞溶液