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定量pcr时 重复性不好,我应该从哪些方面找原因呢?

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生如夏花zzh

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4 个回答

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天一湖医者

有帮助

主要是加样要特别仔细,比如打出液体时确定打完,移走枪头时不要粘附液体。加样完成后顺时离心,保证液体都在底部。pcr管选择质量选择很重要,次品不可以做定量。因为它的均一度不够。

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bamboopiggy

有帮助

加样用的枪,一定要准,枪尖要挂液少。所有的液体一定要混匀。

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未来9

有帮助

PCR重复性不好的可能原因:

(1) 加样不准确。

(2) 仪器在样品上温度条件有差异, 即温度均一性不好.

(3) 模板浓度低. 样品初始浓度越低, 重复性越差, 应减少样品的稀释倍数.

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balalaLy

有帮助

每次实验用的试剂是不是同一批的,经验告诉我逆转录酶使用不规范会导致结果出入很大。

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