实验原理 单向定量免疫电泳又称火箭电泳（rocket immunoelectrophoresis）。在琼脂内掺入适量的抗体，在电场作用下，定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体，形成抗原-抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动，遇到琼脂内沉淀的抗原-抗体复合物，抗原量的增加造成抗原过量，使复合物沉淀溶解，一同向正极移动而进入新的琼脂内与未结合的抗体结合，又形成新的抗原-抗体复合物沉淀下来，不断地沉淀-溶解-再沉淀，直至全部抗原和抗体结合，在琼脂内形成锥形的沉淀峰，称火箭电泳。火箭峰的长度与标准抗原比较，可计算待测抗原的浓度。 本实验以人血清作为抗原，免疫动物（家兔）产生抗血清，当适量抗原、抗体在琼脂糖中扩散，两者相遇时，则形成抗原抗体复合物的白色沉淀线。不同的抗原分子与相应的抗体分子的扩散速度不同，当两者间比例适当时，出现数目不同的沉淀线，根据沉淀线的出现可以定性抗原、诊断疾病或测定抗体的效价。 试剂和器材 一、试剂 抗原：胎甲球蛋白（1～5mg/ml）。 免疫血清（抗血清）：家兔抗人胎甲球蛋白血清。 琼脂糖（或进口分装琼脂粉）。 pH 8.6电极缓冲液（巴比妥缓冲液）离

使用方法 1、首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 2、电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3、接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 4、工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。 注意事项 1、电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。 2、仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。 3、由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 4、在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围），可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命。 5、某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流

电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类，自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等，这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳，是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。 使用方法 1． 首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 2． 电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3． 接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 4． 工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零

紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中，在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。 有人说，紫外、可见分光光度计就是一把尺子一个天平，凡是有化验、分析的地方都能用到它。那么，如何评价一台紫外、可见分光光度计的优劣呢？首先，要考察它的外观。试想，一台外型呆板、做工粗糙的仪器，怎么可能是一台先进的仪器呢？然后，我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标： 1、光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求，每个用户都必须重视。 2、杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。 3、光谱带宽 指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律，光谱带宽应该是越小越好的，但是如果仪器的光源能量弱，光学传感器的灵敏度低时，光谱带宽小了，也得不到理想的测量结果的。所以，选择和使用仪器时一定注意。 4、稳定性 稳定性是使用者最关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠，不稳定更谈不上可靠了。 5、噪声

现代近红外光谱（NIR）分析技术是近年来分析化学领域迅猛发展的高新分析技术，越来越引起国内外分析专家的注目，在分析化学领域被誉为分析“巨人”，它的出现可以说带来了又一次分析技术的革命。 近红外区域按ASTM定义是指波长在780～2526nm范围内的电磁波，是人们最早发现的非可见光区域。由于物质在该谱区的倍频和合频吸收信号弱，谱带重叠，解析复杂，受当时的技术水平限制，近红外光谱“沉睡” 了近一个半世纪。直到20世纪50年代，随着商品化仪器的出现及Norris等人所做的大量工作，使得近红外光谱技术曾经在农副产品分析中得到广泛应用。到60年代中后期，随着各种新的分析技术的出现，加之经典近红外光谱分析技术暴露出的灵敏度低、抗干扰性差的弱点，使人们淡漠了该技术在分析测试中的应用，从此，近红外光谱进入了一个沉默的时期。80年代后期，随着计算机技术的迅速发展，带动了分析仪器的数字化和化学计量学的发展，通过化学计量学方法在解决光谱信息提取和背景干扰方面取得的良好效果，加之近红外光谱在测样技术上所独有的特点，使人们重新认识了近红外光谱的价值，近红外光谱在各领域中的应用研究陆续展开。进入90年代，近红外光

一、无机化合物的分析 化学结构的测定——无机化合物对称性强，用红外光谱法很难解决，而拉曼光谱测无机原子团的结构、以及测络合物的结构是很方便的。 （1）对于汞离子在水溶液中，是以Hg+或Hg2+存在的，用红外光谱是无法确定的。因这两种离子在红外光谱上都无吸收带。在拉曼光谱中可看到（Hg-Hg）2+的强偏振线在169cm-1出现。 （2）铊离子在水溶液中是以一价形式存在。因拉曼光谱没有二价铊离子的强偏振线。 （3）镓的特征价过去曾有人提出所谓二氯化镓的实验式，如果如此，它应有顺磁性。但与实际不符。后来有人推断其结构可能是Cl2Ga-GaCl2镓原子间有一键，可能有两种构型：　　①交错式属D2i点群（如丙二烯的氢）。　　②平面式属C2v点群（乙烯中的氢）。 前者应出现九条拉曼线，有三条是偏振的，后者应出现六条拉曼线，也有三条偏振的。但实际结果表明其熔盐仅有四条拉曼线，其中只有一条是高度偏振的。其他皆为退偏振的。因此上述结构是不可能存在的。实验结果表明，其拉曼谱与水溶液中GaCl4-拉曼光谱相同：　　　　　GaCl2cm-1　　GaCl4cm-1　　　　　　115　　　　　　114　　　　　退

火焰光度计是利用原子发射原理，把相应的物质原子化（固体配成溶液，如：用酸溶解；液体高温；气体用在放电情况下激发），激发的电子处于高能级，不稳定会跃迁回基态，不同的原子，电子能级不同，跃迁回时会发出不同波长的光波，通过分析光波就知道是什么原子了。同理也可以分析光波的强度，判断该原子的含量。 如：FPT-640火焰光度（一般出厂配的是钾钠检测器）用于分析血液中的钾钠，也用于硅酸工业的分析。 紫外-可见分光光度计是利用吸收原理，紫外区（200～400）一般用于分析有机物，一些特定的官能团，会有吸收（分子吸收），经常用来测防腐剂含量，一般是用最大吸收检测，但是有多种物质吸收时，经常用全扫描样品，然后测复合样，取多点计算，可也知道不同物质含量。可见区（400～760）一般用于分析离子，就和一般分光光度计一样了；如：721型。但是更精确，一般紫外-可见分光光度计是自动化的，点点鼠标就可以了。

光是横电磁波，是一种在各个方向上振动的射线。其电场矢量E与磁场矢量H相互垂直，且与光波传播方向垂直。由于产生感光作用的主要是电场矢量，一般就将电场矢量作为光波的振动矢量。光波电场矢量与传播方向所组成的平面称为光波的振动面。若此振动面不随时间变化，这束光就称为平面偏振光，其振动面即称为偏振面。平面偏振光可分解为振幅、频率相同，旋转方向相反的两圆偏振光。其中电矢量以顺时针方向旋转的称为右旋圆偏振光，其中以逆时针方向旋转的称为左旋圆偏振光。两束振幅、频率相同，旋转方向相反的偏振光也可以合成为一束平面偏振光。如果两束偏振光的振幅（强度） 不相同，则合成的将是一束椭圆偏振光。 光学活性物质对左、右旋圆偏振光的吸收率不同，其光吸收的差值ΔA（Al-Ad）称为该物质的圆二色性（circular dichroism ，简写作CD）。圆二色性的存在使通过该物质传播的平面偏振光变为椭圆偏振光，且只在发生吸收的波长处才能观察到。所形成的椭圆的椭圆率θ为： θ= tg-1短轴/长轴 根据Lambert-Beer 定律可证明椭圆率近似地为： θ=0.576 lc（εl- εd）=0.576 lcΔε 式中l为介

穆斯堡尔效应（Mössbauer effect），即原子核辐射的无反冲共振吸收。这个效应首先是由德国物理学家穆斯堡尔（Rudolf Ludwig Mößbauer，1929～）于1958年首次在实验中实现的，因此被命名为穆斯堡尔效应。应用穆斯堡尔效应可以研究原子核与周围环境的超精细相互作用，是一种非常精确的测量手段，其能量分辨率可高达10-13，并且抗干扰能力强、实验设备和技术相对简单、对样品无破坏。由于这些特点，穆斯堡尔效应一经发现，就迅速在物理学、化学、生物学、地质学、冶金学、矿物学、地质学等领域得到广泛应用。近年来穆斯堡尔效应也在一些新兴学科，如材料科学和表面科学开拓了应用前景。 理论上，当一个原子核由激发态跃迁到基态，发出一个γ射线光子。当这个光子遇到另一个同样的原子核时，就能够被共振吸收。但是实际情况中，处于自由状态的原子核要实现上述过程是困难的。因为原子核在放出一个光子的时候，自身也具有了一个反冲动量，这个反冲动量会使光子的能量减少。同样原理，吸收光子的原子核光子由于反冲效应，吸收的光子能量会有所增大。这样造成相同原子核的发射谱和吸收谱有一定差异，所以自由的原子核很难实现

用途：能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。 波长范围：200nm～800nm。 操作要点： 1、插上电源，打开开关，打开试样室盖，按“A/T/C/F”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热30分钟。 2、开始测量时要先调节仪器的零点，方法为： 保持在“T%”状态，当关上试样室盖时，屏幕应显示“100.0”，如否，按“OA/100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复2～3次，仪器本身的零点即调好，可以开始测量。 3、用参比液润洗一个比色皿，装样到比色皿的3/4处（必须确保光路通过被测样品中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体，将比色皿的光面对准光路放入比色皿架，用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。 4、将装有参比液的比色皿拉入光路，关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调到“Abs”， 按“OA/100%”键，屏幕显示“0.000”，将其余测试样品一一拉入光路，记下测量数值即可（不可用力拉动拉杆）。 5、测量完毕后，将比色皿清洗干净（最好用乙醇清洗），擦干，放回盒子，关上开关，拔下电源，罩上仪器罩，并打扫卫

1、基本原理 由光源D（或W）发出的复合光，经分光器G色散为单色光，此单色光经旋转扇形镜调制为1500转/分钟的交变信号，并分成S和R两束。此两束光分别通过样品池和参比池而到达接受器B。因此，由接受器（光电倍增管）输出电信号。与扇形镜同步旋转的编码器分别控制三路信号的通断，使之依次通过放大、转换及运算处理系统，并将扣除背景D之后的透射比输出。 2、构造 由光源D（或W）发出的光能，经反射镜M1聚焦在入射狭缝S处。入射狭缝置于准光镜M2的前焦点上，故经M2反射后的光束变为平行光束，其相对口径为D/f=1/7.5。经光栅G（1200L/mm）色散后，由M3聚焦在出射狭缝S处。这一单色器采用了对称式布置的Zeny-Turner系统。从而保证了轴外象差的自动平衡和较低的杂散光。M2与M3是完全相同的一对球面镜，保证了光路系统的完全对称。 在入射狭缝前，置有消除高级次光谱的截止滤光片F，扫描过程中，滤光片自动切换。 通过出射狭缝的单色光，经M4反射及旋转扇形镜（CH）调制后，交替投射在反射镜M5、M6上，从而使光束分成频率为25C/S的双光束（及R和S两束光），它们经M5、M6分别聚焦在样品

一、开机前准备 1. 实验室温度应保持在10～30℃之间，湿度小于80%。 2. 根据实验要求，选择合适的柱子，按装柱子，准备相应的流动相并过滤脱气。 二、开机 1. 依次打开510泵、检测器和计算机电源开关，设定合适的波长和AUFS 值。 2. 双击桌面上的HS V4.0图标，进入工作站系统。 三、编辑LC分析方法 1. 双击“方案”图标，输入初始参数。 2. 双击HS V1.0图标，设定合适的流速和梯度。 3. 保存所编辑的方法。 四、样品分析与采集数据 1. 在文件栏中选择分析方法文件。 2. 手动进样：在方案栏中依提示输入文件名称、样品名称、操作者等信息。进标准样并按下进样器手柄，即开始样品分析与数据采集。 3. 根据标准色谱图进行归一化法、外标法或内标法校正。 4. 输入样品进行分析与数据采集。 五．报告输出 1. 在界面栏的方案栏中选择打印项。 2. 选择所要选用的报告格式，输出报告。 六、关机 1. 关机前先用100%甲醇冲洗系统30分钟，关闭泵控系统，退出主界面。 2. 依次关闭计算机电源，510泵电源，检测器电源。 3. 关闭电源。 4. 在记录本记录使用情况。

引言 色谱柱是HPLC分离过程的核心。一支稳定、高效的色谱柱对建立普适性强、重现性好的方法是必不可少的。不同供应商的色谱柱，甚至来源相同、认为完全一样的色谱柱之间，可能也会存在很大差异，尤其是不同的色谱柱在塔板数、谱峰的对称性、保留值、峰间距以及使用寿命方面会有所不同，而这些不同对建立理想的HPLC方法会产生很大影响。本章中，我们将提供一些有关色谱柱担体、固定相及柱填料的信息供读者参考；讨论色谱柱应用中的问题，以及适宜的解决方案，以确保方法普适性强、重现性好，同时也讨论了在常规HPLC分析中，为获得最佳结果，一支“好”色谱柱的重要意义。 选择HPLC柱时，大多数使用者都认为柱间的重现性是方法建立中极为重要的因素。色谱工作者不愿在校准了一具体系统后，又不得不为一新色谱柱再重新建立HPLC方法。一些生产厂能在一定程度上保证柱性能指标的重现性，如色谱柱塔板数（N），特定样品与条件下的选择性，反压（压力降），特定测试溶质的保留值（k）。因此，对许多使用者来说，生产优质产品的厂家的信誉很重要。价格对一些用户是重要的因素，但上述讨论的其它因素在建立一个普适性强、令人满意的方法时往往更加重要。色谱柱

在色谱操作过程中，检测器有时受固定相流失及样品中的高沸点成分、易分解及腐蚀性物质的作用而被沾污，以至不能正常进行工作，因而提出了如何清洗检测器的问题。若沾污的物质仅限于高沸点成分，通常可将检检器加热至最高使用温度后，再通入载气，就可清除。使用有放射源的检定器时加热要多加小心，例如通常以氚源作成的电子捕获检定器一般都不能超过200度，此外还应注意加热的温度不能损坏检测器的绝缘材料。如用加热法不适宜，也可以用纯的丙酮等溶液从进样口注入（每次可注入几十微升）进行清洗，这在沾污程度较轻时是有效的。 若以上方法都不能解决沾污问题，应将鉴定器卸下进行较彻底的清洗，先选择适宜溶剂，要既能溶解沾污物，又不能损坏鉴定器，用注射器注入测量池进行清洗。若有条件，用超生波清洗就更理想些，要注意的是：清洗过的部分不能用手摸。 一、热导检测器的清洗 将丙酮，乙醚，十氢萘等溶剂装满检定器的测量池，浸泡一段时间（20分钟左右）后倾出，如此反复进行多次至所倾出的溶液比较干净为止。当选用一种溶剂不能洗净时，可根据沾污物的性质先选用高沸点溶剂进行浸泡清洗，然后再用低沸点溶剂反复清洗。洗净后加热赶去溶剂，再装到仪器上，加热检

问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 答： 1． 样品量不足，解决办法为增加样品量；　　2． 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子；　　3． 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器；　　4． 检测器衰减太多。调整衰减即可；　　5． 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数；　　6． 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗；　　7． 检测池中有气泡。解决办法为排气；　　8． 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可；　　9． 流动相流量不合适。调整流速即可；　　10． 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？ 答：原因可能有： 1． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；　　2． 比例阀失效，更换比例阀即可； 　　3． 泵密封垫损坏，更换密封垫即可； 　　4． 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；　　5． 系统检漏，找出漏点，密封即可；　　6． 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。 问：我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请

HPLC日常维护办法之一：压力异常 操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。 《HPLC日常维护办法之一：压力异常》下载 点击这里下载 HPLC日常维护办法之二：漏液 通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。 《 HPLC日常维护办法之二：漏液》下载 点击这里下载 HPLC日常维护办法之三：谱图的各种问题 液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 《HPLC日常维护办法之三：谱图的各种问题》下载 点击这里下载 HPLC日常维护办法之四：进样阀的问题 《HPLC日常维护办法之四：进样阀的问题》下载 点击这里下载 HPLC日常维护办法之五：由气味、景象和声音可以发现的问题 你需要运用你所有的感官去发现液

液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。　　柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹（国内外已规范化）。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管（Φ6.35mm）连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸（Φ1.57mm）的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上（连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸）。　　在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片（或滤网），用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管

一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 答：关于漂移问题：　　1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。　　2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。　　3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题　　1． 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定。　　2． 泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。　　3． 流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。 二、问：液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？ 答：1． 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。　　2． 存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。 三、问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 答：1． 样品量不足，解决办法为增加样品量。　　2． 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子。　　3． 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器。　　4． 检测器衰减太多。调整衰减即可。　　5． 检测器时间常数太大

因为样品中经常会含有能够吸附在色谱柱固定相上的杂质化合物，所以应该经常对色谱柱进行清洗或冲洗。当色谱柱在多次进样后显示出柱效降低时，有必要采用适当的流动相对色谱柱进行处理，冲洗除去吸附在固定相上的污染物和样品残余物。 方法如下： ●将色谱柱从系统上取下，反向连接到输液泵上。色谱柱出口不要连接到检测器上，以免污染检测器流动池。 大多数的硅胶基质色谱柱反相冲洗没有问题，但是聚合物基质色谱柱并不能如此操作，在反相冲洗色谱柱之前最后与色谱柱生产商确认，反向冲洗流动相流速不要太大。 ●冲洗溶剂的选择要考虑分析的样品和使用的流动相条件，一般清洗流动相强度应该比流动相更强，但是条件应该尽可能的温和。 A. 用适当的溶剂冲洗色谱柱的盐和强添加剂。 B. 用比分析流动相更强的溶剂冲洗，该溶剂与流动相组成相同但不含盐和酸。 C. 如果认为B布骤没能完全清洗干净色谱柱，用100%最强溶剂冲洗。 在清洗色谱柱时，最好用与流动相组成相同的溶剂，但是如果使用其他的溶剂，最重要的是要考虑到溶剂之间的互溶性，另外不要用强酸和强碱。 下图是采用不同洗脱能力的流动相冲洗色谱柱时的色谱图，可见色谱柱上的杂

HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意： 1．HPLC的日常操作条件： 温度：10～30℃； 相对湿度<80%； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 2．泵的保养： 1)使用流动相尽量要清洁； 　　2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗； 　　3)流动相交换时要防止沉淀； 　　4)避免泵内堵塞或有气泡。 3．进样器的保养： 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。 4．柱的保养： 1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动； 　　2)当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净； 　　3)要注意流动相的脱气； 　　4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相； 　　5)进样样品要提纯； 　　6)严格控制进样量； 　　7)每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品； 　　8)每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱； 　　9)若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。 5．检测器（UV）的保养： 1)紫外灯的保养：在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器；在分析完成后