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环境与人类健康

环境(environment)是指以人为主体的外部世界,是地球表面的物质和现象与人类发生相互作用的各种自然及社会要素构成的统一体,是人类生存发展的物质基础,也是与人类健康密切相关的重要条件。人类生命始终处于一定的自然环境、社会环境及人为环境中,经常在物质和精神心理的双重因素影响之下。人类为了生存发展,提高生活质量、维护和促进健康,需要充分开发利用环境中的各种资源,但是也会由于自然因素和人类社会行为的作用,使环境受到破坏,使人体健康受到影响.当这种破坏和影响在一定限度内时,环境和人体所具有的调节功能有能力使失衡的状态恢复原有的面貌;如果超过环境和机体所能承受的限度,可能造成生态失衡及机体生理功能破坏,甚而导致人类健康近期和远期的危害。因此人类应该通过提高自己的环境意识,认清环境与健康的关系,规范自己的社会行为(防止环境污染,保持生态平衡,促进环境生态向良性循环发展),建立保护环境的法规和标准,避免环境退化和失衡,这是正确处理人类与环境关系的重要准则。 目录 • 环境的要素 • 环境的卫生学特征 • 环境

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RNA操作中的一般要求

在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果,所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中,一方面要严格控制外源性RNA酶的污染;另一方面要最大限度地抑制内源性的RNA酶。RNA酶可耐受多种处理而不被灭活,如煮沸、高压灭菌等。 外源性的RNA酶存在于操作人员的手汗、唾液等,也可存在于灰尘中。在其它分子生物学实验中使用的RNA酶也会造成污染。这些外源性的RNA酶可污染器械、玻璃制品、塑料制品、电泳槽、研究人员的手及各种试剂。而各种组织和细胞中则含有大量内源性的RNA酶。 一、 防止RNA酶污染的措施 1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。 2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗(注意:有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀,故不能使用)。 3. 有机玻璃的电泳槽等,可先用去

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内生肌酐清除率正常参考值

内生肌酐清除率介绍:肌酐为肌肉中磷酸肌酸的代谢产物,人体肌肉以1mg/min速度将肌酐排入血中。严重控制饮食后,血浆内生肌酐浓度比较稳定。肌酐主要从肾小球滤过,仅少量由近端小管排泌,不被肾小管重吸收,故肾单位时间内,把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清除出去,称为内生肌酐清除率(Ccr)。内生肌酐清除率试验,可反映肾小球滤过功能和粗略估计有效肾单位的数量,故为测定肾损害的定量试验。医学教育网|搜索整理 标本采集与计算:为排除来自动物骨骼肌和大量蛋白质食物中外源性肌酐的干扰,试验前和试验日摄低蛋白饮食共三天,禁食肉类,避免剧烈运动。试验前24小时禁服利尿剂,留取24小时尿,其间保持适当的水分入量,禁服咖啡、茶等利尿性物质,将24小时尿液收入加有甲苯防腐剂的洁净容器内。试验日抽取静脉血2~3ml,将血、尿同时送检。准确计量全部尿量V(ml),测尿肌酐(U)和血肌酐(P),将以上V,U和P三个参数代入公式计算。 Ccr=U×V/P(ml/min) V:每分钟尿量(ml/min)=全部尿量(ml)÷(24×60)min U:尿肌酐,umol/L P:血肌酐,umol/L 由于每个人

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碱性蛋白酶活力测定

【实验目的】 1. 掌握测定碱性蛋白酶活力的原理和酶活力的计算方法。 2. 学习测定酶促反应速度的方法和基本操作。 【实验原理】 酶活力是指酶催化某些化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下它所催化的某一化学反应的速度来表示。测定酶活力实际就是测定被酶所催化的化学反应的速度。 酶促反应的速度可以用单位时间内反应底物的减少量或产物的增加量来表示,为了灵敏起见,通常是测定单位时间内产物的生成量。由于酶促反应速度可随时间的推移而逐渐降低其增加值,所以,为了正确测得酶活力,就必须测定酶促反应的初速度。 碱性蛋白酶在碱性条件下,可以催化酪蛋白水解生成酪氨酸。酪氨酸为含有酚羟基的氨基酸,可与福林试剂 (磷钨酸与磷钼酸的混合物)发生福林酚反应。(福林酚反应:福林试剂 在碱性条件下极其不稳定,容易定量地被酚类化合物还原,生成钨蓝和钼蓝的混合物,而呈现出不同深浅的蓝色。)利用比色法即可测定酪氨酸的生成量,用碱性蛋白酶在单位时间内水解酪蛋白产生的酪氨酸的量来表示酶活力。

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  SIMCO表面电阻测试仪ST-4

SIMCO表面电阻测试仪ST-4 产品性能: 比较少见手持式种类,按住开关15秒左右显示产品表面抵抗值。 ST-4具有携带方便、操作简单的特点,测试时放置于被测物体表面,可测试物体表面抵抗值外,还可以测试导电垫的接地泄漏抵抗值。 产品图片: 放置于被测物体表面可测试产品表面抵抗值。 由于携带方便,适合现场拿取操作。 内置电池定时器,不用担心忘记更换电池,另外采用环保式充电电池。 测定范围:103-1013Ω、可测试各种各样的产品抵抗值,最适用于导电垫、导电地板、导电袋等防静电产的检查、保养、管理等。 也可支持IEC国际电工委员会测试标准模式(可选)IEC规格的电极(接触面积?重量)达到测量标准。 产品规格: 测定范围 103~1013(Ω) 测定模式 ①标准测定模式 (Ohm per square, Surface Resistivity) ②静电垫和接地

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常见化学实验仪器的名称及功能

实验仪器是进行化学实验的重要工具。“工欲善其事,必先利其器”,实验工具的齐备与否,直接影响到实验的成功与失败。根据不同的实验目的,应选择相应的实验方法,用不同的实验仪器才能进行实验。而实验仪器的构造和性能又决定了它特有的操作方法和不同的适用范围。所以必须对化学仪器的有关知识及功能有一个完整的了解,才能掌握它、正确地使用它,迸而在熟练基础上达到得心应手;完成好各种实验。这里向大家介绍常见化学仪器的分类及各种仪器的名称、性能、规格和使用注意事项。一、常见仪器的分类 一般根据仪器的主要用途的不同,可将常见化学实验仪器分为下列8类: (一)计量类 用于量度质量、体积、温度、密度等的仪器。这类仪器中多为玻璃量器。主要有滴定管、移液管、量筒、量杯等。 (二)反应类 用于发生化学反应的仪器,也包括一部分可加热的仪器。这类仪器中多为玻璃或瓷质烧器。主要有试管、烧瓶、蒸发皿、坩埚等。 (三)容器类 用于盛装或贮存固体、液体、气体等各种化学试剂的试剂瓶等。 (四)分离类 用于进行过滤、分液、萃取、蒸发、灼烧、结晶、分馏等分离提纯操作的仪器。主要有漏斗、分液

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节肢动物概述

佚名 节肢动物是属于动物界节肢动物门的一类无脊椎动物,占动物总数的85%以上。医学节肢动物(Medical arthropod)是指与医学有关即危害人畜健康的节肢动物。医学节肢动物学(Medical arthropodology)是研究节肢动物的形态、分类、生活史、生态、地理分布、与传病的关系及防制措施的科学。由于昆虫纲在节肢动物中占绝大多数,所以通常称为医学昆虫学(Medical entomology)。 一、节肢动物的主要特征 1.虫体左右对称:躯体和附肢(如足、触角、触须等)即是分节,又是对称结构。 2.体表骨骼化,由几丁质及无机盐硬化而成,内附肌肉,故称外骨骼。 3.循环系统开放式,体腔称为血腔,含有无色,或不同颜色的血淋巴。 4.发育过程中大都有蜕皮(ecdysis)和变态(metamorphosis)现象。 二、与医学有关的节肢动物 危害人体健康的节肢动物分属以下5个纲。 1.蛛形纲(Arachni

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微生物基础

微生物的家族 最早将生物界分为两界系统,包括动物界和植物界。以后相继分为三界系统,即动物界、植物界和原生生物界。四界系统,即动物界、植物界和原生生物界(或真菌界)和原核生物界。五界系统,即动物界、植物界、真菌界、原生生物界和原核生物界。 植物与其它生物的区别主要是:植物含有叶绿素,可进行光合作用,具有细胞壁,而且是营固着生活。植物界通常划分为七个大类群,即藻类、菌类、地衣、苔藓、蕨类、裸子植物和被子植物。它们的体形大小、形态结构、寿命长短、生活方式和生活场所各不相同,共同组成了形形色色的植物界。但是,随着科学技术的发展,人们对植物和其它生物的认识也在不断的加深,对植物的确定特征和它所包含的类群也不断地有了新的看法。 微生物是生物中一群重要的分解代谢类群,没有微生物的活动地球上的生命是不可能存在的,它是地球上最早出现的生命形式,其生物多样性在维持生物圈和为人类提供广泛的、大量的未开发资源方面起着重要作用。微生物种类有非细胞型的病毒,原核细胞型的细菌、衣原体、立克次体、支原体、螺旋体和放线菌,真核细胞型的真菌等。 通常,微生物种类可以分为三大类型: 非细胞型:病毒

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利用趋势线法计算起始拷贝数法

在进行荧光定量PCR实验中,Ct数值非常重要,因为通过对标准物质进行定量PCR实验绘制出标准曲线,进而利用标准曲线法求出未知样本中的起始拷贝数。目前定量PCR仪器采用的是最大二阶导数法和样点拟合法计算Ct数值,其原因为实际工作曲线并没有相应的函数所能准确对应,因而采取以上两种方法。这里我举例说明一下使用样点拟合法计算Ct数值并进一步求算出起始拷贝数的过程。y = 4.416x - 80.128 当y=1.64 时 x=18.52y = 2.368x - 47.296 当y=1.64 时 x=20.67 y = 0.768x – 16 当y=1.64 时 x=22.97y = 0.768x - 17.536 当y=1.64 时 x=24.97 起始拷贝数对数 7.3 6.3 5.3 4.3样点拟合法计算出的Ct 18.52 20.67 22.97 24.97利用样点拟合法求算出的工作曲线方程: y = -2.165x + 34.34 R = 0.9996为了验证其准确性,可以进行模拟计算,利用前3点绘制工作曲线,然后代入阳4的Ct数值

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紫外分析仪介绍

紫外仪(型号:WD-9403A)用途及适用范围 该仪器是提供白光和紫外光照射的装置。主要用于蛋白质电泳观察、照相。带箱内照明及相机升降装置。结构及特点WD-9403A型荧光紫外仪带有暗箱,无需暗室,可在明室中全天候使用。该仪器下部为白光透射灯箱,白光照度大。箱体上部配备有两种波长的紫外光源,波长分别为254nm、365nm,您可根据自己的需要,单独使用其中某个波长,亦可同时使用几种波长。本产品选用电子镇流器,使仪器重量轻,灯管启辉快,无频闪。抽屉式可见光灯箱。 规 格1. 紫外光源照射窗口有效尺寸应不小于:反射190mm×41mm。白光光源透射窗口有效尺寸:238mm×198mm;2. 紫外光源波长:反射:254nm、365nm;3. 透紫灯的功率:波长为365nm的紫外灯,功率为28W;波长为254nm的紫外灯,功率为28W;4. 紫外玻璃透光率:对波长为230nm~400nm的紫外光透过率不小于40%;5. 各波长的紫外光源的窗口辐照度应不小于10μW/cm2;6. 电源条件:电源电压:单相正弦交流220V±22V;频率:50Hz±1Hz;7. 外型尺寸(L×W×H)

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ALISEI Quality System自动酶免疫分析仪仪器操作规程

(一)仪器开/关机程序1、开机程序  1.1 将压缩机电源电缆连接到仪器后面板标有“压缩机”的插口。  1.2 将仪器的电源电缆与仪器上标有MAIN的插口和电网电源相连,确保电网电压足够。  1.3 将仪器主机开关放在Ⅰ的位置上,按下仪器的Start按钮启动仪器。  1.4 启动计算机。  1.5 双击显示屏上的ALISEI图标,等待仪器自检过程。  1.6 一旦开机,系统首先进行自检,自检结束后,屏幕会自动显示到工作列表菜单。2、关机程序  2.1 所有试验结束后,回到主菜单,按退出,仪器将提示是否退出系统。  2.2 选择确认,仪器自动清洗,清洗结束自动关闭仪器主机。  2.2 关闭计算机。  2.3 将仪器主机开关放在O的位置上,关闭仪器主机电源。  2.4 如果仪器长时间放置,应切断电源并拔下电源线。(二)、分析参数设置程序1、工作列表编辑  1.1 创建工作列表。在主菜单上点击工作列表即可进入(在开机时自动进入该菜单),点击新工作列表进入工作列表编缉。  1.1.1 病人资料。从工作列表界面下点病人资料进入病人相关数据输入界面,输入或查看不同的标本可

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蛋白质工程

蛋白质工程是在基因重组技术、生物化学、分子生物学、分子遗传学等学科的基础之上,融合了蛋白质晶体学、蛋白质动力学、蛋白质化学和计算机辅助设计等多学科而发展起来的新兴研究领域。其内容主要有两个方面:根据需要合成具有特定氨基酸序列和空间结构的蛋白质;确定蛋白质化学组成、空间结构与生物功能之间的关系。在此基础之上,实现从氨基酸序列预测蛋白质的空间结构和生物功能,设计合成具有特定生物功能的全新的蛋白质,这也是蛋白质工程最根本的目标之一。目前,蛋白质工程尚未有统一的定义。一般认为蛋白质工程就是通过基因重组技术改变或设计合成具有特定生物功能的蛋白质。实际上蛋白质工程包括蛋白质的分离纯化,蛋白质结构和功能的分析、设计和预测,通过基因重组或其它手段改造或创造蛋白质。从广义上来说,蛋白质工程是通过物理、化学、生物和基因重组等技术改造蛋白质或设计合成具有特定功能的新蛋白质。研究的核心内容蛋白质结构分析蛋白质工程的核心内容之一就是收集大量的蛋白质分子结构的信息,以便建立结构与功能之间关系的数据库,为蛋白质结构与功能之间关系的理论研究奠定基础。三维空间结构的测定是验证蛋白质设计的假设即证明是新结构改变了原有生物

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凝胶蛋白检测技术

凝胶蛋白检测技术 理想的检测方法必须具有以下特点:①良好的线性范围,即染色强度与蛋白质量成正比;②良好的通用性,即对不同蛋白质具有相同的染色能力;③良好的兼容性,检测后不影响后续的鉴定过程,即不影响蛋白质或多肽在质谱仪中的离子化过程;④高灵敏度,检测出尽量多的低拷贝蛋白;⑤高稳定性和重复性。但目前仍无完全符合上述条件的检测方法。考马斯亮蓝染色、银染等各种传统显色技术对于蛋白质组学高灵敏度、高重复性、宽线性和高度自动化的要求逐渐显出局限性,目前不断有新的检测技术开发出来,如荧光标记、同位素标记等,但目前最常用的还是考马斯亮蓝染色和银染。 混合蛋白质经二维凝胶电泳分离后采用灵敏、合适的检测方法是呈现分离效果的关键步骤。考马斯亮蓝染色的检测灵敏度约为0.1ug;银染则可检测到long的蛋白质;荧光染色的灵敏度是银染的两倍。经过考马斯亮蓝、荧光染色过的凝胶可以进行质谱分析,经普通银氨染色的凝胶则无法做质谱分析,快速银染法虽然检测灵敏度低于普通银氨染色法,且染色背景较深,但经过快速银染法染色的凝胶可以进行质谱分析。 (1)考马斯亮蓝染色的主要步骤:①将凝胶移人一个盛有适量

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lncRNA 通过调控 CD56 参与自然杀伤细胞发育过程

自然杀伤(NK)细胞是一类先天性免疫淋巴细胞,与体外病毒感染和免疫调节有关。但是,lncRNA在NK细胞生物学过程中的作用还不是很清楚。研究人员借助于高通量lncRNA芯片检测技术,分析了NK细胞中lncRNA表达模式,发现了调控NK细胞分化和生物学功能相关的lncRNAs。其中,lnc-CD56,作为正调控因子,与CD56的表达呈正相关模式,参与了初级NK细胞的分化过程。该研究证实lncRNA在NK细胞生物学过程中也扮演着非常重要的作用。研究思路研究结果1. NK细胞和T细胞lncRNA表达模式鉴定为鉴定NK细胞中特异性表达的lncRNA,研究人员对外周血NK细胞(pNK),脐带血NK细胞(cNK),子宫脱模NK细胞(dNK)和T细胞进行了全转录组芯片检测。通过比较不同NK细胞和T细胞,研究人员鉴定到了NK细胞特有的lncRNA1632个。qRT-PCR进一步验证其中的4个lncRNA都是在NK细胞中特异性表达。2. NK细胞特异性lncRNA分类通过对不同来源NK细胞中的lncRNA进行比较,研究人员发现pNK和cNK细胞有2642个共有的lncRNA,dNK和pNK细胞共享118

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单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)简介

摘要 对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的研究分析近几年被广泛应用于生物及医学研究的诸多领域,筛查SNPs的方法很多,各具特色,并一直不断地发展.本文对筛查SNP的几种常用及最新方法做一简要介绍,其中包括PCR-RFLP,分子信标等.细胞外基质的降解和改变是肿瘤转移的基本条件,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类依赖锌离子的蛋白水解酶,可以降解细胞外基质、基底膜、以及间质基质,在肿瘤转移中具有重要作用.有些MMP基因序列存在单基因多态性即SNP现象,且最终影响MMP蛋白的功能.对MMPs的单基因多态性研究为进一步从分子水平研究MMPs的结构和功能及MMPs与肿瘤转移的关系提供了一个新的方向. 关键词:肿瘤转移; SNPs; MMPs 0 引言 单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)是第三代遗传诊断标记,近几年被广泛应用于生物以及医学研究的诸多领域,筛查SNP的方法自从1996年SNP被正式定为第三代遗传标记以来

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基因组非特异性甲基化水平的研究

1. 3H―SAM掺入后液闪检测法(1)将约2 μg 基因组与足量3H标记的SAM,甲基化酶(SssⅠ或HpaⅡ)共同温育,SAM的甲基化基团将被掺人到目的DNA中未甲基化的胞嘧啶上。(2)以WhatmanDE81滤纸过滤此温育混合物,并以液闪缓冲液淋洗去掉未结合的3H标记的SAM,以液闪检测该滤纸上结合的’H标记的SAM量。(3)如此值较高,则提示原来的甲基化水平低,反之亦然。2. 5mC免疫沉淀法(MeCIP)这种方法是基于能够与5mC发生特异性反应得到单克隆抗体,通过抗体与5mC结合,将甲基化的DNA片段沉淀下来。再通过测量沉淀DNA估计甲基化程度。3. M.SssI甲基转移酶M.SssI可以将同位素标记的甲基从S―腺苷甲硫氨酸(SAM)转移到非甲基化的CpG序列上形成5mC,通过测量转移后同位素能量估计总体甲基化水平。4. 氯乙醛法DNA经重亚硫酸盐处理,使未甲基化的胞嘧啶全部转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。然后经过银或色谱柱去除DNA链上的嘌呤,再将样品与氯乙醛共同孵育。这样5mC就转变为带有强荧光的乙烯胞嘧啶,通过观察荧光来计算5mC含量,可以直接测定基因组整体5m

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培养细胞形态及形态分析

培养细胞形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时,皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名,细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长,细胞中央有卵园形核,胞质向外伸出2-3厘米个长短不同的突起,除真正的成纤维细胞外,凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态生长。2、上皮型细胞此类型细胞在培养器皿支持物上生长具有扁平不规则多角形特征,细胞中央有园形核,细胞紧密相连单层膜样生长。起源于内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等组织细胞培养时,皆呈上皮型形态生长。3、游走型细胞本型细胞在支持物上散在生长,一般不连成片。细胞质经常伸出伪足或突起,呈活跃的游走或变形运动,速度快且不规则。此型细胞不很稳定,有时亦难和其它型细胞区别。在一定的条件下,由于细胞密度增大联成片后,可呈类似多角型或成纤维细腻包形态。常见于羊水细胞培养

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荧光偏振免疫分析(以环孢霉素检测为例)

基本原理 荧光偏振免疫分析(FPIA)是一种利用物质分子在溶液中旋转速度与分子量大小呈反比的特点,定量检测抗原或抗体的一种分析方法。Ag或荧光标记的Ag(AgF )旋转比Ag-Ab或AgF -Ab复合物快,当接受一个偏振光面的投入时,如AgF 分子的长轴与投入的偏振光面平行,荧光物吸收的偏振光最多,分子呈激发态,当回到基态时发射一个偏振光。如果反应液中的分子发生旋转,发射的偏振光就会减弱,减弱的程度与分子旋转的速度呈正比,与分子大小成反比。 FPIA常利用竞争结合反应的原理,检测体液中的抗原或半抗原药物。在免疫反应检测系统中,标本中Ag浓度愈低,产生的AgF -Ab复合物愈多,偏振光愈强,反之亦然。根据荧光偏振光强度与Ag浓度呈反比,以Ag浓度为横坐标,以荧光偏振光强度为纵坐标,绘制竞争结合抑制标准曲线。通过测定反应系统的偏振光强度,从标准曲线上就可确定地得知样品中待测Ag的相应含量。 FPIT与其他免疫荧光分析方法相比,具有以下优点:①简便的均相测定方法,易于快速、自动化测定;②血清样品可直接用于测定,样品用量少;③精密度高,结果准确。 试剂及材料 1. 环孢霉素检测试

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【原创】6种核酸提取方法附引用文献:动植物RNA(总、m),DNA,质粒

1、植物总RNA的提取以白菜花药组织为试材, 利用改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。提取花药RNA的产量高、质量好、纯度高, 适用于mRNA差异显示及基因表达的Northern印迹等的RNA提取。分别采取蕾期和盛花期的花蕾和花朵, 迅速将花药剥离, 分装称重后液氮中速冻, - 80℃保存。1 RNase的灭活 所有用于RNA提取的玻璃器皿均在180℃条件下烘2h以上, 塑料管和枪头用 0. 1%焦碳酸二乙酯(DEPC)溶液在 37℃条件下处理24h后高压灭菌。2 在改良Gomez法的基础上, 加以改良, 具体操作如下:1> 0.1g 样品加入10%样品重多聚聚乙烯吡咯烷酮(PVPP), 液氮研磨,2> 转入离心管后加入 0.5mL 65℃预热的提取缓冲( 150mmol/L Tris , 50mmol/L EDTA , 4%SDS , 硼酸调至pH7. 5) 和 10μL 巯基乙醇, 振荡混匀后加入 20μL蛋白酶K , 37℃提取 1.5h 。3> 加 50μL 5μL mol /L KAc, 150 μL乙醇, 涡旋。4> 0. 7mL 氯仿/异戊醇(2

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保留时间漂移的故障排除

保留时间不重现有两种不同的情况:即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化,如固定相流失(例如通过水解),色谱柱污染(由样品或流动相所致)等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下:一、色谱柱平衡如果我们观察到保留时间漂移,首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10~20个柱体积的流动相,但如果在流动相中加入少量添加剂(如离子对试剂)则需要相当长的时间来平衡色谱柱。流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上,从而造成保留时间的漂移。应注意:水是很容易污染的流动相成分。二、固定相稳定性固定相的稳定性都是有限的,即使在推荐的PH范围内使用,固定相也会慢慢水解。例如,硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定;长链键合相比短链键合相稳定;烷基

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