动物实验前应去除实验操作局部的被毛，以免影响实验操作和观察。常用的被毛去除方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脱毛法四种。 一、拔毛法 实验动物被固定后，用食指和拇指将暴露部位的毛拔去。进行采血或动、静脉穿刺时，常用此方法暴露血管穿刺的部位。拔毛不但暴露了血管，而且刺激了局部组织产生扩张血管的作用。如作兔耳缘静脉和鼠静脉采血，就要拔去上述静脉表面的被毛。 二、剪毛法 实验动物被固定后，用水湿润局部被毛，绷紧局部皮肤，用剪刀紧贴皮肤表面剪去被毛。这是家兔和犬颈部手术，家兔胸、腹部手术，局部皮肤需要去除被毛时常采用的方法。注意剪毛过程中切不可提起被毛，以免剪伤皮肤。同时为了避免被毛到处飞扬，应预先准备一个盛有自来水的杯子装载剪下来的被毛。 三、剃毛法 实验动物固定后，用刷子蘸温肥皂水将需要暴露部位的被毛湿透，用剪刀剪去被毛，然后用剃毛刀逆被毛生长方向剃去残留被毛。剃毛时必须绷紧局部皮肤，尽量不要剃破皮肤。剃毛法常用于大动物手术区域皮肤的术前准备。剃毛刀除专用刀具外，尚可用止血钳夹持半片新剃须刀片代替，但要小心不要割破皮肤或血管。 四、脱毛法 脱毛

一、小鼠的抓取保定 小鼠性情较温顺，挣扎力小，比较容易抓取和保定。抓取时，用左手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部（如图11-3 所示）放在格板或铁笼上。趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小鼠的尾巴根部握入手掌（如图11-4 所示）；放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠（如图11-5 所示），完成抓取保定。注意，抓小鼠尾巴应抓住尾巴中部或根部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，因为这时小鼠的重量全部集中到尾端，如果小鼠挣扎，有可能弄破尾端。 在进行解剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可将小鼠用线绳捆绑在木版上，或固定在尾静脉注射架及粗试管中。 引自：Victoria solberg:Laboratory manual for animal technicians 二、大鼠的抓取保定 抓取大鼠前最好戴上防护手套，右手轻轻抓住大鼠尾巴的中部并提起，迅速放在笼盖上或其他粗糙面上，左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行，以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和

一、分组 （一） 分组原则 实验动物分组应严格按照随机分组的原则进行，使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组中去，尽量避免人为因素对实验造成的影响。 （二） 建立对照组 实验动物分组时应特别注意建立对照组。对照组可分自身对照组和平行对照组。 1 ．自身对照组 自身对照是把实验动物本身在动物实验前、后两阶段的各项相关数据，分别作为对照组和实验组的结果并进行统计学处理。 2 ．平行对照组 平行对照组分正对照组和负对照组（空白对照组）两种。正对照组是对实验动物实施与实验动物相同但排除了所要观察的目的因子（如治疗手段或药物）的处理，负对照组则不作任何处理，这种方法就是平行对照组。例如要观察某种药物的药效，对实验组动物采用肌肉注射的给药方法；正对照组动物同样进行肌肉注射，但注射的不是药物而是同等剂量的生理盐水，以便排除肌肉注射生理盐水可能产生的影响；负对照组动物则不进行肌肉注射，并与实验组动物和正对照组动物在相同的环境和条件下饲养，作为空白对照。 二、标记编号 对随机分组后的实验动物进行标记编号，是动物实验

选择实验动物的原则 科学研究、医疗实践、生物制品的生产和检定都离不开实验动物，为了保证实验结果的科学性、重复性，必须选择标准化及与实验目的相适应的实验动物。 在某种意义上讲，选择适宜的实验动物来进行实验，是科学研究成功的关键。一般应遵循以下的原则： 一、选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物 利用实验动物某些与人类相近似的特性，通过动物实验对人类的疾病发生和发展的规律进行推断和探索。例如，在结构与功能方面，哺乳动物之间存在许多相似点，从解剖学上看，除在体型的大小比例存在差异外，身体各系统的构成基本相似，因此，它们在生命活动中基本功能过程也是相似的。 从进化的角度看，猩猩和猴与人类最接近。在解剖学、组织器官功能、白细胞抗原及染色体带型等方面与人相似，用这些动物试验的结果来说明人则很有说服力。 以高胆固醇膳食饲喂兔、鸡、猪、狗、猴等动物时，均可诱发动物的高脂血症或动脉粥样硬化。但猴和猪除有动脉粥样硬化外，心脏冠状动脉前降支形成斑块、大片心肌梗塞，情况与人更为相似。 一些带有自发性疾病的动

一、免疫学研究中实验动物的选择 在免疫学研究中，常选用以下的几种实验动物： (一)大鼠:大鼠对绵羊红细胞和牛r球蛋白的免疫反应有品系差异。大鼠有抗体IgE,蠕虫感染常能诱发大量的IgE抗体，它们存在于血液循环中,常规的免疫法只能使大鼠产生少量的抗体，在体内存在的时间较短。百日咳杆菌免疫大鼠主要产生IgE,如在此抗原中加入福氏完全佐剂，免疫大鼠则产生IgGa。 (二)小鼠：小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgG1、IgG2a和IgG2b。 小鼠很少见到典型的迟发型变态反应，也不象其它动物那样有规律。能诱发速发型变态反应，其全身性过敏反应的特点是循环不畅，循环性虚脱，常在几小时甚至10到 20 分钟死亡。BALB/c小鼠常用于制备单克隆抗体。 (三)豚鼠：豚鼠中已确定的免疫球蛋白有：IgG(IgG1、IgG2)、IgA和IgE。IgG1 是变态反应的媒介，IgG2在抗原抗体的反应中起结合补体的作用。 豚鼠除作为补体的来源外，还被用于结核菌素的皮内试验和接触过敏物质的迟发型变态反应的研究。豚鼠和人的结核菌素反应差别是有

采血方法的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、CI-离子浓度，必须采取动脉血液。 采血时要注意：⑴采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃为宜；⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒；⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. １．取少量血 ａ．尾静脉　　 大鼠、小鼠 ｂ．耳静脉 　　兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 ｃ．眼底静脉丛 　兔、大鼠、小鼠 d．舌下静脉 　　兔 e．腹壁静脉 　　青蛙、蟾蜍 f．冠、脚蹼皮下静脉 　鸡、鸭、鹅 ２．取中量血 ａ．后肢外侧皮下小隐静脉　　　狗、猴、猫　 ｂ．前肢内侧皮下头静脉 　　　　狗、

当前，动物实验和实验动物都要求达到实验室操作规范（good laboratory practice, GLP）和标准操作程序（standard operating procedure, SOP）这些规范和操作对实验动物和实验室条件，工作人员素质，技术水平和操作方法都要求标准化。所有药物的安全评价试验都必须按规范进行。这是动物实验和实验动物总的要求。 1．3R 要求在国际上已推广，实验工作者要按3R去做。3R是指Reduction（减少）、Replacement（替代）和Refinement（优化）。“减少”是指减少试验用的动物和试验的次数；“替代”是指尽可能采用可以替代实验动物的替代物，如用细胞组织培养方法，或用物理、化学方法代替实验动物的使用。“优化”是指对待实验动物和动物实验工作应做到尽善尽美。 2．从微生物学和寄生虫学标准去选择实验动物。要求选用三级的实验动物，原因是三级实验动物已经排除了人兽共患疾病，排除了实验动物本身的传染病，也排除了影响实验研究的相应微生物和寄生虫，使实验研究处于没有或很少有外源干扰的情况下进行。排除这些干扰有利于实验的顺利

一、两栖纲 蛙与蟾蜍与人类的关系疏远、个体小、易于饲养。有冬眠、体外受精繁殖。蛙在发育过程中呼吸系统的鳃转变成肺。蟾蜍的皮肤薄，有毒腺能分泌蟾蜍素，特别是耳下腺分泌量最多。蛙的离体心脏常为生理、药理研究心脏生理、药物作用的标本。腓肠肌坐骨神经标本可作神经肌肉试验。刺激蛙的皮肤可观察反射弧的作用。破坏蛙的脊髓可造成脊髓休克。在显微镜下观察肠系膜血管反应，可见血栓形成，血流阻滞循环障碍等现象。 1．心血管生理，神经肌肉生理血栓形成。 2．乙酰胆硷含量测定试验（蛙腹直肌）。 3．观察血管的反应性实验（肠系膜血管，下肢血管灌注等）。 4．妊娠诊断试验，内分泌、生殖和胚胎学研究。 5．变态与遗传学研究。 二、爬行纲 蛇与人类关系疏远。可作再生，神经生理和毒物（抗凝）的研究。蛇毒可用以制备抗血清。蛇毒的分离和提取物用于镇痛、抗癌、溶解血栓等。 1．再生，神经和毒物研究。 2．蛇毒制备抗血清，分离提取蛇毒可作镇痛、抗癌、溶解血栓用。 三、鸟纲 鸡、鸽等与人类的关系远。鸡的体温较高（38℃），无汗腺、听觉敏感。鸡胚是病毒学研究、制造牛

第一章 总 则 第一条 为加强全国实验动物质量管理，建立和完善全国实验动物质量监测体系，保证实验动物和动物实验的质量，适应科学研究、经济建设、社会发展和对外开放的需要，根据《实验动物管理条例》，制定本办法。 第二条 全国执行统一的实验动物质量国家标准。尚未制定国家标准的，可依次执行行业或地方标准。 第三条 全国实行统一的实验动物质量管理制度。 第四条 本办法适用于从事实验动物研究、保种、繁育、饲养、供应、使用、检测以及动物实验等一切与实验动物有关的领域和单位。 第二章 国家实验动物种子中心 第五条 实验动物品种、品系的维持，是保证实验动物质量和科研水平的重要条件。建立国家实验动物种子中心的目的，在于科学地保护和管理我国实验动物资源，实现种质保证。 国家实验动物种子中心的主要任务是：引进、收集和保存实验动物品种、品系；研究实验动物保种新技术；培育实验动物新品种、品系；为国内外用户提供标准的实验动物种子。 第六条 国家实验动物中心种子中心是一个网络体系，由各具体品种的实验动物种子中心共同组成。 实验动物种子中

第一章 总 则 第一条 为了加强实验动物的管理工作，保证实验动物质量，适应科学研究、经济建设和社会发展的需要，制定本条例。 第二条 本条例所称实验动物，是指经人工饲育，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。 第三条 本条例适用于从事实验动物的研究、保种、饲育、供应、应用、管理和监督的单位和个人。 第四条 实验动物的管理，应当遵循统一规划、合理分工，有利于促进实验动物科学研究和应用的原则。 第五条 国家科学技术委员会主管全国实验动物工作。 省、自治区、直辖市科学技术委员会主管本地区的实验动物工作。 国务院各有关部门负责管理本部门的实验动物工作。 第六条 国家实行实验动物的质量监督和质量合格认证制度。具体办法由国家科学技术委员会另行制定。 第七条 实验动物遗传学、微生物学、营养学和饲育环境等方面的国家标准由国家技术监督局制定。 第二章 实验动物的饲育管理 第八条 从事实验动物饲育工作的单位，必须根据遗传学、微生物学、营养学

GB 14923-2001 哺乳类实验动物的遗传质量控制 前 言 本标准由1994年发布的国家标准GB 14923-1994《实验动物 哺乳动物的遗传质量控制》修订而成。修订中，主要是依据《国际小鼠遗传标准命名委会》1996年发布的《近交系小鼠命名规则》，对原标准中《遗传分类及命名原则》部分内容进行了增减：删去了原标准中关于近交系部分的内容，增加了重组同类系的内容，与国际上最新版本的权威文件一致。另外，考虑到转基因动物的培育及使用在实验动物及相关领域日益广泛，目前还没有一个国际上的权威机构制定发布相关标准及文件，美国国家研究委员会组织权威专家成立了《转基因动物标准命名委员会》，并于1992年制定发布了《转基因动物标准命名》的文件，在美国和各发达国家普遍接受和执行这一文件中的主要原则。本次修订中等效采用美国1992年发布的《转基因动物标准命名》规则，增加了有关转基因动物分类及命名的内容。 本标准与GB/T14927.1-2001《实验动物

甲型肝炎血清学诊断依据： 凡急性期肝炎患者血清抗-HAV-IgM和/或抗-HAV-IgA阳性者。 急性期和恢复期双份血清抗-HAV（总抗体）或抗-HAV-IgG效价呈≥4倍升高者。 急性期早期粪便中或血中抗-HAV-Ag和/或HAV-RNA阳性者。 以上四项中任一项阳性即可确诊。 　HBV感染血清学诊断依据： 血清HBsAg（和HBeAg）阳性者。 血清HBeAg阴性、但抗-HBc-IgM、或抗-HBs、或抗-HBc阳性者。 血清HBV DNA、或HBV DNA多聚酶（DNA-P）、或HBeAg、或抗-HBe阳性者。 HBV感染指标不明显，或只有抗-HBc单项阳性，而肝内HBcAg、HBsAg或HBV DNA阳性者。 以上四项任一项阳性即可诊断为HBV感染。 　急性乙肝的确诊 发病前不久，经灵敏方法（ELISA、RIA等）检测HBsAg阴性、发病后阳转，而 且滴度（或比值、或S/C.O.值）较高者。 急性期血清抗-HBc-IgM高滴度阳性（例如C.I.＞4.0），

1、目前，造成高脂血症较常用的模型有链脲霉素法、Triton WR-1339（表面活性剂）尾静脉注射法、脂肪乳剂喂食法、蛋黄乳剂腹腔注射法。这几种方法中，以蛋黄乳剂法最为简单、常用。它的优点表现在：A 模型周期短。以腹腔注射时为起点，20h后血脂水平达峰，且全过程只须注射一次就可使血脂水平达到较高程度。B 文献资料表明，模型的血脂水平升高明显。与Triton WR-1339致高脂血症法比较，此法获得的血清TC值较高。 C实验材料及方法简单。主要材料为新鲜鸡蛋经生理盐水稀释成75%的乳液，容易配制；不须长时间灌胃，也是它的一个优点。 2、 方法及实验总进程 2．1方法 新鲜鸡蛋破壳后去掉蛋青，取蛋黄配成75%体积比的蛋黄乳液。实验时以0.5ml/只（或 其他剂量）腹腔注射并开始计时，20h后眼眶取血，离心取血清，检测血清TC、HDL-C、TG水平（送附属一院检验科检测）。进行血脉通降脂实验前，按照不同的剂量先行灌胃4~6天，末次灌胃1h后注射蛋黄乳液，如前检测各指标。 2．2实验总进程 本实验从3月28日至4月19日，共进行21天。前半段时间主要进行蛋黄乳剂模型的建立实

来源 大鼠（RAT）学名Rattus norvegicus,在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、家鼠属、褐家鼠种。 生活习性 生长发育： 新生大鼠体重约5-6颗，45天体重可达180克以上，此时可供试验用。成年雄性大鼠体重可达300-800克，此行可达200-400克。 活动规律 ：大书喜啃咬，白天常挤在一起休息，夜间活动，晚上活动量大，采食量良多，食性广泛，喜肉食。对光照、噪音敏感。 繁殖特性 ：大鼠2月龄性成熟，性周期4-5天，妊娠期为19-21天，哺乳期为21天，每台产仔平均8支。可根据引导涂片观察性周期中引导上皮变化，判断性周期中各个时期中卵巢、子宫与垂体激素变化的状态。 常用品系 SD大鼠:

利用细胞的功能筛选 与典型的受体-配体成键化验相比, 使用细胞的功能筛选有几个优点. 它可以识别拮抗肌和主缩肌的不同成键方式, 这通过测键能是分不开的. 同时, 在多步信号传递中有能筛选大量靶蛋白的优点. 由于有关于细胞的化合物吸收, 新陈代谢, 排泄, 以及细胞毒素等的信息, 可以忽略体外筛选后的额外步骤. 选择性杀死的策略 Rosetta Inpharmatics 是一家生物信息学公司, 致力于解释从DNA芯片获得的信息, 以著名的Rosetta Stone的名字命名, 他破译了古埃及文字. 公司与Agilent Technologies签署了战略伙伴协议以进一步发展并产业化Rosetta Inpharmatics的FlexJet™ 微矩阵. Rosetta Inpharmatics总裁兼Merck研究实验室负责基础研究的副总裁Stephen H. Friend发明了寻找"选择性杀手化合物"的矩阵法. 首先, 他们确定活体生物(通常是芽殖酵母)的类型并选出带有癌细胞缺陷的类型. 然后, 他们寻找仅杀死缺陷类型的而不伤害正常类型的药物. 这种方法目

兔是一个种属众多的动物。按动物分类学，兔可隶属于以下几个阶元，即： 动物界（Ani，nal ）， 脊索动物门（Chordata ）， 哺乳纲（Mammalia ）， 兔形目（Lag0，n0rpha ）， 家免科（Pzkas八mitg ），野兔科（Hurcs fami19）。 全世界野兔共有九属、53种。家兔是野生中穴兔（岩石兔）训化而来，经过世�世代代的选种繁育，产生并形成了60多个品种、200个左右品系。作为实验动物，�国际上已公认的，兔有6个近交系品系。 实验兔是实验动物（Laboratoryani，nals ）中的一种，它必须符合实验动物的规范与要求。所谓实验动物，是根据科学研究的要求定向培育而成，供科学实验的对象和材料；它必须具有明确的生物学特性和清楚的遗传背景，并经微生物控制和在特定环境条件下经过训化培育的动物。实验动物在生命科学中的作用，如物理化学实验中所需的精密仪器和高纯度的化学试剂一样，应具有较高的敏感性、较好的重复性和反应的一致性等特点。因此，只有通过训化培育，才能获得遗传性稳定、纯合性好的实验动物；才能发现和保留具有不同生物学特

Morris 水迷宫 本实验由美国科学家Richard GM Morris 于1981年建立。最初用于研究脑内结构对学习和记忆的调节作用，后来逐步发展成为目前最为常用的评价动物学习与记忆的模型。这一实验的基础是，啮齿类动物在水中有强烈的逃避水环境的动机，并以最快、最直接的途径逃离水环境。学会逃避水环境的过程体现动物的学习能力；根据周围环境进行空间定位，有目的地游往水中安全的地方（平台），体现动物的空间记忆能力。 （一） 实验设备 实验用大鼠或小鼠进行。大鼠水迷宫实验设备由上海欣软信息科技有限公司制作，包括一个灰色或黑色圆形水池（直径200cm，高100cm；小鼠规格尺寸减半）、一个平台（直径10cm）、一台跟踪摄像机以及摄像机相联的计算机（图25-1）。池内盛水，深50cm，水温为摄氏22~24℃。平台置于水面下2cm（小鼠为1cm）。在水中加入奶粉或牛奶将水搅浑以免让动物看清水下平台。摄像机位于水池中央上方200cm，可记录动物的位置、游泳距离和时间（从而可计算出游泳速度）以及游泳路径等。房间周围墙壁上贴上色彩鲜明、形状不同的图画用为迷宫外暗示（extr

恩他卡朋（Entacapone）是一种广泛用于帕金森疾病（PD）治疗的药物，是儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT） 的抑制剂。然而，恩他卡朋有胃肠副作用，临床上约10% 的服用者会出现腹泻。为了研究产生腹泻的机理， 科学家采用的新方法非损伤微测技术结合传统方法研究了恩他卡朋造 成腹泻的原因。 2011年， 首都医科大学的朱进霞实验室使用非损伤微测技术测定了Cl- 的流 速，短路电流（ISC）测定了带电的离子运输，放射性免疫方法（ RIA）测定了胞内的cAMP含量。 发现恩他卡朋增加了大鼠末梢结肠粘膜的ISC和Cl- 分泌， 顶端施加二苯胺2，2’-二羧酸（DPC）（一种Cl- 通道抑制剂）显著抑制了ISC，基底外侧施用布美他尼（Na+ - K+ -2Cl- （NLCC）共转运抑制剂）等显著抑制了Cl- 外 流。消炎痛抑制内源前列腺素（PG）的合成， 并且降低了粘膜下层肠神经的活性以及河豚毒素（TTX） 抑制的恩他卡朋引起的ISC的增加和Cl-的分泌。 恩他卡朋刺激大鼠结肠cAMP依赖的Cl-的分泌， 这个过程由内

逆流色谱技术是一种不需要任何固态载体的液液分配分离技术，以轻巧的聚四氟乙烯螺旋管做分离柱，根据物质在两个互不混溶的溶剂相中的不同溶解度��分配系数来实现连续的分配、传递、分离过程。 最早出现的液液分配装置是实验室里常用的分液漏斗。分配系数差异明显的物质，可以在分液漏斗中一次萃取实现分离，但实际遇到的问题往往是要分离性质极其相似的复杂混合物，这就需要进行多次萃取才能实现满意的分离。1944年发明了由大量试管组成的非连续式的逆流分溶装置，可实现分配分离，但仪器设备庞大复杂，溶剂系统容易乳化，溶剂消耗量大且操作时间太长。 日本的Yoichiro Ito（伊东洋一郎）等发现了互不相溶的两相溶剂在绕成螺旋管的小孔径管子里分段割据，并能在重力场作用下实现两溶剂相之间的逆向对流。当螺旋管在离心力场内转动时，会形成更强的两相分割趋势和对流趋势，这种分割和对流的过程是连续进行的，在此基础上发展起来了逆流色谱技术（Countercurrent Chromatography, CCC），成为一个新兴的分离科学分支。 逆流色谱的设备从非行星式的环形螺旋管离心仪、非同步行

人 肌酐(Cr) 酶联免疫分析（ ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，尿及相关液体样本中 肌酐(Cr) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 肌酐 (Cr) 水平。用纯化的人 肌酐 (Cr) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 肌酐 (Cr) ， 再与 HRP 标记的肌酐 (Cr) 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 肌酐 (Cr) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中人 肌酐 (Cr) 浓度。 试剂盒组成 ： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保