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蛋白质定量——BCA(二辛可酸)法蛋白定量

相关专题 在蛋白质定量试验中,最常用的方法是BCA法蛋白定量 。那么为什么我们要选择用BCA法?因为BCA发蛋白定量具有很多优点,如1.实验操作十分简单方便;2.实验耗时短,快速;3.试剂灵敏度高,实验结果准确;4.所用的试剂稳定性好,而且经济实用,抗干扰能力强等。 实验原理: BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量:在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+(biuret reaction)。BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。 实验步骤: 1. 先将solutionA 摇晃混匀,根据样品数量,按50体积solution A加1体积solutionB试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀。BCA工作液在24小时内稳定。 2.稀释标准品:完全溶解蛋白质标准品(5mg/mlBSA,-20℃保存)取10微升用PBS 稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为 0.5

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甘氨酸的作用

相关专题 甘氨酸(Glycine)又名氨基乙酸,为非人体必需氨基酸。 名称缩写:Gly 甘氨酸是氨基酸系列中结构最为简单,人体非必需的一种氨基酸,在分子 中同时具有酸性和碱性官能团,在水溶液中为强电解质,在强极性溶剂中溶解度较大,基本不溶于非极性溶剂,而且具有较高的沸点和熔点,通过水溶液酸碱性的调节可以使甘氨酸呈现不同的分子形态。 甘氨酸的用途: 食品级甘氨酸 1. 用做调味剂 、甜味剂,与 DL- 丙氨酸 、枸橼酸等配合使用于含醇饮料中;合成清酒和精良饲料时用作酸味矫正剂 、缓冲剂;在腌制咸菜 、 甜酱 、 酱油、醋和果汁时用做添加剂,以改善食品风味、味道 、保持原味 、提供甜味源等; 2. 用作鱼糜制品、花生酱等的防腐剂,能抑制枯草杆菌及大肠杆菌 的繁殖; 3.利用它本身的氨基和羧基,对食盐和醋等味感起缓冲作用; 4.用作饲料添加剂中的诱食剂(引诱剂); 5.食品酿造 、肉食加工和清凉饮料的配方及糖精钠的去苦剂; 6. 用作奶油 、干酪、人造奶油 、速食面 、小麦

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谷氨酸的作用

相关专题 谷氨酸,是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基,化学名称为α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索逊1856年发现的,为无色晶体,有鲜味,微溶于水,而溶于盐酸溶液,等电点3.22。大量存在于谷类蛋白质中,动物脑中含量也较多。谷氨酸在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物 中的许多重要化学反应。 谷氨酸的用途: 下游产品开发 将有一定反应活性的双功能基试剂氯乙醇和L—谷氨酸直接酯化保护羧基,用三光气活化成其相应的N—羧酸酐,可直接得到侧链具有一定反应活性的聚L—氯乙基谷氨酸酯。 谷氨酸的结构中有一个氨基和两个羧基,在光气的作用下,羧基和氨基会形成环状N—羧酸酐,由于羧基也较为活泼,可能会参与成环反应,因此在成环反应之前,通常用苄醇将羧基进行保护,这样得到的聚合物的侧链活性极低,一般需经进一步氢化脱苄或胺解脱苄,才能得到有反应活性的侧链,我们选用双功能基试剂氯乙醇作保护基因,在聚合之后可直接得到有反应活性的侧链,可有效地简化合成路线。 侧链酯化过程是一个可逆反应,随着体系内水含量的不断增

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脯氨酸的作用

相关专题 脯氨酸proline是一种环状的亚氨基酸,在组成蛋白质的常见20种氨基酸中唯一的亚氨基酸。脯氨酸(Pro)是植物 蛋白质的组分之一,并可以游离状态广泛存在于植物体中。 脯氨酸的作用: 实验用途 脯氨酸以天然存在形式,胶原的主要成分之一。DL-型以明胶为原料,经盐酸水解等多步处理后可制得本品盐酸盐。为生化试剂,用于生化及营养研究,微生物 试验,制备培养基。L-型以L-谷氨酸与无水乙醇酯化、还原而制得。 临床医用 为氨基酸类药。复方氨基酸大输液原料之一。用于营养不良、蛋白质缺乏症、严重胃肠道疾病,烫伤及外科手术后的蛋白质补充。无明显毒副作用。 提高植物 抗寒性 脯氨酸(Pro)是植物 蛋白质的组分之一,并可以游离状态广泛存在于植物体中。在干旱、盐渍等胁迫条件下,许多植物体内脯氨酸大量积累。积累的脯氨酸除了作为植物细胞质内渗透调节物质外,还在稳定生物大分子结构、降低细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化还原势等方面起重要作用。 在逆境条件下(旱、盐碱、热

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酪氨酸的作用

相关专题 酪氨酸是一种含有酚羟基的芳香族极性α氨基酸。L-酪氨酸是组成蛋白质的20种氨基酸中的一种,是哺乳动物 的必需氨基酸,又是生酮和生糖氨基酸。酪氨酸的作用如下: 1、酪氨酸是酪氨酸酶单酚酶功能的催化底物,是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料。在美白化妆品研发中,可以通过研究合成与酪氨酸竞争的酪氨酸酶结构类似物也可有效地抑制黑素的生成。 2、白癜风患者吃含有酪氨酸的食物可以促进黑色素的形成,减轻白癜风症状。 3、医药用作甲状腺功能亢进;食品添加剂 。 4、是一种重要的生化试剂,是合成多肽类激素、抗生素、L-多巴等药物的主要原料。 5、广泛用于农业科学研究,也作饮料添加剂和配制人工昆虫饲料。 6、由于酪氨酸有刺激和抗抑郁的作用,早上和午餐前配合服用1000到1500毫克的色氨酸(色氨酸使人平静)那么在晚上它对减轻抑郁会有很好的治疗效果。研究者发现,对于某些人群,色氨酸和酪氨酸一起使用,比酪氨酸或者是色氨酸单独使用,对于减轻抑郁症,效果要更好。 7、血压高或偏头痛的人不应该使用

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半胱氨酸的作用

相关专题 L-半胱氨酸是蛋白质合成编码氨基酸,哺乳动物 非必需氨基酸和生糖氨基酸。D-半胱氨酸存在于萤火虫的萤光素酶中。半胱氨酸是一种天然产生的氨基酸,在食品加工中具有许多用途,它主要用于焙烤制品,作为面团改良剂的必需成分。 半胱氨酸的作用: 1、在生物体内具有抱合作用等, 故对范围广泛的毒物如甲醛、乙醛、氯仿、四氯化碳、铅、镉、氯甲汞、过氧化脂、PCB、河豚毒、酒精等具有有效的解毒作用, 这些都已被实验所证明。 2、有效地预防和治疗放射性伤害。 3、在皮肤蛋白的角蛋白生成中维持重要的琉基酶的活性, 并且补充硫基, 以维持皮肤的正常代谢,调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素, 是种非常理想的自然美白化妆品。它可以除去皮肤本身的黑色素, 改变皮肤本身的性质, 使皮肤变得自然的美白。 4、每当出现炎症、过敏使胆磷醋酶等的琉基酶降低时, 补给L-半胱氨酸可维持琉基酶的活性, 改善炎症和过敏的皮肤症状。 5、具有溶解角质的作用, 所以对角质肥厚的皮肤病也有效。 6、具有防止生物体衰老的功

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苏氨酸在饲料添加及营养上的用途

相关专题 L-苏氨酸是一种必需的氨基酸,苏氨酸主要用于医药、化学试剂、食品强化剂、饲料添加剂等方面。特别是饲料添加剂方面的用量增长快速,它常添加到未成年仔猪和家禽的饲料中,是猪饲料的第二限制氨基酸和家禽饲料的第三限制氨基酸。 苏氨酸是一种重要的营养强化剂,可以强化谷物、糕点、乳制品,和色氨酸一样有恢复人体疲劳,促进生长发育的效果。医药上,由于苏氨酸的结构中含有羟基,对人体皮肤具有持水作用,与寡糖链结合,对保护细胞膜 起重要作用,在体内能促进磷脂合成和脂肪酸氧化。其制剂具有促进人体发育抗脂肪肝药用效能,是复合氨基酸输液中的一个成分。同时,苏氨酸又是制造一类高效低过敏的抗生素——单酰胺菌素的原料。 苏氨酸应用于饲料: 随着人民生活水平的提高和养殖业的发展,苏氨酸作为饲料用氨基酸,广泛用于添加仔猪饲料、种猪饲料、肉鸡饲料、对虾饲料和鳗鱼饲料等。具有下列特点: ——可调整饲料中氨基酸平衡,促进生长; ——可改善肉质; ——可改善氨基酸消化率低的饲料原料的营养价值; ——可生产低蛋白的饲料,有

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各种氨基酸在生命代谢活动中的作用

相关专题 氨基酸通过肽键连接起来成为肽与蛋白质。氨基酸、肽与蛋白质均是有机生命体组织细胞的基本组成成分,对生命活动发挥着举足轻重的作用。 某些氨基酸除可形成蛋白质外,还参与一些特殊的代谢反应,表现出某些重要特性。 (1) 赖氨酸 赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。 赖氨酸可以调节人体代谢平衡。赖氨酸为合成肉碱提供结构组分,而肉碱会促使细胞中脂肪酸的合成。往食物中添加少量的赖氨酸,可以刺激胃蛋白酶与胃酸的分泌,提高胃液分泌功效,起到增进食欲、促进幼儿生长与发育的作用。赖氨酸还能提高钙的吸收及其在体内的积累,加速骨骼生长。如缺乏赖氨酸,会造成胃液分沁不足而出现厌食、营养性贫血,致使中枢神经受阻、发育不良。 赖氨酸在医药上还可作为利尿剂的辅助药物,治疗因血中氯化物减少而引起的铅中毒现象,还可与酸性药物(如水杨酸等)生成盐来减轻不良反应,与蛋氨酸合用则可抑制重症高血压病。 单纯性疱疹病毒是引起唇疱疹、热病性疱疹与生殖器疱疹的原

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默克公司关于HIundefinedTAG实验过程中常见问题与解决方法

相关专题 1、蛋白无法与Ni-NTA His·Bind树脂结合 目的蛋白无 HisTag 序列 ——测序 以确定连接处序列和阅读框是否正确。检查是否存在内部翻译起始位点(若 HisTag 序列构建于目的蛋白N 端),或翻译提前终止(若 HisTag 序列构建于目的蛋白C 端) HisTag 序列空间难以接近 ——变性条件下纯化蛋白;或将 HisTag 序列构建于目的蛋白另一末端 HisTag 序列已被降解 ——检查穿过组分中有无带有 HisTag 的片段 结合条件不对 ——检查所有溶液的 pH 值和组成成分尿素的解离常导致 pH 值的变化。应在使用之前测定缓冲液pH 值,迅速投入使用确保体系中没有鳌合剂和还原剂存在;咪唑的浓度太高也会导致蛋白不能与树脂结合 目的蛋白在漂洗步骤提前被洗出 ——洗脱条件过于严格降低咪唑浓度,或增加缓冲液pH 值 HisTag 标签被部分隐藏/屏蔽 ——降低洗脱条件的严格程度。变性条件下纯化目的蛋白 缓冲液条

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胶原蛋白粉的特点

相关专题 胶原蛋白粉为小分子 量胶原蛋白,由天然材料提取,不含防腐剂、染色剂、香料,变性温度低,胶原蛋白纤维易散开,分子量也很低,同其他胶原蛋白相比,消化吸收快,不含脂肪成分。 胶原蛋白粉的质量很容易用肉眼分辨,因为它无添加其他成分,并具有抗癌效果和促进血液凝固止血的效果,还能对侵入体内的病原体生成抗体,从而增进身体免疫 力。大量服用袖瘦胶原蛋白时,可作为氮分解物,以尿和汗液的形式排出体外,不会在体内形成堆积。并且,同其他食品或材料一起服用时,不会破坏营养源。 此外,胶原蛋白 粉不仅具有很好保湿功效,还易于皮肤吸收,且热稳定性高,可达120°C。 (血液检查结果表明,每日摄取鱼皮胶原蛋白的人同摄取前相比,血液中氨基酸的浓度明显提高。这是因为,人体可依靠血液吸收的氨基酸再造胶原蛋白。因此,骨质疏松、变形性关节炎、过敏性皮炎患者或花粉过敏患者,若长期摄取胶原蛋白,可增强各组织功能,有效改善症状。 与传统化妆品中的胶原蛋白 相比,胶原蛋白粉保湿效果更好,更易于皮肤吸收。此外,采用口服方式,可使身体更加年轻。如今,定

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胶原蛋白的分类

相关专题 胶原蛋白——商业与学术声名兼得有道理 从类型分 多细胞动物体内所含胶原蛋白 成分,目前已知种类至少有十九种如下表: 形式 各单链分子 量 组织分布 Ⅰ 100,000 皮肤、骨骼、血管等多数结缔组织 Ⅱ-trimer 100,000 细胞培养 、肿瘤 Ⅲ 100,000 软骨 Ⅳ 100,000 血管、皮肤、肉芽组织 Ⅴ 175,000~185,000 细胞基底膜 Ⅵ ? 透明软骨外之大部分细胞周

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胶原蛋白的常见问题解答

相关专题 胶原蛋白——商业与学术声名兼得有道理 1、口服胶原蛋白 的效果怎么样? 答:胶原蛋白属于肌肤的营养源,所以改善肤质和体质需要慢慢调养,一般情况需要服用1个月后会有明显改善,连续服用2-3个月,周身肌肤变很好,身体的整体素质得到非常显著的提高。专家建议食用小分子 胶原蛋白是很不错的,最易被人体吸收。 2、多大年龄服用胶原蛋白 最好? 答:肌肤是女性一生必穿的“外套”,丝滑细腻的肌肤是每个女人的追求,皮肤专家称松弛比皱纹更可怕!建议女性从20岁后就应服用,不要等肌肤出现了明显衰老症状再解决,那样解决起来会更复杂。 3、长期服用胶原蛋白 对人体有毒副作用吗? 答:不会的。口服胶原蛋白 是一个绿色天然的营养产品。胶原蛋白顾名思义就是一种胶质的蛋白质,人体主要的成分就是蛋白质,所以没有任何毒副作用。 4、胶原蛋白与化妆品有什么不同? 答:化妆品顾名思义只能起到化妆掩盖作用,无法根本解决肌肤的衰老。口服胶原蛋白是从肌肤衰老根源入手的天然营养品,直接作用于引起皮肤衰老的真皮层,增加肌

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蛋白分离措施详述

相关专题 随着分子生物学的迅速发展,尤其是基因工程 的进步,越来越多的蛋白质药物逐渐被开发并应用于疾病治疗中,因此掌握将目的蛋白质最快最有效地分离提取纯化出来的方法,越来越重要,本文就蛋白质的提取、分离纯化作个介绍。 一、蛋白质(包括酶)的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。 (一)水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。但另一方面,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温(5度以下)操作。为了避免蛋白质提取过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等)。 下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的

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什么是胶原蛋白

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胶原蛋白粉的的特点和使用方法

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胶原蛋白多肽促进软骨组织的再生

相关专题 胶原蛋白——商业与学术声名兼得有道理 位于基尔的 Collagen Research Institute(简称 CRI)的研究人员通过与基尔大学 (Kiel University) 合作,已经证实特殊生物活性胶原蛋白 多肽 (FORTIGEL(R)) 在细胞实验环境中有刺激作用。上周末,CRI 在国际骨关节炎研究会(Osteoarthritis Research Society International,简称 OARSI)在蒙特利尔举行的大会上介绍了其研究发现。CRI 的研究为同样在大会上公布的由哈佛医学院 (Harvard Medical School) 和塔夫茨医学中心 (Tufts Medical Center) 共同进行的临床试验的结果提供了一个解释。在专业成像(核磁共振成像 (MRI))技术的帮助下,这项临床试验表明,FORTIGEL(R) 能刺激膝关节软骨细胞的新陈代谢并促进软骨组织的再生。 CRI 研究人员与基尔大学合作,直接对细胞采用分子 生物学和蛋白质化学分析方法,以证明 FORTIGEL(R) 的刺激

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带你看清胶原蛋白的实力所在

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蛋白质定量实验方法大全

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蛋白水解酶缘何溶解不了蜘蛛丝

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