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用来做流式的的组织消化液怎么配置呀

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大大大大强


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3 个回答

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Dr_劉医生

有帮助

流式细胞术中的组织消化液配制方法因实验目的和样本来源不同而异。以下是一种常用的配制方法:

  1. 配制0.3%胶原酶Ⅳ母液,0.22um滤膜过滤后保存于4℃备用。
  2. KCl、Glucose、EDTA溶液按照一定比例溶于无菌的PBS中,调节PH到7.4。
  3. 将0.3%胶原酶Ⅳ母液按照一定比例加入到②中配制好的溶液中,37℃预热备用。
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loveliufudan

有帮助

下面是一种通用的组织消化液配方:

DMEM/F12培养基

酶类:胰蛋白酶、DNA酶

离子:MgCl2、KCl、CaCl2

缓冲剂:HEPES或NaHCO3

其他添加剂:纤维蛋白溶解酶、DNA酶、牛血清白蛋白、DNase I、胰酶抑制剂

具体配方如下(每500ml DMEM/F12培养基):

胰蛋白酶:2.5g

DNase I:0.5g

MgCl2:0.5g

KCl:0.4g

CaCl2:0.25g

HEPES或NaHCO3:2.4g

纤维蛋白溶解酶:0.1g

牛血清白蛋白:1g

胰酶抑制剂:0.1g

以上配方仅供参考,具体配方可能因实验目的和样本类型而有所不同。在配制前,需要将所有化学物质溶解在DMEM/F12培养基中,并使用过滤器将溶液过滤以去除悬浮的杂质。最后,可以根据需要进行调整和优化,例如加入不同的酶和缓冲剂,以达到最佳的消化效果。

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土井挞克树

有帮助

0.25%的胰蛋白酶与0.02%EDTA进行混合。

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