如何诱导HK2细胞衰老？
赛尔吉奥拉莫斯
本人在做肾脏衰老方面研究，目前想用HK2细胞诱导细胞衰老，之前用过tBHP处理4h后换液，然后等24-48h染sa-beta-gal，虽然能染上，但比较浅，但是像p16 p53 p21等蛋白没有趋势，各位大神们有没有更好的建议呢？ 目前想用d-gal去诱导，有没有试过的请指路，谢谢！
3 个回答
汤姆卜丽波
看过一个文章是这样做的，
细胞分为对照组，5、10、20、40、80和100g/lD-gal组，并设空白组，各组设置6个平行复孔，D-gal组分别处理6、12、24和48h然后测增值
loveliufudan
针对诱导细胞衰老的方法，您可以尝试以下建议：
使用D-galactose：D-galactose是一种葡萄糖代谢产物，已被证明可以诱导细胞衰老。您可以通过在培养基中添加D-galactose来诱导HK2细胞衰老。具体方法可以在细胞培养基中加入不同浓度的D-galactose，然后进行一定时间的培养，最后检测细胞的老化程度。
使用较长时间的tBHP处理：您可以尝试使用较长时间的tBHP处理，比如24h或更长时间，以增强细胞的衰老程度。此外，您可以在tBHP处理前和处理后分别进行细胞活力和老化标志物的检测，以确认tBHP处理的效果。
组合使用多种诱导剂：您可以使用多种不同的诱导剂组合，如D-galactose、tBHP、氧化应激剂等，来诱导HK2细胞衰老。这样有助于增强细胞的老化程度，从而更好地评估老化标志物。
赛尔吉奥拉莫斯
您说的组合试剂有没有具体方法呢？想拿来参考一下，比如细胞系、代数、药物处理方法等
毛利小五郎的徒弟
用过tBHP处理的话需要延长处理时间，6h后换液，然后等24-48h再染。用Dgal的话一般处理4h左右，效果好一些
赛尔吉奥拉莫斯
请问您用的是什么细胞系啊？如果是hk2的话用的话有没有记代数呢？我用的hk2传代多了会有好多异形性细胞，对药物浓度反应都不太一样，您说的那个方法我也用过不知道是不是细胞原因做不出来
