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动物组织的切片做免疫荧光出现严重的非特异性染色的原因是什么?

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lanseyaoj

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3 个回答

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府宅

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原因:

1.抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。

2.荧光素不纯,标本固定不当等。

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

非特异性染色原因:(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。

(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。

(3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。

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txs900416

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有多个原因的可能:1、抗体特异性不好;2、封闭不好;3、洗片不完全;甚至有时候红细胞未清洗干净等一些因素都会产生非常强的背景

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