小鼠肺泡灌洗液怎么取

抽取肺泡灌洗液时注射器进去后直接缓慢回抽即可，注射器不需要来回抽打灌洗液。

目前比较常见的几种肺泡灌洗液抽取方法如下:

1.方法一收集支气管肺泡灌洗液:先将气管远

小端结，将静脉留置针插入气管，连接2m

L注射器灌洗0.5mL，轻轻按摩肺组织收集灌洗液，重复3次。

2.方法二收集肺泡灌洗液:先穿两根外科缝线于气管、食管之间，将静脉留置套管针插入气管，分别在套管进入气管处、套管远端处结扎紧，连接1mL注射器灌洗0.5mL，停留30 s缓缓回抽，重复3次。

3.改进后的方法收集肺泡灌洗液:暴露小鼠气管和胸腔，用眼科弯镊钝性分离气管和食管:眼科镊支撑在气管下方，使气管整体处于撑开状态，距环状软骨远端2~3个软骨环之间结缔组织膜处剪2~3mm左右的切口:左手持眼科弯镊，提起少量气管壁，右手持自制注射器水平将塑料硬管插入气管:轻轻推动气管使塑料硬管充分到达左右支气管交叉处，可在胸腔暴露外观容是否到达，到达后，左右手持两把眼科镊一前一后夹住气管和嵌套的塑料硬管;注射器乳头衔接针栓，首次进行0.5 mLPBS溶液灌洗，观察双侧肺膨胀，停留30 s后慢慢抽取灌洗液。

需要。

灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗，一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。

一次灌进300ul之后抽出来就可以。

不需要来回抽打，来回抽打会对小鼠造成损伤，打进去抽出来就行

个人认为有两个做法1.检查是否将肺部插漏，或者是肺部有损伤导致漏液（此时就无法挽救）2.可以将针头来回换方位以及往回抽一点。可能是插的有点深，我一般都是在小鼠的支气管比较靠近头部插入，并且插入的深度大概0.8cm。

努力搜集到的资料，希望对你有所帮助

小鼠肺泡灌洗液

一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，生理盐水或PBS 反复冲洗，一般为3 遍，每遍冲洗次数根据需要决定，3-5次即可，具体操作参考：

1）操作所需的设备（除了一次性注射器，气管插管是已经灭菌的，其他设备都需要高压灭菌）；

2）小鼠麻醉并固定；

3）颈部去毛并消毒；

4）从颈部正中切口；

5）暴露剥离气管，并在气管近端穿线打活结，活结要比较松；

6）在所打活结的远端，剪开气管的1/2，行气管插管，插入后线打死结；

7）用10ml 注射器抽取10ml 的灭菌生理盐水，通过气管插管注入气管内，反复抽吸三次，将液体抽出，大约能吸出7 毫升左右，放入灭菌离心管内。再抽取10ml 生理盐水，重复上面的操作两次，这两次每次能抽出肺泡灌洗液9ml 左右，也注入离心管；

8）收集的灌洗液采用0.22um 滤膜过滤，后将滤膜冻存－80°C 保存，或直接提取DNA。

每次灌洗时，可以将300 ul的液体注入到肺泡中，然后轻轻回抽一小部分液体，以确保灌洗液充分接触到肺泡表面。

通常情况下，不需要来回抽打灌洗液，在取肺泡灌洗液时，通常使用注射器进行操作，一次注入并轻轻回抽即可。每次灌洗时，这样可以避免对肺组织造成不必要的损伤。将300 ul的液体注入到肺泡中，在操作过程中，然后轻轻回抽一小部分液体，需要注意操作的轻柔和准确性，以确保取得准确的样本。

如果有特殊的操作要求，以确保灌洗液充分接触肺泡表面，并将其中的细胞和分泌物吸出。这个过程可以重复进行三次，建议参考相关的操作指南或咨询专业人士的建议。