tree2013
huarenqiang5
进行封闭后然后再进行一抗孵育这样可以有效避免假阳性的发生。
loveliufudan
避免非特异性吸附抗体的方法主要有以下几种:
阻止切片表面的非特异性吸附:在切片上加入阻止非特异性吸附的蛋白质,如牛血清白蛋白(BSA)或鱼鳞蛋白(FSG)。这些蛋白质可以占据切片表面的非特异性结合位点,减少非特异性吸附抗体的机会。
去除非特异性抗体:在实验前进行去除非特异性抗体的处理,如在抗体溶液中加入过量的目标抗原或使用亲和柱等。
增加洗涤步骤:增加洗涤步骤可以有效地去除非特异性抗体。通常需要使用含有洗涤剂的缓冲液,如含有Tween 20的PBS。
优化抗体反应条件:优化抗体反应条件可以减少非特异性抗体的结合。例如,可以优化抗体的浓度、孵育时间、温度等。
增加对照实验:在实验中增加对照实验可以检测非特异性吸附的影响。例如,在实验中可以同时进行阴性对照和阳性对照实验,以确定所得结果的可靠性。
需要根据具体实验情况选择适当的方法来避免非特异性吸附抗体的影响。
毛利小五郎的徒弟
把空白的地方用试剂隔离或者预先包被。
sswei
必须要进行封闭后才能进行一抗孵育。
balalaLy
一般不会出现这种情况,可能是片子没有洗干净。