实验原理 DNA多态性是指DNA碱基顺序的差异性。这种差异性不仅存在于不同的植物之间，也存在于同一种植物的不同个体之间。RFLP多态性是指DNA限制性内切酶酶切片段长度的多态性(restniction fragment length olymophorphism)。由于碱基顺序的差异，在不同的种或同一个种的不同个体之间，它们的基因组DNA限制性内切酶位点的种类和数目不同，经特定的限制性内切酶切割后，所产生的限制性酶切片段在大小（长度）和数目方面自然也存在着差异。通过琼脂糖凝胶电泳分离和溴化乙锭染色，在紫外检测仪下观察，即可直接看到这种差异。电泳分离后，通过Southern杂交也可显示出已知DNA片段的差异。 实验试剂 1. 限制性内切酶 2. 10×限制性内切酶缓冲液 3. 0.5M EDTA(pH 8.0) 4. 溴化乙锭 5. 琼脂糖 实验设备 1. 电泳仪和电泳槽 2. 微量离心管 3. 低温冰箱 4. 37℃水浴锅

NanoCellect 的WOLF®细胞分选仪,轻柔分选，细胞活性高达98%以上，全程无菌无气溶胶产生，为您的实验保驾护航！ WOLF流式细胞分选仪简介 NanoCellect 的WOLF®细胞分选仪是对细胞分选的再定义，相较于传统流式具有革命性的创新，可丢弃式无菌微流控芯片完整保证实验全程无菌，无气溶胶生成；轻柔分选，细胞活性高达98%以上；单细胞获取快、准、稳，设备无内部管路，无需管路清洗，无需定期维护等。适合单细胞测序、细胞系开发、抗体开发、基因编辑、CRISPR 编辑、T 细胞单克隆、B 细胞单克隆、hiPS细胞单克隆等应用。WOLF流式细胞分选仪 WOLF流式细胞分选仪优势 ▲微流控芯片轻柔分选细胞，确保细胞高活性全程分选压力小于2psi, WOLF 比任何传统流式分选都要柔和，对细胞的伤害极低。此外对于组织酶解得到的还可以去除死细胞，轻松满足10x Genomics要求的细胞活性大于90%的标准，让您不再为细胞活性低而头疼！▲轻松实现单个细胞分选，简单高效WOLF流式细胞分选仪配备的N1单细胞分液仪，可以将细胞分选到96/384孔板中，每孔可分选1至100个细胞。单类细胞不

从图中可以看出，气相色谱仪通常由以下五个部分组成： 1)气源和载气的控制和测量 (1)气源 气源多采用高压瓶(氢、氮、氩等)做高纯气的储存器，并装有减压阀，使高压气体减压 成低压气体(0．1-O．5MPa)以供使用。钢瓶供给的气体称为流动相，又称载气。载气的作用 主要是把样品输送到色谱柱和检测器中。 (2)流量调节阀 可以调节载气的流速，常用的有稳压阀和针形阀。 (3)流速计用以测量载气流速。常用的有转子流量计和皂膜流速计等。 2)色谱柱和恒温器 (1)色谱柱 色谱柱的作用是把混合物分离成单一组分。一般常用不锈钢管或铜管内填充固定相构 成，管子成U型或螺丝形。一般柱管内径为2―8mm，还有内径更小的称为毛细管色谱柱， 柱管长度一般为1-4m或更长。 (2)恒温器 为了保持色谱柱或检测器内的温度恒定，色谱柱和检测器多置于恒温器内。一般常采用空气恒温方式。 3)进样器 把样品通进色谱柱的元件称进样器，其中包括汽化室和进样工具，汽化室的作用是将液 体或固体样品瞬间汽化为蒸汽。进样工具常有定量阀和注射器。

1． 工作原理 1.1 用途：VITEK-32全自动微生物分析系统，用于对临床标本分离细菌进行菌种鉴定及药物敏感试验分析检测。 1.2 检测原理：VITEK-32全自动微生物分析仪由真空充液泵/读数器/恒温器、电脑主机及打印机组成。真空充液泵三分钟内把样本注入试验卡中；读数器/恒温箱可同时容纳32个反应卡，自动恒定培养温度（35.5℃），每小时读取每张卡内反应变化数值；电脑主机负责分析资料的储存、系统的操作及分析程式的运作。分析仪自动进行细菌生化鉴定，VITEK试卡的反应池内含各种风干生化反应底物或抗菌药物，试卡由标准浓度菌液填充，然后放入测试架槽内，采用比色法/比浊法，应用动态学方法原理，读数器每小时光扫描测试卡，以获取卡片内样本在培养介质内生长变化值，自动检测每张卡片的反应情况，与数据库中的数据进行比较分析，达到系统预设的阈值时，自动报告检测结果。 1.2.1细菌鉴定：从临床标本分离并纯化的细菌，严格按无菌操作技术配制菌悬液、充液接种于鉴定卡内，放入VITEK-32全自动微生物分析系统读数器/恒温箱。测试卡内含有20~30多项生化反应试验，读数器每一小时通过光扫描并

正所谓“九层之台,起于垒土”，同样，要想拿到优秀的空间转录组实验结果，样本制备也是至关重要的！目前10x Genomics推出的Visium空间基因表达解决方案，支持新鲜/冷冻切片，优化升级后还可以支持FFPE样本，甚至结合免疫荧光染色。今天小编着重为大家介绍一下Visium 空间基因表达解决方案样本冰冻包埋的那些事儿！ Visium 空间基因表达解决方案支持的样本类型 目前，10x Genomics官网已经测试过的组织类型包括： 人类：心脏，肾脏（正常和肾炎），卵巢，乳腺（正常，浸润性导管癌，浸润性小叶癌），淋巴等； 小鼠：心脏，小肠和大肠，胃，肝脏，肾，四头肌，脑，肺，睾丸，甲状腺，胸腺，眼睛，舌头，脾脏等； 大鼠：脑，肾，心脏等 新鲜组织选取和预处理 组织大小：空间转录组Visium芯片的捕获面积为6.5mmX6.5mm，所以在选择样本前，首先确认好最佳的取材位置及合理组织大小，保证Vsium芯片的有效利用率。 组织预处理：新鲜组织样本取下后要迅速用预冷的PBS溶液或生理盐水进行冲洗，去除组织表面残留，然后用干净的吸水纸吸干液体。（此步骤一定要吸干水分，如有液体残留，O

MALDI-TOF-MS最初用于等分试样（1μL或更少）样品的质谱鉴定，用于检查肽的纯度或PMF。大批量的样品测定，往往使用Edman降解法测序或ESI-MS，如四极（Q）-TOF-MS 质谱。做出以上选择的原因，主要是因为MALDI技术进行分析，上样量不能超过0.5μL。这种样品制备方法极大地限制了MALDI技术检测的整体灵敏度，并且还限制了可以分析的肽浓度，因为肽和基质共结晶过程的质量对于检测的灵敏度和准确性都非常重要。MALDI技术通常将等体积的样品和MALDI基质溶液混合，将肽混合物干燥，连续洗涤使用预制型的薄层基质。该方法为精确和灵敏的MALDI检测创造了最佳条件。然而，这种样品制备方法制备的样品不能承受激光辐射，会被迅速漂洗。因此，该方法不适用于PSD光谱的蛋白质谱鉴定，因为PSD光谱法通常每个片段质量范围需要多达100甚至以上次数反复的激光辐射。如果在分析之前，使用小型吸附柱对较大体积的肽混合物进行浓缩，抑或通过向肽混合物中添加少量反相色谱珠的方式进行批量吸附。而进行批量吸附，只需要将磁珠吸附到的肽混合物进行洗涤，即可获得肽混合物，然后转移至上样处并干燥即可。这种批量吸附

上一期，我们为大家介绍了—Visium 空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南，本期我们将为大家介绍冰冻切片制备指南！满满的干货，记得收藏哦！首先，为大家推荐一款用于Visium空间基因表达解决方案的冰冻切片机——Leica CM1950! 其电动切片、步进马达确保冷冻切片的厚度、质量及切片间一致性；精细的定位控制可以满足对细微组织的精密切割；强大的制冷系统为切片温度提供了有力保障！ 在基于配备了CM1950冰冻切片机的条件下，在切片之前，我们需要考虑的主要问题有以下三个：1，冰冻切片面积的大小：因为芯片捕获区域的面积为6.5mm X 6.5mm，所以我们要控制切割区域在这个面积以内；2，冰冻切片的厚度：冰冻切片的厚度一般设置在10μm，但是根据不同的组织类型，切片厚度也会有所调整。例如脂肪含量较高的乳腺组织可能需要更厚的切片；3，冰冻切片质量：由于不同的组织样本中脂质、蛋白质含量有所差异，冷冻组织的硬度和延展性并不相同，因此切片的环境温度也有所要求。温度过低，会导致组织块过硬，切片出现碎裂、薄厚不均或孔洞；而温度过高，导致组织变软，硬度不够，切片无法成形或者出现褶皱。 冰冻切片前实

[关键词]医学；分子生物学技术；全自动实室；生物芯片随着人类基因组计划的完成及蛋白质组计划的启动，医学作为临床医学中的一门新兴的综合性学科，为人类疾病的诊断，治疗监测，预后判断提供大量的新技术及新的实室监测指标。在过去短短10年中，医学发展日新月异，临床实室的实设备已高度自动化及络化，极大提高了临床工作的效率。只有在不断发展和完善中，才能创造出更多新技术，新项目，更好为患者和临床所应用，发挥医学应有的作用[1]。当然在发展过程中也不可避免存在着一些问题。现就其发展的现状与展望做一简单的综述。1医学发展现状[2]11重“硬”轻“软”近年来，我国医学领域的发展主要集中在技术和仪器上。目前，在“硬件系统”上，国内的许多医院已经不比国外差，但一些“软件系统”却还有一定距离。在国外，医学已经发展成为一门和管理学，经济学，伦理学等密切相关的独立的医学学科。而我国的医学目前在一定程度上还只能称之为“实医学学”，理论上还没有得到应有的重视和发展[3]。12测准确性可靠性有待加强目前国内除了生化，免疫的部分测项目的质控工作比较有成效外，其他学科的质控工作还没有发挥应有的作用，全国范围内参加质控的实室还不

作为一个母胎 Solo 长达近三十年的名贵科研犬，总是能依靠敏锐嗅觉，发现在实验室、办公室、朋友圈无处不在弥漫着夏季荷尔蒙的味道。根据笔者多年的经验判断，在七夕这个浪（有）漫（毒）的节日来临之际的一个月内，想必会有一大波狗粮前仆后继、无孔不入的袭来……如果你还未拥有爱情，我们不妨一起来追随那些前辈们的脚步，去感受恋爱中的酸甜苦辣，汲取养分与教训。暗恋隔壁姑娘，他成了「痴汉」人生有三大幻觉：有人敲门；手机震动；TA 喜欢我。但作为国际著名物理学家的 Gary Cuba 却对此嗤之以鼻，他已经暗恋同住一栋公寓的音乐会小提琴家 Jillian 很久了。虽说住在同一栋公寓大楼，但他们之间却没有任何交集。但是，正值事业巅峰的 Gary 想当然地认为，Jillian 同样暗生情愫地喜欢着自己，只是碍于少女情面，羞于表达罢了。于是「痴汉」Gary 便一直暗中窥视着 Jillian 的生活，直到发现她竟然和管弦乐队里的乐手有着亲密的关系......求爱不得的 Gary 心碎欲绝，他打算通过「量子纠缠的手段来改变世界线的收束」，使自己来到一个不会再爱 Jillian 的世界中（说人话，其实就是自尽...

“中国应加大在生物芯片研发方面的投资力度，实现强强结合，尽快建立国家级生物芯片工程研究中心，迅速研究开发出一批具有我国自主知识产权的专门技术，积极参与到国际竞争的行列中去。”2000年2月29日，程京在为国务院及有关部委领导作报告时如此呼吁。 他的建议引起了国家对生物芯片技术的高度重视。2000年9月30日，北京博奥生物芯片有限责任公司正式成立，并承担起生物芯片北京国家工程研究中心的投资建设和运营管理任务。 作为博奥生物总裁兼技术总监、生物芯片北京国家工程研究中心主任，程京没有辜负期望。自2002年1月承担了国家“863”功能基因组和生物芯片重大专项生物芯片的研究与开发课题后，他带领课题组成员经过三年研发，终于圆满完成规定任务，建立了与我国生命科学研究、医药研究及生物技术发展密切相关的生物芯片系统技术平台，为我国的生命科学基础研究、新药开发、医学诊断和生物检测等行业提供了有力的核心技术支撑和产品服务，为我国生物芯片制作装备及检测仪器的产业化打下了基础，实现了我国生物芯片从无到有，从弱到强的飞跃。 5项产品将实现规模化出口 “生物芯片技术是在后

　　当生物芯片和样品探针杂交完毕后，就需要对杂交结果进行图象采集和分析。一般膜芯片的杂交都用同位素p32、p33作标记，其信号的检测需通过传统的磷光成像系统来完成。而对于用荧光标记的玻璃芯片杂交后的检测，则需要用专门的荧光芯片扫描仪。 　　1. 磷感屏成像系统Cyclone Storage Phosphor System 　　Cyclone磷屏成像系统为美国Packard公司生产的第一台集高分辨率、高灵敏度和5个数量级的线性范围于一身的计算机控制数字化自动放射成像分析系统，由于其使用方便、快捷、自动化程度、分辨率、图像清晰度均很高，既可定位亦可定量，目前已广泛应用于核医药学、细胞与分子生物学、生物化学、药理学、基因工程学、药物代谢动力学、放射免疫及受体免疫等多方面实验研究，成为十分方便的有力工具。其优异品质主要得益于Packard专利的激光技术和共聚焦成像系统。应用范围为我们前面介绍的DNA Macroarray以及Northern、Southern、Western Blot.，手工测序，放射性原位杂交等的同位素结果检测。使用Cyclon磷屏可以大大缩短研究周

一旦生物样品被收集采摘，它的RNA会立刻变得非常不稳定，极易被降解。由于特异及非特异的RNA降解，或者由于应激反应产生新的RNA都会引起RNA状态的改变。对于生物芯片、基因表达矩阵分析（Array Analysis）、定量RT-PCR等实验来说，采样后立即稳定样品里的RNA以保存当时RNA的表达状态，是精确/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的，往往需要将液氮或者干冰带到采样现场，采样后立即运回实验室保存。对于实验者来说，无论是采样还是将样品取出以抽提RNA都非常不方便。QIAGEN公司最新推出的RNeasy Protect Kits提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent，只要在采样后立即加入这种试剂，即可保护样品中的RNA完整而不被降解。在RNAlater中的样品RNA可以在37度下稳定保存1天，或者在18—25度保存7天，2—8度稳定4周，或者在-20度永久保存。这种技术为在不同温度下采样，运输和保存样品提供了极大的方便，特别适用于各种动物组织、培养细胞、细菌、白细胞，但必须说明的是它不适用于全血或体液中RNA的保存。

相关专题 生物芯片技术 是近年来兴起的一项综合性的高新技术，它以微机电系统技术和生物技术为依托，将生命科学研究中的许多不连续过程（如样品制备、生化反应、检测等步骤）集成并移植到一块普通邮票大小的芯片上去，并使这些分散的过程连续化、微型化，以实现对大量生物信息进行快速、并行处理的要求。 生物芯片概念的提出受到了计算机芯片的启发。狭义的生物芯片是指包埋在固相载体（如硅片、玻璃和塑料等）上的高密度ＤＮＡ、蛋白质、细胞等微阵列芯片，如ｃＤＮＡ微阵列、寡核苷酸 微阵列和蛋白质微阵列等。这些微阵列由生物活性物质以点阵的形式有序地固定在固相载体上形成。在一定的条件下进行生化反应，将反应结果用化学荧光法、酶标法、电化学法显示，然后用专用的生物芯片扫描仪或电子信号检测仪采集数据，最后通过专门的计算机软件进行数据分析。广义的生物芯片是指任何能对生物分子进行快速并行处理和分析的微型固体薄型器件。 自从１９９１年福多尔（Ｓ． Ｐ． Ａ． Ｆｏｄｏｒ）等人提出ＤＮＡ芯片至今，以ＤＮＡ芯片为代表的生物芯片技术已经得到了快速的发展。目

　　生物芯片（biochip ）是指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描或电荷偶联摄影像机（CCD ）对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。由于常用玻片/ 硅片作为固相支持物，且在制备过程模拟计算机芯片的制备技术，所以称之为生物芯片技术。根据芯片上的固定的探针不同，生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片，另外根据原理还有元件型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片。如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片；如果芯片上固定的分子是寡核苷酸探针或DNA ，就是DNA 芯片。由于基因芯片（Genechip ）这一专有名词已经被业界的领头羊Affymetrix 公司注册专利，因而其他厂家的同类产品通常称为DNA 微阵列(DNA Microarray) 。这类产品是目前最重要的一

相关专题 生物芯片技术通过微加工工艺在厘米见方的芯片上集成有成千上万个与生命相关的信息分子，它可以对生命科学与医学中的各种生物化学反应过程进行集成，从而实现对基因、配体、抗原 等生物活性物质进行高效快捷的测试和分析。它的出现将给生命科学、医学、化学、新药开发、生物武器战争、司法鉴定、食品与环境监督等众多领域带来巨大的革新甚至革命。 生物芯片技术 研究的背景 原定于2005年竣工的人类30亿碱基序列的测定工作（Human Genome Project，基因组 计划）由于高效测序仪的引入和商业机构的介入已经完成，。怎样利用该计划所揭示的大量遗传信息去探明人类众多疾病的起因和发病机理，并为其诊断、治疗及易感性研究提供有力的工具，则是继人类基因组计划完成后生命科学领域内又一重大课题。现在，以功能研究为核心的后基因组计划已经悄然走来，为此，研究人员必需设计和利用更为高效的硬软件技术来对如此庞大的基因组及蛋白质组信息进行加工和研究。建立新型、高效、快速的检测和分析技术就势在必行了。这些高效的分析与测定技术

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相关专题 生物芯片技术 从诞生以来就受到相关科研人员的广泛关注与认同，是未来10年最具发展潜力的技术。本文从生物芯片的特点、分类、制备步骤、发展动向、相关仪器、各种芯片之间的差别等方面对这一技术进行全面介绍。 一、生物芯片的定义 生物芯片(Biochip或Bioarray)是指包被在固相载体 上的高密度DNA、抗原、抗体、细胞或组织的微点阵(microarray)。 生物芯片包括DNA芯片、抗原 芯片、抗体芯片、细胞芯片、组织芯片等。 1998年世界十大科技突破之一。 未来十年最具发展潜力的技术。 二、特点 1.高度并行性：提高实验进程、利于显示图谱 的快速对照和阅读。 2.多样性：可进行样品的多方面分析，提高精确性，减少误差。 3.微型化：减少试剂用量和反应液体积，提高样品浓度和反应速率。 4.自动化：降低成本，保证质量。 三、生物芯片分类 尚未统一。广义上：矩阵型芯片、处理型芯片。根据固化材料可分为基因芯片 、蛋白质芯片、细胞芯片、

相关专题 　　生物芯片是指包被在硅片、尼龙膜等固相支持物上的高密度的组织、细胞、蛋白质、核酸、糖类以及其它生物组分的微点阵。芯片与标 记的样品进行杂交，通过检测杂交信号即可实现对生物样品的分析。目前常见的生物芯片主要有基因芯片，，蛋白质芯片、组织芯片等。基因 芯片也可以叫做 reverse northern - dot blots。目前主要有检测基因突变的基因芯片和检测基因表达水平的基因表达谱芯片。基因芯片技术 主要包括芯片微阵列制备、样品制备、杂交、信号的检测和分析等。蛋白质芯片主要是蛋白质如抗原 或抗体在载体上的有序排列，依据蛋白质 分子、蛋白质与核酸相互作用的原理进行杂交、检测和分析。从不同的组织内进行活体解剖后取出圆柱状的组织，然后包埋在受体区组内，这样的石蜡块集成体便构成了组织芯片。 1 生物芯片的应用 1.1 检测基因的表达 　　目前检测基因表达的方法主要有Northern、RT- PCR、mRNA差异显示、cDNA代表性差异分析等。这些方法都只能对少数几个基因的表达 进行分析。但生物体是一个复杂

相关专题 现在，面对着人满为患的大医院，很多患者觉得上医院看病是件苦差事。不仅挂号人多、病理检查耗时，有时还有误诊的情形发生。结果，不但耽误了治疗时间，还浪费了许多时间和金钱。 　　然而，进入21世纪后，生物科技和半导体科技的进步和结合，将有可能大大改善这种情况。这两种科技结合后，最具代表性的产品就是“生物芯片”。以治疗糖尿病为例，未来只要将生物芯片植入糖尿病患者的皮肤中，用扫描仪一扫，病人的血糖指数立即显示，随时都可测量。 　　微小便利，一测便知对许多人而言，“生物芯片”这个名词是相当陌生而新颖的。提到芯片，在这个电脑时代，大家很自然地会想到电脑芯片。在电子工业上，芯片用来制造集成电路。芯片或微芯片的制造使电路由大变小，它将过去有数个房间大的分离元件电脑，缩微成现在只有书本大小的笔记本式电脑。 　　生物芯片则是指以电子工业中常用的硅芯片或其他材质，利用电子工业中微电子技术，将大型的仪器微小化，在微小化后的装置上，放置多种特定生物材料（如核酸或酶），这些生物材料可以与其他特定物质发生生化反应，反应后的信号可被定性、定

相关专题 组织芯片具有省时高效误差小等优点，自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的特点、制备方法、制备过程、分类、优点、应用、研究分析等方面对这一技术进行介绍。 组织芯片的概述 组织芯片(tissue ChIP )，也称组织微阵列(tissue microarrays)，是组织芯片是由生物芯片发展延伸而来的一种特殊的生物芯片技术，是生物芯片重要的组成部分，是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上，进行同一指标的原位组织学研究。 组织芯片技术是以形态学为基础的分子生物学新技术, 可以做常规病理学的HE 染色、各种免疫组织化学染色、组织化学染色、原位杂交、荧光原位杂交、原位PCR和原位RT-PCR 等, 可在同一张切片上高通量获得组织学、基因和蛋白的表达信息,这项技术的应用范围涵括了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域。 组织芯片的特点 1.体积小，信息含量大。 2.获得大量结果。 3.减少试验误差。 4.省