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双酶切质粒之后无条带,且纯化之后测定DNA浓度也没有DNA,请问有人遇到过这种情况吗?

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dxy_han0prk

加了1.5微克质粒,用了全式金双酶切体系(50微升,DNA<2微克),使用BamHI和Xhol内切酶,二者缓冲体系相同

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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

那说明你的目标dna条带没有转导成功,所以检测不到

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balalaLy

有帮助

验证一下酶切之前的质粒是否有问题,一起跑胶看看有没有条带。

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dxy_han0prkuser-title

我测试了一下原本的质粒,测了一下DNA浓度正常,但是跑胶啥条带都没有(maker跑胶有条带,质粒取了1微克),请问这个是不是质粒降解成很多小片段了呀?还是质粒跑胶有什么需要注意的地方

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Dr_劉医生

有帮助

一般来说只要酶有活性,就会有条带;可能是你的酶切体系污染了DNA酶

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