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病毒在0.22um滤膜过滤后,把病毒等微生物过滤了,跑PCR就阴性了。
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滤膜的滤径太大了,建议减小滤过膜的孔径
huarenqiang5
可能是因为转化的时候有少量未进入细菌内部的质粒在细菌表面 挑菌的时候这部分质粒会作为模板扩增得到PCR产物。
loveliufudan
如果你在经过0.22微米滤膜过滤后运行PCR,但结果显示阴性,可能有以下几个可能的原因:
1. 滤膜堵塞:如果滤膜堵塞或没有正确选择合适的滤膜孔径,病毒可能无法通过滤膜。在选择滤膜时,请确保选择合适的孔径大小,以便病毒能够通过滤膜。
2. 病毒失活:某些病毒在经过滤膜过程中可能会失活。特别是,如果使用的滤膜是杀灭病毒的滤膜,例如带有0.22微米孔径的灭菌滤膜,那么病毒可能会被滤膜上的杀菌方法(如热处理)所杀灭。
3. 病毒浓度低:如果病毒浓度很低,即使通过滤膜,也可能无法在PCR中检测到。这可能需要采用其他的病毒浓缩方法,如超速离心或PEG沉淀等。
4. PCR方法问题:确保你的PCR方法具有足够的灵敏度来检测低浓度的病毒。确认你的引物和探针的特异性和敏感性,并优化PCR条件,以确保能够有效检测病毒。