实验简介自然水体中病毒、细菌的含量通常可作为水质的评判指标。近年来，借助流式细胞仪对自然水样进行病毒、细菌的鉴别与计数已经成为很多科研工作者研究的热点。本实验用核酸染料 SYBR green I 对自然水样进行染色，借助 CytoFLEX 流式细胞仪检测，区分水体中所含的病毒与细菌，与传统的显微镜计数及平板菌落计数法等相比，具有速度快，操作简便，结果准确的优点。材料与方法▶ 试剂▶ 样品制备Sample Type自然水体SpeciesAge of specimen新鲜样本Prep Method1. 配置 Tris-EDTA buffer（TE，pH=7.5）；2. 以 SYBR green I 染色的 TE 溶液 为对照设定阈值；3. 以 SYBR green I 染色的噬藻体界定病毒的大体位置，以 SYBR green I 染色的大肠杆菌界定细菌的大体位置；4. 检测 SYBR green I 染色的湖水样本中病毒与细菌的含量。▶ 仪器配置Instrument ConfigurationVSSC (Yes/No)Plate or Tube FormatB5-R3-V5YesTube数

Mutation SurveyorMutation Surveyor 是美国Softgenetics公司和中国华生恒业科技有限公司联合开发的Mutation/SNP检测软件，用来实现高通量(high-throughput)，高灵敏度(sensitivity)和准确率(accuracy)的DNA突变/SNP检测。目前已被全世界数百家知名机构使用(国外著名专家对Mutation Surveyor的评价和意见)，在不到一年的时间内，分别在 Sciences 和 Nature 已经出现了五篇文章报告应用MutationSurveyor（或MutationExplorer）研究 DNA 碱基突变的成果。Mutation Surveyor在突变检测领域运用了两项世界首创的技术：a)反相关曲线技术：该技术的运用使软件摆脱了传统突变检测软件对DNA碱基序列读取步骤(base calls)的依赖，Mutation Surveyor直接点对点地对比待测序列(sample sequences)和参考序列(reference sequences)的DNA测序曲线(traces)，产生反相关曲线，在比较待测DN

真皮内干细胞的研究皮肤可能也含有大量多潜能细胞。皮肤包含表皮层、真皮层及附属器等多种结构，表面积巨大，细胞资源丰富。而且，皮肤位置表浅、易于取材。近来研究表明，真皮内同样存在具有多向分化潜能的细胞。新生鼠真皮细胞经诱导后，不但能向多种中胚层细胞分化，甚至在特定条件下还能向内胚层细胞如胰岛细胞分化。从成年啮齿动物毛囊的真皮乳头(dermal papilla，DP)结构中可获得间充质来源的DP细胞。实验证实，DP细胞具有多向分化能力，不但能自发分化形成肌小管、脂肪细胞、心肌细胞及神经样细胞，而且能在诱导条件下，向成骨细胞及脂肪细胞分化。DP的单细胞克隆也同样具有成骨及成脂肪双向分化能力。不仅啮齿类动物的真皮细胞内存在多分化潜能细胞，人真皮组织内亦发现多种具有不同分化潜能的细胞。通过胰酶的消化，可以从人真皮内获得一种非贴壁生长细胞--皮肤来源的前体细胞(skin derived precursors，SKP)。SKP能在神经干细胞相关的培养液内大量扩增、长期传代培养(可体外培养1年以上)；SKP在体外生长时，表现为悬浮的细胞微球，表达神经嵴细胞的标记物中间丝蛋白，但较少表达波形蛋白。SKP能

（一）使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液管均应校正、洗净后使用。（二）取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。（三）供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。（四）测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。（五）供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。（六）选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。

2011卫生部临检中心 质评计划书 2011年临床检验室间质量评价计划(下载)目录 1. 前言 2. 参加办法 3. 2011年全国临床检验室间质量评价收费通知 2011年全国临床检验室间质量评价收费通知（原件）(下载)4. 2011年全国临床检验室间质量评价活动要求 2011年全国临床检验室间质量评价活动要求（原件）(下载)5. 2011年全国临床检验室间质量评价网络化使用要求 2011年全国临床检验室间质量评价网络化使用要求（原件）(下载)2011年全国临床检验室间质量评价申请表在线填报（已开始） 2011年全国临床检验室间质量评价申请须知(下载)2011年全国临床检验室间质量评价申请须知（原件）(下载)2011年全国临床检验室间质量评价申请表(一)表(二)(下载)6． 2011年医疗机构临床实验室室间质量评价计划 6．1 常规化学(Routine Chemistry) 6．2 干化学(Dry Chemistry) 6．3 脂类分析(Lipids and lipoproteins) 6．4 心肌标志物(Cardiac Markers) 6．5 血清治疗

基本原理：在一定时间内连续给动物注射D-半乳糖，使机体细胞内半乳糖浓度增高，在醛糖还原酶催化下，还原为半乳糖醇，这种物质不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内，影响正常渗透压，导致细胞肿胀，功能障碍、代谢紊乱，破坏并消耗机体抗氧化防御系统，使自由基积聚。同时在半乳糖还原成半乳糖醇的过程中又产生（O2-），这样使细胞膜脂质受损，过氧化脂质、脂褐质等增高，出现衰老。操作步骤：取健康雌性小鼠，普通饲料常规喂养。模型组小鼠每天颈背部皮下注射D-半乳糖（0.25ml/10g），连续6～8周后，小鼠行动迟缓，毛色灰暗，形体瘦弱，呈现明显的衰老体征，即造成亚急性衰老模型。空白对照组同样每天皮下注射生理盐水（0.25ml/10g）。末次给药和D-半乳糖2h后，进行学习记忆训练实验（避暗实验），次日测定记忆成绩，然后眼眶取血后处死。取小鼠胸腺、脾、脑、肝和心脏组织，测定各项衰老指标。避暗实验（step through test）：反射箱分单独5个箱，每个箱大小为36cm×12cm×12cm ，分明暗两室。明室由透明有机玻璃构成，暗室底部安铜栅，通以36V电流，明暗两室之间有一直径为3cm洞口，反射箱通过连线

家兔呼吸运动调节 【目的】 观察血液中化学因素（PCO 2 、PO 2 和[H + ]）改变对家兔呼吸运动（呼吸频率、节律、幅度）的影响，初步探讨其作用部位，并分析机制。观察迷走神经在家兔呼吸运动调节中的作用，初步探讨其机理。掌握气管插管术和神经血管分离术。 【原理】 呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。在不同生理状态下，呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节，其中较为重要的有呼吸中枢、肺牵张反射以及外周化学感受器的反射性调节。因此，体内外各种刺激，可以直接作用于中枢部位或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。 【预习要求】 1．

　　烟草的烟雾中至少含有三种危险的化学物质：焦油，尼古丁和一氧化碳，焦油是由好几种物质混合成的物质，在肺中会浓缩成一种粘性物质。尼古丁是一种会使人成瘾的药物，由肺部吸收，主要是对神经系统发生作用。一氧化碳能减低红血球将氧输送到全身去能力。 　　一个每天吸15到20支香烟的人，其易患肺癌，口腔癌或喉癌致死的机率，要比不吸烟的人大14倍；其易患食道癌致死的机纺比不吸烟的人大4倍；死于膀胱癌的机率要大两倍；死于心脏病的机率也要大两倍。吸香烟是导致慢性支气管炎和肺气肿的主要原因，而慢性肺部疾病本身，也增加了得肺炎及心脏病的危险，并且吸烟也增加了高血压的危险 　　吸烟损害你的健康 　　据美国一位皮肤病专家杰弗里．史密斯，对该国58726名烟民的调查发现，吸烟不仅损害心脏和肺以及消耗体内维生素C，而且对皮肤也有危害。 1、皱纹 　　同阳光的曝晒一样，烟能导致弹性硬蛋白和弹性纤维变粗或断裂。另外，吸烟还会减少皮肤的氧气供应，影响皮肤的主要组成部分胶原的形成并导致皮肤干燥。这一切都加剧了皱纹的出现。对女烟民来说，还会影响雌性激素的循环。 2、皮

担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝，在进行细胞分裂时，于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构。只出现在双核菌丝上。其形成过程是：首先，在细胞的两核之间生出一个喙状突起，双核中的一个移入喙状突起，另一个仍留在细胞下部。两异质核同时分裂，成为 4个子核。分裂完成后，原位于喙基部的一子核与原位于细胞中的一子核移至细胞上部配对；另外两子核，一个进入喙突中，一个留在细胞下部。此时细胞中部和喙基部均生出横隔，将原细胞分成三部分。上部是双核细胞，下部和喙突部暂为两单核细胞。此后，喙突尖端继续下延与细胞下部接触并融通。同时喙突中的核进入下部细胞内，使细胞下部也成为双核。经如上变化后， 4个子核分成 2对，一个双核细胞分裂为两个。此过程结束后，在两细胞分融处残留一个喙状结构，即锁状联合。这一过程保证了双核菌丝在进行细胞分裂时，每节（每个细胞）都能含有两个异质（遗传型不同）的核，为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准，凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。

您还把时间浪费在样品管的挑取、扫描、称重、开/关盖吗？您想从这些毫无意义的繁杂工作中解放双手吗？BioMicroLab帮您解决这些问题！ XL100样品管处理平台 按需挑取 - 扫描解码 - 自动称重 - 开/关盖 - 重新排序 - 液体加样 XL100样品挑取及处理平台能自动化处理各类样品管（Tube和Vial），提升样品管理质量。通过条码扫描、称重、开/关盖及其他在平台上的操作，XL100能轻松且灵活地处理Vial管。同时，操作软件还能追踪诸多关键数据，如rackID、样品管条码、样品重量等。除此以外，XL100也极易进行个性化配置，从而满足您实验室的独特需求。 条码解码模块 所有的条码数据都与样品管的位置信息与Rack ID相关联，提供从头至尾的全程追踪（无论标记的是一维码还是二维码）。样品管上的二维条码是通过摄像技术而获取，贴在样品管侧面的一维条码则通过旋转扫描获得，Rack ID则在deck装载时扫描获得、从而进入系统。目前条码扫描的速度约为每小时360个样品管。 自动称重模块 XL100平台的自动称重模块

一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道，经空气稀释排出。大量的有毒气体必须通过与氧充分燃烧或吸收处理后才能排放。废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点，通过密闭容器存放，不可混合贮存，容器标签必须标明废物种类、贮存时间，定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放，有机溶剂废液应根据性质进行回收。1. 含汞废液的处理排放标准3：废液中汞的最高容许排放浓度为0.05mg/L（以Hg计）。处理方法：①硫化物共沉淀法：先将含汞盐的废液的pH值调至8-10，然后加入过量的Na2S，使其生成HgS沉淀。再加入FeSO2（共沉淀剂），与过量的S2-生成FeS沉淀，将悬浮在水中难以沉淀的HgS微粒吸附共沉淀.然后静置、分离，再经离心、过滤，滤液的含汞量可降至0.05mg/L以下。②还原法：用铜屑、铁屑、锌粒、硼氢化钠等作还原剂，可以直接回收金属汞。2. 含镉废液的处理①氢氧化物沉淀法：在含镉的废液中投加石灰，调节pH值至10.5以上，充分搅拌后放置，使镉离子变为难溶的Cd（OH）2沉淀.分离沉淀，用双硫腙分光光度法检测滤液中的Cd离子后（降至0.1mg/L以下），将滤液中和

自动生化分析仪以高新技术为基础，以高准确性、精密度、灵活性和高效率为特点，在现代临床实验室中承担大部分的常规工作，成为实验室必备的检验仪器。临床实验室检验操作经历了手工操作、半自动分析和自动分析过程。随着科学技术的飞速发展，特别是计算机技术的发展，使临床实验室正从实现分析手段自动化，加速走向实验室自动化系统。实验室自动化系统（laboratoryautomationsystems，LAS）旨在通过协调自动分析仪、自动样本转运和计算机系统的工作，对实验室检验实现系统化管理。长期以来，临床化学分析自动化进程一直走在临床实验室自动化的最前列，在一定程度上代表了临床实验室自动化的发展进程。一、自动生化分析仪应用现状1.已经成为临床实验室、特别是大、中型实验室的必备仪器；现阶段参加卫生部临床检验中心和北京市临床检验中心组织的室间质评活动中的实验室已全部使用自动生化分析仪。2.使用前验证的重要性应引起相关人员的注意：用户在应用仪器进行常规工作前对设备性能的验证与评价。3.在实验室中建立标准操作规程或作业指导书（SOP）：通过对实验室进行检查（如北京市卫生局和北京市临床检验中心组织的检查），及部分实

一、层析技术的原理 层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时。 由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量比）不同，且随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。 二、层析法分类 而按层析原理还可将层析分为： 1. 凝胶层析：又称分子筛过滤或排阻层析等。医|学教育网搜集整理固定相是多孔凝胶，各组分的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。 本法的优点是所用凝胶属于惰性载体，吸附力弱，操作条件温和，不需要有机溶剂，对高分子物质有很好的分离效果。常用的凝胶有Sephadex G系列。凝胶层析可用于脱盐、分离提纯、测定高分子物质的分子量、高分子溶液的浓缩等。 2. 离子交换层析：采用具有离子交换性能的物质作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆交换的性质来分离离子型化合物的方法。主要用于分离氨基酸、多肽及蛋

(一) 唾液 1、直接抽取法 在急性实验中，可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。 2、制造腮腺瘘法 在慢性实验中，收集狗的唾液，要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外，将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合，腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。 (二)胃液 1、直接收集胃液法 急性实验时，先将动物麻醉，将插胃管经口插入胃内，在灌胃管的出口连一注射器，用此注射器可收集到胃液，此法适用于狗等大型动物。如是大鼠，需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理盐水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，进行分析。 2、制备胃瘘法 在慢性实验中，收集胃液多用胃瘘法，如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘

免疫球蛋白的装配、转运和分泌 转录后的IgH和L链mRNA分别在细胞质内糙面内质网的大核糖体(270～300S)和小核糖体(190―200S)上进行蛋白质多肽链的合成，合成后便从糙面内质网贮池中释放出来，并在内质网中进行Ig四条多肽链的装配。通常，Ig的装配有两种方式：①H+H＝H2，l+L＝L2，H2十L2＝H2L2；②H+L＝HL，HL+HL＝H2L2。但同一型别Ig只有两者之一种的组装方式。对μ链和L链的装配而言，主要以HL+HL的方式进行组装。当一个浆细胞同时合成两种H链蛋白时，只有相同H链才可组装到同一Ig分子中，如同时合成弘链和6链，只有μμ或δδ与两条L链组装成为IgM和IgD。多聚体Ig的组装是在内质网中由J链通过二硫键连接而成，如将5个单体IgM和2个单体IgA偶联，形成五聚体IgM和二聚体IgA。 组装完毕的H2L2 1g多肽链从糙面内质网转运到光面内质网，随同膜结构的运输转运至高尔基体。Ig在转运过程中不断进行糖基化修饰。糖基化修饰是Ig功能成熟所必须，也可使Ig更易于与细胞膜结合和向细胞外释放。在高尔基体内，成熟的Ig蛋白进入胞质的膜囊小泡(VQS以e)中，并逐

目前应用最广的是小白鼠和大白鼠，尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用最广，因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱导出来。Balb/c系小白鼠必须用纯系的，雌雄均可，以8~12周龄为宜。 大白鼠也可，能产生较多量的单克隆抗体。现在已经在小鼠杂交瘤的基础上，发展了小鼠－大鼠，小鼠－人以及人－人杂交瘤技术。 一般而言，抗原的纯度不很重要，特别是免疫原性较强的抗原。 免疫程序、剂量和方法是关系到是否能得到所需要的单克隆抗体的关键之一。 正常小鼠脾脏含有能产生各种不同抗体的B淋巴细胞，一只纯种小白鼠估计能产生1.0×107~5.0×107种不同的抗体。因此一只正常的小白鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤融合，只能有千万分之一的机会获得某一种特定抗体。所以为了提高得到某种杂交瘤的机会，必须加强免疫，使产生特异性抗体的B淋巴细胞大量增加。 B淋巴细胞的不同发育阶段对获得阳性杂交瘤也有很大影响。有人认为处在转化时期的B淋巴细胞可能更易于融合，而免疫以后7~8天，虽然是抗体产生的高峰时期，但形成有活力的杂交瘤细胞的可能反而减少。故一般认为加强免疫后的第三天应杀鼠取脾做细胞融合。 1．可

当扩增产物是多条带时，用点杂交更合适。通过将PCR 产物固定于尼龙膜和硝酸纤微素膜上，再用标记的探针进行点杂交。点杂交可检测突变DNA的突变类型，而应用于人类遗传病诊断和某些基因的分型。 方法有二：一是将PCR产物固定至膜上，液相中的探针与其杂交；二是将多种探针固定于同一膜上不同区域，再与液相中的PCR产物杂交，根据阳性位置即可判断产物的类型。 1．PCR产物的固定 [试剂与配置] TE缓冲液 变性液：0.4mol/L NaOH，25mmol/L EDTA [操作方法] (1)按点样器的大小裁减尼龙膜，并作好标记(在一角剪去一块)，去离子水中浸泡1min； (2)5～20μl(50～100ng)PCR产物中加入100μl变性液混匀，室温作用5min； (3)小心将预湿的膜置于点样器上，注意接触面不能有气泡，预抽5min； (4)每孔中加入样品后，抽吸5min，再加100μlTE洗涤每孔，抽干水分； (5)取下膜，置于滤纸上渍干； (6)渍干的膜于80

【实验原理】 1. 哺乳动物心脏的起搏－传导系统具有自动节律性，但各部分的自律性有等级差别。 2. 正常情况下，窦房结的自律性最高。正常的心脏搏动，每次都由窦房结首先兴奋，然后传导至心房、心室，引起心肌收缩，所以窦房结被称为正常起搏点。 3. 两栖动物心脏的结构特点是两个心房和一个心室，在其背面还有一个静脉窦。其心脏活动顺序为：静脉窦→右心房→心室，起搏点是静脉窦。 【实验对象】 蛙或蟾蜍。 【实验器材与药品】 蛙类手术器械一套，温觉计，任氏液，冰水，40℃热水，丝线。 【实验方法和步骤】 一、 在体蛙心的制备 1. 取蛙一只，用蛙针破坏脑和脊髓后，将其仰卧固定在蛙板上。剪开胸骨表面皮肤，再用剪刀沿中线剪开胸骨（剪的过程中剪刀尖须紧贴胸骨以免损伤内脏和血管），即可见到在灰色心包中跳动的心脏，用眼科镊轻轻夹起心包，用小剪仔细剪开心包，暴露出心脏。 2. 参照识别静脉窦、两心房和心室。 一、实验观察 1. 观察温度刺激蛙心各部位的结果心脏各部分辨认清楚后，先观察它们的跳动顺序并

相关专题 从低等生物草履虫以至高等哺乳动物的各种细胞，都具有类似的细胞膜 结构。在电镜下可分为三层，即在膜的靠内外两侧各有一条厚约2.5nm的电子致密带,中间夹有一条厚2.5nm的透明带,总厚度约7.0~7.5nm左右这种结构不仅见于各种细胞的细胞膜，亦见于各种细胞器的膜性结构，如线粒体膜、内质网膜、溶酶体膜等，因而它被认为是一种细胞中普遍存在的基本结构形式。 各种膜性结构主要由脂质、蛋白质和糖类等物质组成;尽管不同来源的膜中各种物质的比例和组成有所不同，但一般是以蛋白质和脂质为主，糖类只占极少量。如以重量计算，膜中蛋白质约为脂质的1~4倍不等，但蛋白质的分子 量比脂质大得多，故膜中脂质的分子数反较蛋白质分子数多得多，至少也超过蛋白质分子数100倍以上。 各种物质分子在膜中的排列形式和存在，是决定膜的基本生物学特性的关键因素。分子生物学的研究成果表明，各种物质特别是生物大分子在各种生物结构中的特殊有序排列，是各种生命现象得以实现的基础。尽管目前还没有一种能够直接观察膜的分子结构的较方便的技术和方法，但根据对生物膜以及一些人工模拟膜特性

酶切反应建议 一、 建立一个标准的酶切反应 目前大多数研究者遵循一条规则，即 10 个单位的内切酶可以切割 1 μg 不同来源和纯度的 DNA 。通常，一个 50 μl 的反应体系中， 1 μl 的酶在 1X NEBuffer 终浓度及相应温度条件下反应 1 小时即可降解 1 μg 已纯化好的 DNA 。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过 16 小时）也可完全反应。 二、 选择正确的酶 不言而喻，选择的酶在底物 DNA 上必须至少有一个相应的识别位点。识别碱基数目少的酶比碱基数目多的酶更频繁地切割底物。假设一个 GC 含量 50% 的 DNA 链，一个识别 4 个碱基的酶将平均在每 44 （ 256 ）个碱基中切割一次；而一个识别 6 个碱基的酶将平均在每 46 （ 4096 ）碱基切割一次。内切酶的产物可以是粘端的（ 3' 或 5' 突出端），也可以是平端的片段。粘端产物可以与相容的其它内切酶产物连接，而所有的平端产物都可以互相连接。相关信息参见目录的 Compatible Cohesive E