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初次接触酶相关实验,什么试剂可以让酶在液相或干燥的环境中起到酶稳定或保护的作用。
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4 一F PB A (4 一甲酞苯基硼酸)。
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1、在不同温度贮存条件下,6个月内酶活情况为:4℃酶活损耗5-10%,常温酶活损失10-15%。有的酶制剂能在常温下保存,如真菌α-淀粉酶制剂常温下半年的酶活力保存率达到95%以上,1年的保存率可达到90%以上。
2、酶制剂纯度越高越不稳定,室温贮存活力稳定性与酶制剂活力高低呈反比。活力越高下降越快。25℃左右干燥避光存放一年,30-40万单位下降约20%;90万单位下降到50-60万单位;
3、酶制剂固态比在液态中要稳定,如葡萄糖氧化酶干粉0℃下可保存2年,-15℃下可保存8年。液态酶制剂因有含水量,稳定性差,保质期短,酶活相比固态更容易损失;
4、粗制级酶制剂(水溶液混浊的)比精制级酶制剂(水溶液透明的)稳定,主要原因是粗制级保留最原始的状态,而精制级按照不同等级的酶活,会加入淀粉、葡萄糖等处部物质稀释,稳定性相比粗制级要差一些。
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如果环境不可控,可加些酶稳定剂如海藻糖等
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固定化的脂肪酶性质还是比较稳定的,一般直接放在冰箱冷藏就行,或者直接放在室温避光都可以。如果在使用的时候,为了重复使用,也可以直接浸泡在反应体系有机相中,如果较长时间不使用,则需要用有机溶剂清洗后,再保存在有机相中,不建议再进行干燥,尽快用完。
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为了保护酶的活性,可以使用一些试剂来起到酶稳定或保护的作用,例如:
缓冲液:选择合适的缓冲液可以保持酶的稳定性和活性。常用的缓冲液包括Tris-HCl缓冲液、PBS缓冲液、MES缓冲液等。
甘油:加入一定比例的甘油可以起到保护酶的作用,防止酶受到干燥和高温的影响。
硫酸铵:硫酸铵是一种保护剂,可以防止酶在干燥的条件下失活。加入一定比例的硫酸铵可以起到保护酶的作用。
磷酸盐:磷酸盐可以调节酶的pH值,从而保持酶的稳定性和活性。选择合适的磷酸盐可以起到保护酶的作用。
BSA:牛血清蛋白(BSA)可以保护酶不受到蛋白质的降解或氧化的影响,从而保持酶的稳定性和活性。
需要注意的是,不同类型的酶可能对不同的试剂有不同的响应。在进行酶相关实验时,需要根据具体实验要求选择合适的试剂,并根据实验的具体情况进行优化。