肺纤维化小鼠造模方法？

目前用于模型制作的诱导剂很多，如博来霉素、百草枯、高浓度氧、石棉以及放射线等均可以引起肺部损伤，最终导致肺纤维化，其中以博来霉素最为常用。

肺纤维化小鼠造模方法可以通过以下步骤来完成：

制备小鼠肺纤维化所需的刺激物：Bleomycin（又称博莱霉素）或者Paraquat（又称百草枯）。一般来说，Bleomycin更常用于肺纤维化模型制备。

选择小鼠，通常可以选择C57BL/6J小鼠。建议选择8-12周龄的小鼠，并对小鼠进行随机分组，以便进行对照实验。

给小鼠注射Bleomycin，一般使用鼻腔或者气管注射法，注射剂量一般为1.5-2.0U/kg体重。也可以将Bleomycin溶液滴入小鼠鼻腔中。注意注射剂量和注射位置的准确性，以免造成损伤和死亡。

给小鼠注射Paraquat时，一般使用腹腔注射法，注射剂量一般为10-20mg/kg体重。注意注射剂量的准确性和注射位置的正确性，以免造成损伤和死亡。

在给小鼠注射刺激物之后，可以选择在不同时间点对小鼠进行取材和检测。常用的时间点包括1、3、7、14、21和28天等。可以通过组织学、生物化学和分子生物学等方法来评估肺纤维化的程度和机制。

在实验中，需要注意对小鼠进行正常的饮食和生活环境管理，保持其健康和稳定的体重。也需要注意实验操作的安全性和规范性，避免造成伤害和误差。

博莱霉素肺纤维化模型造模方法

模式动物品系:SPF级Balb/c小鼠，雄性，周龄为8w-10w，体重为20g-25g。

实验分组：实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期:4-6 weeks

建模方法:特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）为不明原因引起的成人慢性、进展性、纤维化性间质性肺炎。

建模方法:

SPF级C57/BL6雌性小鼠，体重约18~20g。使用气管滴注博来霉素法建模。

麻醉小鼠，仰卧固定于实验台上，颈部去毛后酒精消毒，切开皮肤，逐层暴露气管，将1mL注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管，回抽无阻力，则注入博莱霉素 5mg/kg/L（对照组注入等量的生理盐水）。手术完毕后迅速将动物直立、旋转，使药液在肺内分布均匀，动物清醒后常规饲养。

模型评价

肺纤维化模型发展时间：给药后第7 天肺组织大多呈重度肺泡炎改变，肺泡腔及肺间质内有大量中性粒细胞浸润，部分肺泡腔破坏或消失，肺间隔内成纤维细胞和毛细血管增生，与正常肺组织对比差别明显；给药后第14天，肺纤维化开始形成。巨噬细胞、中性粒细胞等炎性细胞明显减少，成纤维细胞增多，肺泡间隔明显增厚，有胶原沉积。给药后第28天，多数小鼠发生弥漫性肺间质纤维化，肺间质被胶原纤维和成纤维细胞替代，肺泡壁破坏，肺大泡形成，但仍可见炎性细胞浸润。