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粥辰辰辰辰
在1.6mL反应混合液(0.1mol/L Tris-HCl缓冲液,80mol/L盐酸羟胺,pH7.4)中,加入0.7mL粗酶液和0.7mL 40mmol/L ATP溶液
高山云初
称取籽粒1g于研钵中,加3ml提取缓冲液(0.05mol/L Tris-HCl,pH8.0),置冰浴上研磨匀浆,转移于离心管中,4℃下16114×g离心20min,上清液即为粗酶液。在1.6mL反应混合液(0.1mol/L Tris-HCl缓冲液,80mol/L盐酸羟胺,pH7.4)中,加入0.7mL粗酶液和0.7mL 40mmol/L ATP溶液,混匀,于37℃下保温0.5h,加入显色剂(0.2mol/L TCA,0.37mol/LFeCl3和0.6mol/L HCl混合液)1mL,摇匀并放置片刻后,于1790×g下离心10min,取上清液测定540nm处的吸光值,以加入1.6mL反应混合液(0.1mol/L Tris-HCl缓冲液,pH7.4)为对照。
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反应液B加入0.7毫升的盐酸羟胺。