采用了公司最亲斤发明的特殊中和液Buffer N8，可使用户在8分钟内快速从1～5 ml细菌培养物（LB培养基）中提取多至30 mg高纯度的质粒DNA，适用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化、强壮细胞转染等分子生物学实验。

1. RNA提取的核心问题2. 样本的前处理3. 样本的裂解4. RNA的提取和纯化（TRNzol法&吸附柱法）5. RNA提取产物的检测

为大家介绍qPCR引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享qPCR引物实验验证，更多干货与你分享！

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课程亮点1、微生物与人类健康的关系2、微生物组学技术简介3、微生物组学数据解析4、研究思路及案例分享

本视频介绍了 ELISA 的实验技术、开发方法、常规应用等内容，对 ELISA 使用过程中常规问题进行了解答。

免疫组织化学染色是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术，但随着精准化治疗的进展和蛋白组学研究的深入，传统的免疫组化单染因具有一定的局限性，在某些方面已无法满足需求，而免疫组化多重染色可以在同一张组织切片上对多种抗原蛋白进行共定位和共表达，这对于理解组织微环境中各种细胞间的关系，推演信号通路上下游蛋白表达的关系，制定临床诊断和治疗方案都有着非常重要的意义。本次讲座内容主要包括两大部分，一是介绍免疫组化酶双染的原理、方法以及实战案例；二是免疫组化多重荧光染色的原理、方法并结合案例进行分享。

原型物种人来源脂多糖（LPS）介导的急性肺损伤模式动物品系Wistar大鼠，SPF级，雄性，体重：180g~220g实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组(三个剂量梯度组)，15只每组实验周期24hours建模方法将大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾静脉后，按压住尾静脉1/3处，注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理盐水，给药剂量10mg/kg），从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作，但向尾静脉注射等体积的生理盐水。应用用于急性肺炎发病机制研究和相关药物筛选模型评价1.肺损伤后的大体观察：肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。2.肺的湿/干重比：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。建模后，大量液体渗出至肺泡和肺间质，导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h 后取出称干重，计算肺湿/干重比值。组织病理学取左肺4固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm）

CFS 无细胞蛋白表达与传统的基于大肠杆菌系统的蛋白表达相比，速度快，产量高，无包涵体困扰，对于膜蛋白、毒蛋白等特殊蛋白具有很强的适应性。其超高的表达效率和广泛的模板适应性可以大大加速实验流程，免去多次调试实验参数的困扰，特别适合各类蛋白结构和功能研究的客户使用，尤其适合因疫情导致实验延误的老师尽快赶上预期进度。

流式细胞术上样盲点

核酸纯化是大多数基因相关领域研究工作流程中的第一步。高质量和足够数量的 DNA 和 RNA 对于生物和医学许多领域的下游实验过程至关重要。但是对这一关键技术的原理和细节的了解往往会被大家所忽视。对于核酸纯化原理良好的理解可以极大地帮助您优化工作流程和排除现有实验过程中可能发生的问题。 此外，无论是病毒 RNA、线粒体 DNA 还是质粒的研究，或是在病原排查和癌症研究等领域，对高通量核酸分析的需求不断增加，我们往往需要选择一种适合于自动化的核酸纯化方法。在这次网络报告中，我们向您展示如何帮您实现核酸纯化的自动化，以提高样品通量的同时也提高实验的重复性。

1. 反转录的一般实验流程2. 反转录反应的关键因素 · RNA提取方法的选择 · RNA质量的评价与鉴定 · 反转录引物类型的选择 · 反转录酶的选择

测试

如果你对 Western Blot 技术知其然而不知其所以然，如果你希望实现 Western Blot 小白的华丽变身，本节课程，Dr. 赛将带您了解一切。

如果您正要开始进行蛋白质相关的研究，不知道怎么入手; 如果您需要用到蛋白凝胶电泳，却对其原理和应用不太熟悉；如果您想要了解各类凝胶电泳并灵活使用——Dr. 赛的这堂课定会对您有所帮助！

蛋白质组学研究一直是生物研究领域最基本的和广泛的方向。随着科学研究的深入，高水平期刊和基金项目对蛋白质组学实验数据和结果的要求日趋严谨，定量可重复，具有统计学意义的数据至关重要。Western blotting 技术是蛋白质研究最常用的技术，针对定量可重复的蛋白纯度，WB 技术检测蛋白纯度及相关应用进行介绍和分享。1. 蛋白浓度定量/除杂等样本前处理2. 电泳技术3. WB化学发光成像技术4. 多色荧光成像技术5. 原位蛋白定量/蛋白合成修饰检测

流式细胞术是非常让人着迷的实验。在众多医学研究手段里，如果说弱水三千只取一瓢的话，那我会首选流式细胞术。从我个人感受来讲，流式细胞术高速客观，具有统计学意义，能够处理复杂样本并同时获取多种参数，最最关键的是它性能可靠，可重复性非常好。虽然也存在一些局限，但流式细胞术比起传统的细胞生物学研究手段来讲完全可以获得「独孤求败」的桂冠了；如果算上共聚焦和膜片钳，当真可以算拉动现代细胞生物学的「三驾马车」了。虽然介绍流式细胞术的入门文章很多，很多同学也对流式细胞术耳濡目染已久，看师兄师姐做过无数，可真到自己做的时候却又总出问题。据毛老师多年观察，很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患，最常见的问题就是对照设置不合理，最后导致整体实验失败或数据不理想。因此，今天我们来谈谈成功的流式细胞实验设计都需要设置哪些对照。毫不夸张地说，设置合理的对照组是整个实验成功的关键；反过来说，如果你掌握了流式实验如何设置对照的精髓，对整个免疫学相关的实验设计都会有极大地帮助。流式对照至少有 5 种：生物学对照，空白对照，同型对照（Isotype control），补偿对照（也叫单阳性对照）和 FMO 对照，主要目的是为

ELISA检测系统可谓是免疫学 反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题，本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难，虽然有师兄师姐铺路，但还是常常做得一塌糊涂，比如说花板，假阳性，全显色，全部显色，显色比空白还低。 自己也为此苦恼过很长一段时间，随着自己技术水平得提高，或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气，也是熟能生巧吧，现在做方阵，做ELISA已是轻车熟路了，以前检测一种抗体用整整一下午还算得晕晕的，现在给我十个八个的从包被到显色，一个工作日基本搞定。下面就由我抛砖引玉地来说一下，做ELISA的经验总结:1、包被原的性质很重要：蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保存抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。还有有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法简要的列出如下:①亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②脂类物质

在哺乳动物卵子向早期胚胎转变的过程（oocyte-to-embryo transition, OET）中，翻译在减数分裂、合子基因组激活和早期胚胎发育过程中扮演了一个重要的角色。合子基因组激活（human zygotic genome activation, ZGA）作为生命起始时的第一次转录事件和启动胚胎发育进程的关键事件，在哺乳动物中仍未被完全理解清楚。尽管启动 ZGA 的关键转录因子在其他物种，如斑马鱼和果蝇等中被陆续发现，启动人类 ZGA 的关键转录因子仍然是一个未解之谜。 2022 年 9 月 8 日，清华大学颉伟教授、山东大学陈子江院士与赵涵教授团队合作在《科学》期刊以长文形式发表题为《翻译组与转录组联合图谱发现 TPRXs 参与人类合子基因组激活》（Translatome and transcriptome co-profiling reveals a role of TPRXs in human zygotic genome activation）的研究论文。研究不仅揭示了人-鼠早期胚胎翻译组动态变化的差异性和保守性以及可能原因，也鉴定出了人类合子基因组激活的关键调控因

糖尿病会显著增加认知障碍（包括轻度认知损伤和痴呆）的风险，严重威胁老年健康生存。然而，临床研究表明，控制血糖不能保护认知功能。因此，迫切需要进一步揭示糖尿病认知功能障碍的机制，寻找能够治疗糖尿病认知障碍的新策略。 脂肪组织功能异常在认知障碍发生发展过程中起着重要作用。脂肪组织产生的细胞因子如瘦素、脂联素等与大脑认知记忆功能的维持相关；同时，脂肪产生的炎症因子可通过诱导慢性中枢炎症反应，损伤海马神经功能，促进认知障碍发生。然而，目前针对这些脂肪组织相关机制的干预方法尚未能逆转认知障碍的进程。 除了可溶性的脂肪因子外，最新研究发现，脂肪组织也可分泌细胞外囊泡（EVs）作为新型脂肪因子在器官间通讯中发挥重要作用，如肝脏和骨骼肌，并参与了非酒精性脂肪性肝病和 2 型糖尿病的发展。然而，EVs 能否介导脂肪组织-大脑间通讯，尚不得而知。 2022 年 9 月 6 日，南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科毕艳教授团队和南京大学生命科学院张辰宇教授、李靓副教授团队合作，在 Cell Metabolism 期刊发表了题为：Extracellular vesicles mediate the commun