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氯化铯密度梯度离心纯化轮状病毒

文喻玲,赵庆欢,于 洋,陈元鼎 [摘要] 纯化是研究病毒理化特性、 生物 学和免疫学特性的重要步骤和要求。在纯化病毒的方法中,氯化铯(CsCl)密度梯度离心法是较为常用的方法之一,方法简便易行,获得的病毒样品较纯。本文报道一种轮状病毒(RV)的CsCl密度梯度离心纯化方法,在离心前用聚乙二醇(PEG 6000)浓缩得到的病毒增殖液中加入56%CsCl,使其成为均匀混合液,经水平转头密度梯度离心后,可以将病毒分成3条乳白色区带。在密度梯度离心前,病毒样品是否用三氟三氯乙烷抽提,结果也有差别。经SDS-PAGE、Western、病毒的感染性滴度测定结果表明,所纯化的病毒具有较高的纯度和很好的回收率。 [关键词] 氯化铯;密度梯度离心纯化;轮状病毒;三氟三氯乙烷 Purification of rotavirus by CsCl gradient centrifugation WEN Yu-ling,ZHAO Qing-huan,YU Yang,et al.Institute of Me

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有关芯片数据写作方面的基本思路

随着生物芯片技术在广大科研工作人员研究工作中的应用,在写作论文的时候,如何比较科学、直观地体现生物芯片实验的结果,是一些初步尝试利用芯片数据来写作论文的科研工作人员希望了解的环节。现就笔者在生物芯片技术领域积累的一些经验,做一个初步的总结。但由于生物技术发展很快,有很多内容可能遗漏,还请读者能及时指出不足之处。1.挑选差异表达的基因利用生物芯片进行研究的第一步,往往是要找到差异表达的基因。选择差异表达的基因,笔者建议采用生物芯片为科研工具的研究人员使用SAM 软件(Significant Analysis of Microarray),它是由Standford 大学开发的一个免费软件,目前广泛地被学术界所采用,进行挑选差异基因。SAM 软件可以作为插件在Office Excel 软件中进行应用,很容易被生物医学工作者掌握。SAM 软件进行分析的一个基本前提就是需要至少3 次实验以上的重复。这里的重复可以是生物材料的重复,例如某种疾病包含多个病人;也可以是实验的重复,例如药物处理细胞做了4 次实验。通过重复实验,才能从统计学意义上判断差异变化的基因。可以理解SAM 软件和统计学t-tes

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病毒RNA提取实验方法(protocol)

一、用异硫氰酸胍提取 提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管。2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀。3.13000rpm离心15min。4.在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul -20度预冷的异丙醇。5.取第3步离心的上清(一定不要吸取到中间白色层,第3步离心结束往外拿的时候,管子尽量不要倾斜)转移到第4步准备的管中,颠倒混匀。6.13000rpm离心15min,轻轻倒去上清;在吸水纸上尽量沾干液体。7.加600ul 75%乙醇,颠倒数次以洗涤残存异丙醇。7.13000rpm离心15min,轻轻倒去上清;在吸水纸上尽量沾干液体。8.4000rpm离心10sec,将管壁残存液体甩到底部,用微量枪头吸干,室温干燥2-3min(不可过分干燥,防止下一步RNA 不溶解)。9.加入20ul DEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水),轻轻混匀溶解RNA 。2000rpm离心5sec,冰上保存备用(最好2小时

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胶粘剂迁移对层析检测的影响

选择适当的胶粘层有助于厂商改善基于膜的诊断产品的加工处理并延长该产品的效期。用于层析诊断检测的材料有两个共同特性:多孔渗水并有相关脆性。为弥补该类材料的物理强度的不足,该类材料通常会依靠胶粘剂的作用装配到特定支架上(见图1)。以前,产品开发者用过几乎所有种类的胶粘剂来装配这些物质,包括热固性胶粘剂。现在,随着胶粘剂技术的发展,一系列适用于层析检测应用领域的胶粘剂已被制造出来。通过选择一种能将应用于层析检测条的多孔物质有效结合起来的胶粘剂,产品开发者可确保该产品在整个效期内都能得到正确的结果。图1 Diagram of a typical lateral-flow assay showing the location of adhesive layer used to bond porous membrane materials to a supporting substrate.在大多数层析应用领域里,多数产品开发者指定使用压敏胶(PSAS)(全称压力敏感型胶粘剂),该胶粘剂在产品的设计、加工或使用过程中不会出现相应的复杂化现象。通过使用一种适当的胶粘模式,证明使用压敏胶(PSAS)是

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中度重复序列

  中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。少数在基因组中成串排列在一个区域,大多数与单拷贝基因间隔排列。依据重复顺序的长度,中度重复顺序可分为两种类型。   (1)短分散片段 (short interspersed repeated segments, SINES)这类重复顺序的平均长度约为300bp(〈500bp),它们与平均长度约为1000bp的单拷贝顺序间隔排列。拷贝数可达10万左右。如Alu家族,Hinf家族等属于这种类型的中度重复序列。   (2)长分散片段 (Long interspersed repeated segments, LINES)这类重复顺序的长度大于1000bp,平均长度为3500-5000bp,它们与平均长度为13000bp(个别长几万bp)的单拷贝顺序间隔排列。也有的实验显示人基因组中所有LINES之间的平均距离为2.2kb,拷贝数一般在1万左右,如KpnⅠ家族等。中度重复顺序在基因组中所占比例在不同种属之间差异很大,一般约占10-40%,在人

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PCR技术系列一:PCR技术概论

PCR技术概论聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。PCR技术简史PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。PCR的实现1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给DNA的体外合成提供以致一种合适的条件---摸板DNA ,寡核苷酸引物,D

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巢式PCR与序列分析方法在确定HBV传播途径中的应用

乙型肝炎病毒(HBV)的父婴传播已讨论多年,由于HBV至今不能分离培养,研究传播仍有一定困难。本研究以巢式多聚酶链反应(PCR)与序列分析的方法研究父儿所携HBV在分子病毒学方面的特点,试图从分子水平证明HBV父儿传播的可能,并探索在病原体未分离成功的情况下研究传播的可行方法。1. 材料与方法1.1 研究对象从1995年3月至1996年3月在湖南省某县以HBsAg为指标筛检前来终止妊娠的孕妇及其配偶。选择8名男性HBV携带者与其子宫内受染有胎儿为研究对象。携带者以ELISA检测常规五项HBV血清学标志与PCR检测HBV DNA确定。均无既往肝炎史,谷丙转氨酶正常,无乙肝疫苗注射史,年龄在25-35岁之间。8名配偶以上述方法检测均无HBV感染,年龄在23-33岁之间。夫妇双方血清、白细胞、精液在住院期间收集。取终止妊娠3月以上胎儿。胎儿血在产出当时采取并分离血清保存于-20℃,同时分离白细胞。无菌条件下取肝脏组织。胎儿血清、白细胞、肝脏任何一项HBV DNA阳性者判定为子宫内感染。另外选择5对无HBV标志的夫妇与胎儿为对照。1.2 检测方法1.2.1 ELISA检测HBV五项血清学标志:

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SCI论文目标杂志选择的技巧

众所周知,中文科研论文的写作都不是一件容易的事情,更何况英文SCI论文写作,对初次写SCI论文的作者更是难上加难。文章好不容易写好了,许多作者就抱着急切的心情想尽快给自己的文章找个“婆家”。这种心情可以理解,但有多少作者在投稿之前针对如何选择目标杂志真正做足了功课呢?笔者身边的朋友和美捷登客户的回答多数是“No”。究其原因,首先是重视不够,更重要的是不知如何选。但选择目标杂志这个环节处置不当却往往导致文章屡投不中,功败垂成,以至于信心倍受打击。屡投不中所浪费的时间会使论文的新颖性持续降低,使成功发表变得更加困难,甚至遥不可及。 所谓“磨刀不误砍柴工”。笔者在此根据自己的经验就自己身边一位朋友的例子来给大家浅谈选择目标杂志的“技巧”。 在南方某大学任教的小张,需要他的文章在10个月内被杂志接受,以便能有资格晋升。杂志影响因子越高越好,这样竞争力更强。因此,他的文章最初投到了OxfordJournals旗下的Clinical InfectiousDiseases,其影响因子为9.374,是传染病领域的高档次杂志,仅次于Lancet InfectiousDiseases。在他投到该杂

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细胞质

细胞质(cytoplasm)又称胞浆是由细胞质基质、内膜系统、细胞骨架和包涵物组成。(一) 细胞质基质细胞质基质又称胞质溶胶(cytosol)是细胞质中均质而半透明的胶体部分,充填于其它有形结构之间。细胞质基质的化学组成可按其分子量大小分为三类,即小分子、中等分子和大分子。 小分子包括水、无机离子;属于中等分子的有脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等;大分子则包括多糖、蛋白质、脂蛋白和RNA等。细胞质基质的主要功能是:为各种细胞器维持其正常结构提供所需要的离子环境,为各类细胞器完成其功能活动供给所需的一切底物,同时也是进行某些生化活动的场所。(二)内膜系统内膜系统(endomembrane system)是通过细胞膜的内陷而演变成的复杂系统。它构成各种细胞器(organelle),如内质网、线粒体、高尔基复合体、溶酶体等。这些细胞器均是互相分隔的封闭性区室,各具备一套独特的酶系,执行着专一的生理功能。1、内质网 (endoplasmic reticulum,ER)是扁平囊状或管泡状膜性结构,它们以分支互相吻合成为网络,其表面有附着核糖核蛋白s体者称为 粗面内质网 (rough end

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哺乳动物细胞的RNAi技术策略

目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关 i技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要来自于《遗传》杂志2005年“ 干涉(i)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略”,希望能给从事或者准备从事 i相关实验的研究人员以帮助。一、靶si 序列选择靶si A序列选择是 i实验成败的关键。哺乳动物细胞 i实验中,使用最广泛且最有效的是21bp si 。si 由正义链和反义链组成,两条链3’端均有2个碱基突出,一般为UU或dTdT,其中正义链的前19nt与靶基因序列相同。1. si 设计的原则Si 双链设计时,一般在靶m 起始密码下游100―200bp至翻译终止密码上游d0―100bp的范围内搜寻AA序列,并记录每个AA3’端相邻19个核苷酸作为候选si. 靶位点。其中AA(N19)TT是最理想的序列,若靶m 中无此序列,亦可选用NA(N21)或NAR(N17)YNN(R表示嘌呤,Y表示嘧啶)

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单克隆抗体技术:细胞融合

(一)融合剂细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇(PEG),在分子 量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与许多化学药品不起作用。用作细胞融合剂的聚乙二醇一般选用分子量为4000者,常用浓度为50%,pH8. 0~pH8. 2(用10%NaHCO3调整),分子量小的PEG,融合效应差,又有毒性,分子量过大,则粘性太大,不易操作。50%浓度,pH偏碱时融合效应最高。也有采用30%~50%浓度的PEG加上10%二甲亚砜。不同批号的PEG,即使分子量相同,但融合率却有明显差异,选用时必须注意。每批都必须进行细胞毒性试验后方可应用。要买高纯度的,一般选供气相色谱 用的PEG。(二)融合过程融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。1. 试剂与材料(1) 供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2) 1640培养液100 ml。(3)

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体视显微镜荧光适配器-让您的体视显微镜具备荧光观测功能

下图为microscope today杂志封面图片,即是通过改造体视显微镜后拍摄的荧光照片,可见效果很好。该期12-17对NIGHTSEA的这一体视显微镜荧光观测升级装置有详细的介绍,如果感兴趣可自行下载。一个NIGHTSEA(体视显微镜荧光适配器系统)包中含有使你现有体视显微镜升级为荧光显微镜的所有装置。适配器有五种激发光/发射光组合(外加白光),最新又添加了真正的紫外光。经改造,你的体视显微镜就可用于观测果蝇、斑马鱼、蝾螈、蟾蜍、拟南芥、线虫和任何自然界的荧光了。一 简单、方便:不需拆解或改动你的显微镜在一分钟内组装完成模块式激发/发射光——根据需要选购,可在任何时候选择扩可在任何体视显微镜上应用,无论其年代多久远组件为颜色编码式,可防止混淆在不同显微镜间可从容挪用简洁紧凑、轻巧,便于携带外出观测荧光不干扰白光的使用二 应用领域:观测和分选荧光转基因动物—果蝇,线虫,斑马鱼等荧光辅助解剖、注射和显微注射荧光教学珊瑚礁研究自然界荧光探测电路板维修三 系统组件:1. 激发(Excitation)高强度LED光电传感器——四种波长,外加白光屈伸灵活的鹅颈式灯底座2. 发射(Emissio

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骨骼肌兴奋与收缩实验

先制备坐骨神经-腓肠肌标本,而后利用计算机采集系统输出电信号,并将标本与张力传感器相连。利用电信号对标本进行刺激,并通过张力传感器将肌肉的收缩信号输入计算机。 当给予肌肉标本一个高于阈刺激的单刺激时,可以在计算机中观察到由潜伏期、收缩期和舒张期组成的单收缩曲线。当给予两个等强度的阈上刺激,且刺激的间隔大于单收缩的时程,在计算机中可以观察到两个独立的收缩曲线;当给予两个等强度的阈上刺激,且刺激的间隔小于单收缩的时程而大于不应期,在计算机中可以观察到两个收缩曲线的叠加,称为收缩的总和;当给予若干个等强度的阈上刺激,在计算机中就可以观察到强直收缩曲线。 【关键词】 坐骨神经-腓肠肌标本 刺激 收缩 【Abstract】 First , make a sciatic- sural specimen. Then use computer to output electrical signals while attach the specimen to the tensility conductor. Use electrical signal to s

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肝脏血液检测――ALT & AST

肝脏血液检测是最常见的血液检测,可用于评估肝脏功能或肝损伤。肝损伤检测的第一步是进行简单的血液检测,以确定血液中特定肝酶(蛋白质)的水平。目前临床上最敏感、应用最广泛的肝酶是转氨酶,包括门冬氨酸转氨酶(AST或 SGOT)和丙氨酸转氨酶 (ALT 或 SGPT)。这些酶主要存在于肝细胞内,一小部分存在于肌肉细胞内。如果肝脏受损或损坏,肝细胞中的转氨酶便进入血液,血液中ALT和AST水平升高,提示肝脏疾病信号。 其他有关的肝脏血液检测以肝脏中其他的酶类为指标。除了 AST 和 ALT,肝脏中还存在碱性磷酸酶、 5'核苷酸酶和γ-谷氨酰基转肽酶 (GGT)。本文主要介绍最常见的肝酶——AST 和 ALT。 转氨酶的分布 转氨酶能够催化化学反应,将氨基从一个氨基酸供体分子转移至受体分子,因此,称为"转氨酶"。门冬氨酸转氨酶 (AST)又称血清谷草转氨酶 (SGOT)。丙氨酸转氨酶 (ALT)又称为血清谷丙转氨酶 (SGPT)。 本文来自 AST(SGOT)通常分布于肝脏、心脏、肌肉、肾脏和大脑等组织。当上述组织受损时,AST便释放进入血液。例如,心脏病发作或肌肉损伤时,血清A

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倒置生物显微镜使用操作规程

1、倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色,是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要,这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。2、开机2.1 接连电源。2.2 打开镜体下端的电控开关。3、使用3.1 准备3.1.1 将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器,选择较小的物镜。3.1.2 观察,并调节铰链式双目目镜,舒适为宜。3.2 调节光源3.2.1 推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。3.2.2 通过调节聚光镜下面的光栅来调节光源的大小。3.3 调节像距转三孔转换器,选择合适倍数的物镜;更换并选择合适的目镜;同时调节升降, 以消除或减小图像周围的光晕,提高了图像的衬度。3.4 观察通过目镜进行观察结果;调整载物台,选择观察视野。4、关机4.1 取下观察对象,推拉光源亮度调节器至最暗。4.2 关闭镜体下端的开关,并断开电源。4.3 旋转三孔转换器,使物镜镜片置于载物台下侧,防止灰尘的沉降。5、日常维护及注意事项5.1 所有镜头表面必须保持清洁,落在镜头表面的灰尘,可用吸耳球吹

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为什么说SNP的变异没有STR大

SNP是单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism )。一般来说它是双等位基因的,就是说一个位点,人群中大部分人是A碱基,那么还有一部分人是T碱基,一般不会是C或者G了,这是一般的规律,没有什么好解释的。举个例子,一个人是正常人他的某一条染色体一段序列是:AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA,反向肯定是一串t了,是吧?另一条染色体也是这个样子的,因为有父母两条染色体的。当然这是大部分人的情况。另外一小部分人,1%左右吧,这是统计数字,呵呵,一条是AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA,反向也是一串t,另一条染色体就会出现这种情况AAAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA,在第五个碱基有一个SNP 那么这条染色体的反向我就不说了,这种人是一种杂合子,还有一部分人是纯合子,现在应该知道了吧?就是两条染色体都是在第五个碱基是G,那么这个SNP是双等位基因的,就是除了A就是G了。而STR是 short tandem repeat,短串联重复,一般是CA重复,重复次数很多的。在一个人的染色体上可以有多种重复。假

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去大脑僵直

[目的要求] 1、学习去大脑方法。 2、观察去大脑僵直现象 [基本原理] 从中脑四叠体的前、后脑之间切断脑干的动物,称去大脑动物。由于神经系统内,中脑以上水平的高级中枢对肌紧张的易化作用相对加强,因此出现了伸肌紧张亢进的现象。动物表现为四肢僵直,头向后仰,尾向上翘的角弓反张状态,称为去大脑僵直。 [动物与器材] 兔、常用手术器械、骨钻、咬骨钳、止血钳、剪毛剪、兔体手术台、棉球、棉线、柳叶刀生理盐水、20%氨基甲酸乙酯。 [方法与步骤] 1、将动物改为腹位固定,分离双侧颈总动脉并结扎之。 2、按实验6—1方法继续开颅,暴露大脑半球后缘。 3、 松开动物四肢,左手托起动物下颌,右手用柳叶刀轻轻拨起大脑半球后缘,看清 四叠体的部位 ,于前、 后球之间垂直插入柳叶刀 ,切断神经联系(如果部位正确,动物突然挣扎, 此时切勿松手,应继续使柳叶刀切至颅底 )。

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实验动物学的重要性

相关专题 世界高科技发展日新月异,在现代科学带动下崛起的实验动物科学,不仅是本世纪发展生命科学的重要的支撑条件,而且是一门综合性的独立的新兴学科。在国际上它已经成为现代生命科学研究的奠基学科。人类基因组 计划,基因结构与功能组学的研究等重要研究都离不开高质量实验动物的广泛应用。当前国际上已经把实验动物科学条件作为衡量一个国家科学技术现代化水平的标志。 实验动物被广泛地应用于:医学、药学、制药、生物制品、农药、食品、添加剂、化工产品、化妆品、航天、放射、军工、交通、环保等方面;在进出口商品检验检疫 中实验动物是不可缺少的材料。 (一) 实验动物是生命科学研究的支撑条件之一。 在生命科学领域里,进行实验研究有四个支撑条件,即AEIR要素。 A:Animal:实验动物; E:Equipment:仪器 设备; I:Information:情报信息; R:Reagent:化学试剂; 随着科学技术的发展,现在获得高、精、尖的仪器设备、必要的情报信息和高纯度的化学试剂已不是困难的事了,但要人们普遍了解

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组织培养培养基配制、灭菌及保存

培养基的配制1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。4、用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入3中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀,并用pH试纸测其pH值,直到将培养基的pH值调到5.8。5、将配好的培养基,用漏斗分装到三角瓶(或试管)中,并用棉塞塞紧瓶口,瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。培养基的成分比较复杂,为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉,可以准备一份配制培养基的成分单,将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时,按表列内容顺序,按项按量称取,就不会出现差错。培养基的灭菌及保存灭菌: 培养基配制完毕后,应立即灭菌。培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内,在汽相120℃条件下,灭菌20分钟。如果没有高压蒸汽灭菌锅,也可采用间歇灭菌法进行灭菌,即将培养基煮沸10分钟,24小时后再煮沸20分钟,如此连续灭菌

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肝中DNA的分离和鉴定

[原理] 细胞内的核酸多以核蛋白的形式存在,其中脱氧核糖核蛋白主要存在于细胞核中,核糖核蛋白主要存在于细胞质中。这两类核蛋白在0.14mol/L氯化钠溶液中的溶解度相差很大,核糖核蛋白在此溶液中具有很高的溶解度,脱氧核糖核蛋白的溶解度却相当低。制成肝匀浆后,用0.14mol/L氯化钠溶液抽提,可将两种核蛋白分离。分离过程中加入少量柠檬酸钠,可抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的水解作用。 SDS(十二烷基硫酸钠)能使脱氧核糖核蛋白产生解聚作用,在含有脱氧核糖核蛋白的溶液中加入SDS,DNA即与蛋白质分离开,用氯仿将蛋白质沉淀除去,而DNA溶解于水相,最后用冷乙醇将DNA析出,而获得纯化的DNA。在氯仿中加入少量异戊醇能减少操作过程泡沫的产生,并有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白,下层有机溶剂相维持稳定。 DNA和RNA在波长260nm处有很高的吸收峰值,蛋白质则在280nm处有很高的吸收峰值。利用这个原理,我们测定纯化样品在260nm和280nm处的吸光度,可以推算出样品中DNA的浓度,并判断其纯度。用标准样品测得在波长260nm处,1ug/ml 双链DNA钠盐吸光度为0.

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