阿卓咩咩
我想使用Baf或者CQ阻断晚期自噬以后检测LC3II。但是有的文献体内给小鼠每日腹腔注射baf至取材,有的是处死前30min注射;而体外实验里有的是共培养72h,有的是检测前干预1小时。请问干预的时间该如何选择?
loveliufudan
对于体内实验,由于Baf和CQ都具有毒性,因此应尽可能缩短给药时间,以避免不必要的副作用。一些文献报道将Baf或CQ腹腔注射于小鼠体内,并在处死前30分钟进行检测。这种方法可以提高细胞内药物浓度并减少不必要的细胞死亡。但是,如果您的实验需要更长的时间来观察效应,可以根据您的具体实验条件和药物的性质选择合适的时间。
对于体外实验,建议在细胞培养期间添加Baf或CQ,并允许药物与细胞进行足够的交互时间。这通常需要根据您的细胞类型和药物的性质进行优化。一般而言,72小时的培养期应该足够观察到细胞自噬的效应。至于干预时间的选择,也应该根据您的实验需要进行优化。如果您需要检测药物的即时效应,建议在添加药物1小时后进行检测。如果您需要检测长期的效应,建议在培养72小时后进行检测。
Dr_劉医生
自噬通量检测一般在检测前开始使用抑制剂干预,时间为48-72h
sswei
Baf是晚期阶段抑制剂,抑制自噬小体和溶酶体的结合,抑制溶酶体对自噬小体的降解。可以在检测前干预。
土井挞克树
我们一般都是持续干预的,检测准确性高