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安捷伦推出新型自动化电泳系统

相关专题 近日,安捷伦科技公司发布了安捷伦 2200 TapeStation自动化电泳系统,实现新一代测序流程中样品和文库 质量控制的自动化。2200 TapeStation配合预包装的即用型 ScreenTape 试剂耗材,能够简化和加快新一代测序工作流程中的质量控制。 安捷伦液相分离业务部副总裁 Patrick Kaltenbach 称:“我们对此次发布非常期待。TapeStation 功能多样,更不用说可直接使用的 ScreenTape试剂耗材,仅需要 2 微升样品便可进行高灵敏度分析,毋庸置疑,TapeStation 是进行样品和文库 质量控制的最佳工具。” 安捷伦 2200 TapeStation 兼容 16 联条式样品卡和 96 孔板,是一款能够快捷测定生物样品质量的台式自动化系统。客户只需简单地将样品和 ScreenTape 消耗品载入一体式 2200 TapeStation 仪器中,每个样品仅需约 1 分钟即可轻松获得蛋白质、RNA 和 DNA 样品的完整分析结果。 今年年初被安捷伦收购的 Lab

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DNA的限制性内切酶 酶切实验

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DNA的酶切技术

相关专题 重组DNA技术工具酶 一、实验目的 1.通过对DNA的酶切,学会设计构建体外重组 DNA分子; 2.根据目的基因合理选择载体 与限制性内切酶; 3.掌握DNA的酶切技术。 二、实验原理 限制性内切酶 是从细菌中分离出来的一种能在特异位点切割DNA分子的核酸内切酶,目前已从多种细菌中分离出超过400种,识别各自不同的核苷酸顺序,这一顺序大多为具有一对称中心的回文序列,如从大肠杆菌中分离的 EcoR I识别:…GAATTC… 切割后产生 …CTTAAG… …G和AATTC…的末端, …CTTAAG… 该末端由于有一段小的能互补配对的单链突出,故称为粘性末端。切割后的末端为3’-OH和5’-磷酸基团。即…G-OH …CTTAA-P。 有的限制性酶识别四碱基对的顺序,如 San3A识别 GATC ;有的识别六 CTAG 碱基对,如上述的ECOR I。识别四碱基对的内切酶由于识别顺序在DNA出现的频率更高(四碱基酶为44=256,六碱基

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关于等点聚焦不得不看的知识点

相关专题 等点聚焦电泳主要是依据不同的蛋白质分子 等电点不同而对蛋白质进行分离的技术。本文主要等点聚焦电泳中对电聚焦的优缺点、等点聚焦原理、仪器与试剂、两性电解质、密度梯度等电点聚焦等方面进行描述。 一、电聚焦的优缺点: 电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用的影响,随着时间和所走的距离加长,区带越走越宽,而电聚焦能抵消扩散作用,使区带越走越窄;由于这种电聚焦作用,不管样品加在什么部位,都可聚焦到其电点,很稀的样品也可进行分离;可直接测出蛋白质的等电点,其精确度可达0.01pH单位。电聚焦技术的缺点是:一是电聚焦要求用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀,二 是样品中的成分必需停留于其等电点,不适用在等电点不溶或发生变性的蛋白质。 电聚焦技术要求有稳定的pH梯度,要求极防止对流和防止已分离区带再混合的措施,其办法有三:密度梯度,聚丙烯酰胺 凝胶和区带对流聚焦,以第一种方法为常用。 二、基本原理 等电点聚焦就是在电泳槽中放入

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限制性内切酶综述

相关专题 限制性核酸内切酶产品选择专题 一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶 称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindII、HindIII,HpaI、HpaII,MboI、MboI等。 限制性内切酶(restriction endonuclease):一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。 基本信息 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease):识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶 [别名] Endodeoxyribonuclease [酶反应] 限制性内切酶 能分裂DNA分子在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。 [单

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琼脂糖(Agarose)的特性知多少

相关专题 学生物的人对琼脂 、琼脂糖这两个词一定都不会陌生。不过它们是同一样东西抑或有所差别呢?我想不少人都会犯迷糊了。没关系,且听我细细讲来。 首先,琼脂 和琼脂糖不光中文叫法有点区别,它们的英文名字也是不同的。先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。而琼脂糖的英文名为agarose,天然琼脂agar由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成。 琼脂 作为一种独特的食品在我国已经有悠久的历史。它是从大型海洋藻类石花菜、紫菜、江篱等提取分离制成的,广泛应用于食品和生化等行业。我们常吃的果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、八宝粥中都含有琼脂。我国的山东、福建、广东、海南等拥有优越的海洋资源和气候条件,适宜大型海洋藻类的生长,是生产琼脂的主要地区,产品远销世界各地。 琼脂 糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根

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聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验方法改进

相关专题 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验方法总汇 改进一:配胶 背景:在配制SDS-PAGE 胶的时候,加入分离胶的过程中常常会带入气泡,即使用双蒸水来压平界面也有可能因为力度不匀而导致胶面不够齐平,最后使跑出来的相同大小的蛋白条带不在同一个水平面上。 方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求,干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到37℃恒温箱中可加速胶的凝固。待到分离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦! 改进二:脱色 背景:给染色结束的SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条带不清晰,影响到拍照的效果。 方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的3、4个小时就可以轻松实现了。 PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的... 改进三:

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SDS-PAGE电泳中的15个常见问题解答

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电泳仪的研发背景

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三恒数控300V,600V,1000V, BC电泳仪系列

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐 电泳设备专题 多特点: 技术先进,电路开发软件 编写,完全拥有自主知识产权,保证产品的合法性。 品种齐全,选择余地大,满足你的基本需要和特殊诉求。 适用范围广,广泛应用于蛋白质电泳及转移,核酸电泳等应用领域。 改变传统的输入输出方式,采用开关电源, 性能稳定可靠,使用寿命长。 电脑控制整个输出和反馈过程,精度高,波动小 设计布局合理,体积,小重量轻,便于携带。 薄膜按键,百万次寿命,数据输入和设定科学、方便。 多种安全保护措施,保护您的安全和实验安全。 功能多样,恒定方式自动判定和自动切换。 性能价格超群,物超所值,无论是价格和价值在市场上都具有很强的竞争力。 出众的售后服务:1个月包退,3个月包换,1年免费保修,终身维护;软件 免费升级。 POWERBC电泳仪 型号、技术参数、价格 型号 主要技术参数 价格 POWERBC 300BC 三恒:恒电压,恒电流,恒功率,恒定方式自动切换,最大输

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双向电泳各部分操作大全

相关专题 1. 总的策略 ① 化学试剂纯度要高,至少是分析级,目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导<2uS) ③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制 ④ Deionize urea prior to use ⑤ 包含尿素的溶液加热温度不超过 37℃,否则会发生蛋白质氨甲酰化NBS p;过滤所有的溶液,使用干净无灰尘的容器 2. 样品制备 ① 样品提取缓冲液(裂解缓冲液)必须新鲜配制。或者分装成 1ml,于-78℃冷冻保存, 裂解缓冲液一旦溶解不能再冷冻 ② 如有必要,在细胞裂解时加入蛋白酶抑制剂。注意:几种蛋白酶抑制剂在 DTT 或b-巯基乙醇存在时失效 ③ 40000g 离心 1 小时以去除蛋白提取液中的不溶物 3. 灌胶 ① 过硫酸铵溶液需新鲜配制。40%过硫酸铵溶液储存于冰箱中只能使用 2-3天,低浓度过硫酸铵溶液只能当天使用 ② TEMED 需在氮气下储存,每 6 个月换一次 ③ 带 U 型框的玻璃板需用疏水硅烷处理,避免胶聚合后与玻璃板粘连 ④ 水平 SDS 浓缩胶

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双向电泳溶液配制大全

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经典双向电泳操作步骤指导大全

相关专题 水化上样( 被动上样) 1. 从冰箱中取出 IPG 胶条,室温放置 10min。 2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品,槽两端各 1cm 左右不加样,中间的样品液一定要连贯。注意:不要产生气泡,否则会影响胶条中蛋白质的分布。 3. 用镊子轻轻撕去 IPG 胶条上的保护层。注意:碱性端较脆弱,应小心操作。 4. 将IPG胶条胶面朝下轻轻置于水化盘中样品溶液上。注意:不要将样品溶液弄到胶条背面,因为这些溶液不会被胶条吸收; 还使胶条下面的溶液产生气泡。如产 生了气泡,用镊子轻轻地提起胶条的一端,上下移动胶条,直到气泡被赶走。 5. 放置 30~45min 大部分样品被胶条吸收,沿着胶条缓慢加入矿物油,每根胶条 约 3ml(17cmIPG),防止胶条水化过程中液体蒸发。 6. 置等电聚焦仪于- 20℃水化 11~15h。 第一向 等电聚焦 1. 将纸电极置于聚焦盘的正负极上,加 ddH2O 5~8μl 润湿。 2. 取出水化好的胶条,提起一端将矿物油沥干,胶面

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双向电泳的样品的制备原则、步骤及注意事项

相关专题 样品制备原则 样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1. 尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的 损失;2. 减少对蛋白质的人为修饰;3. 破坏蛋白质与其他生物大分子 的相互作 用,并使蛋白质处于完全变性状态。 根据这一原则,样品制备需要四种主要的试剂:离液剂(chaotropes),主要包括尿素(Urea)和硫脲(thiourea);表面活性剂(sufactants),也称去垢剂, 如 CHAPS 与 Zwittergent 系列等双性离子去垢剂;还原剂(reducing agents),最常用的是二硫苏糖醇(DTT)和磷酸三丁酯(TBP)等。当然,也可以选择性 的加入 Tris-base,蛋白酶抑制剂以及核酸酶。 样品的来源不同,其裂解的缓冲液也各不相同。通过不同试剂的合理组合, 以达到对样品蛋白的最大抽提。在对样品蛋白质提取的过程中,必须考虑到去除 影响蛋白质可溶性和

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双向电泳细胞样品与组织样品处理方法

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醋酸纤维膜电泳操作方法

相关专题 醋酸纤维膜电泳是一项简便而又迅速的方法。它的优点是:①电泳区带分离清楚,比琼脂 平板电泳分辨率高;②可以定量;③样品用量少,只需要几微升即可。 (一)材料与试剂 1.pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液 2.0.5%氨基黑染色液 3.透明液:冰醋酸 3 份 ;95%乙醇 2 份 混合即可 4.醋酸纤维膜 (二)操作方法 1.将醋酸纤维膜条浸于巴比妥缓冲液中,浸透后用竹镊子夹到滤纸上,吸去过多的水分。将膜的光滑面向下搭在电泳槽 两侧的滤纸桥上,注意搭平。 2.加样 用微量加样器于负极端1.5cm处加样1µl~3µl,注意样品要成一条直线且垂直方向。也可用血球计数板盖玻片蘸取样品轻轻点上。 3.电泳 电压10V/cm~15V/cm或0.4mA/cm~0.6mA/cm电泳45min~60min,至电泳区带展开约2.5cm~3.5cm时,关闭电源。 4.染色 将膜浸于氨基黑染色液中,染色数分钟。 5.透明 将染色的醋酸纤维膜浸于透明液中,漂洗5m

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转移电泳实验技术操作方法

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专家点评:如何预防双向凝胶电泳中的垂直条纹

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完整的双向电泳操作流程

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