1【产品名称】 串联飞行质谱仪（蛋白质组分析系统）2【产品型号】 ABI-028_TY84123【产品规格】 47004【产品产地】 美国应用生物系统公司（ABI)5【产品详细描述】4700TOF/TOF蛋白质组分析系统是全球第一台TOF/TOF 串联飞行质谱仪，它作为目前的最新质谱技术，它一问世即被世界各大蛋白组研究中心和著名蛋白质实验室所争相采用。它由两级TOF和高能碰撞池组成，其工作原理是离子在MALDI源中产生并被加速和聚焦；对于MS/MS 模式可通过第一级TOF选择母离子进入高能碰撞池中碰碎，然后进入第二级TOF重新被加速并被分析。主要特点： _全球首套串联TOF/TOF蛋白组分析系统，是ABIVoyager Maldi-TOF发展的新的里程碑_独有分析所有蛋白质鉴定功能：分子量，PMF，翻译后修饰，序列测定，De-novo鉴定_独有高分辨功能，实现高分辩蛋白组分析_独有高灵敏度，轻松鉴定低丰度蛋白_独有超宽质量范围可大于 400,000m/undefined 独有高通量分析，比传统速度快10～100倍，实现工业化蛋白质组分析_独有高质量准确度_独有高能CID提供大量结构信

琼脂凝胶结构均匀，含水量大，吸附量小，因此电泳速度快，电泳结果区带整齐，分辨率高，易染色，制成薄膜标本保存方便。所以琼脂凝胶电泳最常用。 （一）试剂及材料 1．pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液 2．优质琼脂 3．玻板、打孔器等 （二）操作方法 1．以巴比妥缓冲液配成1%～1.5%琼脂，溶化后制成2mm～3mm的琼脂板。 2．打孔 在玻片的1/3处打孔，孔径3mm～6mm。也可用剃须刀片挖一小槽。 3．加样 将血清样品直接加入孔内，如非血清样品则尽可能用pH7.4PBS透析后加样；也可以不打孔，用滤纸片蘸取样品直接插入以小刀划开的琼脂裂缝中。 4．电泳 将样品端放入负极，用滤纸（纱布、棉布均可）2～3层搭桥（与玻片同宽度），电压3V/cm～6V/cm，电流强度1.5mA/cm～3mA/cm。 5．断电 电泳2h～4h，断电。 6．固定、染色、观察结果。 （三）注意事项 1.为了观察泳动情况，以掌握断电时间，可在加样的同时，加一滴伊文斯兰染色液即可。 2.开始电泳时，电压要小一些，以逐渐升至所需要得强度。

无论是新成立的，还是已运作多年的实验室，种类多样的试剂在出入库、盘点、管理方面带来繁重的工作，因此试剂管理信息化成为实验室信息化的必经之路，但试剂管理软件在市场上寥寥可数，免费的就更是凤毛麟角。Mr.F就是免费软件中的后起之秀。刚拿到Mr.F的Beta发布版就忍不住一睹芳颜： 软件界面 Mr.F界面上能看到得到的按钮很少，只有常用的出入库、库存和设置，左则“我的产品”记录所属过的试剂或耗材。和一般的实验室软件不同，这款软件很多信息的录入是通过选择，而不是键盘输入，这样能使使用者减少录入时间和思考的时间。总的来说，Mr.F能用简洁两个字来形容，整体设计也相当不俗。 全产品分类 很少试剂管理软件会提供全产品分类，因为建立一个详尽而通用的分类并不容易，而Mr.F算是提供全产品分类的少数软件之一。按Beta 1.0版本所提供的分类看来，该类别按学科分类，算是十分详细，也比较有通用。 贴心的小细节 Mr.F虽然是一款新软件，但是贴心的细节不少，这些细节能帮助用户更好地使用软件。 存放地规划，使得存放更有规律。 Mr.F也象一些试剂管理软件一

1. 家兔心脏穿刺采血法 （1）一个人固定兔子用两腿夹住兔子的两条后腿，两手握住两前腿，使家兔前胸尽量向前突。 （2）用剪刀去左前胸的毛，以碘酒消毒，再用酒精棉球擦去碘酒。 （3）先用手指按摸心脏搏动最强部位（约在左侧胸骨的第三肋间）将针头刺入，如已刺入心脏则可见针头随心脏搏动而上下跳动，此时轻轻抽动注射器，可见血液涌出。 （4）一般家兔抽取30~50毫升仍可生存，如不需保存动物可抽取80~120毫升。 2. 家兔颈动脉放血法 （1）将家兔仰卧固定，使头部后仰，整个颈部伸直露出，用消毒液擦拭，除颈部外的其它部位用消毒湿纱布覆盖起来将颈下皮肤纵向切开，剥离皮下组织，分离肉与气管，在颈静脉下可见迷走神经平行强烈搏动的动脉血管。 （2）将血管周围的结缔组织分离后，用止血钳夹死上下两端，在两钳中间切断血管，再用镊子夹住心端，然后在钳子和镊子中间的血管壁上斜开小口，放入采血瓶中松动镊子，血液便可留入瓶中。 （3）放血速度可由镊子掌握，以免过快发生溶血。（此法可 用于豚鼠的全采血，也可用于牛马羊等大动物）3. 家兔耳静脉采血法 轻弹兔耳，再用75%酒精深

摘要： 可以在蛋白质水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子。 可以在 蛋白质 水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子.基因水平的鉴定有酶切鉴定、 PCR 鉴定、核酸杂交和基因序列分析等.蛋白质水平鉴定有插入失活双 抗生素 对照筛选(例如 Tet r 和 Amp r )和插入失活 LacZ' 基因的蓝白斑筛选等.表达载体可进行插入方向鉴定和表达产物的免疫学和生物学活性鉴定.一般重组质粒鉴定主要按照表型筛选、酶切鉴定和测序鉴定的顺序进 行. (一)插入片段长度鉴定 1、酶切鉴定 由表型鉴定从平皿中挑取单克隆,在液体培养基中扩增,制备质粒. 质粒 可能以线性、开环和闭环超螺旋等 3 种形式存在.尽管这 3 种形式的质粒分子量一样,但是它们的电泳速度不一样,电泳时可能会出现 2-3 条带.用设计的内切酶进行酶切后电泳,如果载体中有插入的目的基因,电泳出现两条带,一条是载体,另一条是目的基因；反之,电泳后就只

原位杂交组织化学对照实验 为证明原位杂交实验操作的准确性和实验结果的可靠性，必须设置一系列对照实验。对照实验的设置应根据核酸探针和靶核酸的种类以及现有的可能条件选定。一般应在下述几种对照实验中选择3～4种，以证实杂交结果的可信性。 (一)组织对照 1．Southern或Northern印迹反应 原位杂交能在组织细胞原位显示待测核酸(DNA或RNA)的存在。为了进一步证实原位杂交所显示的核酸是否存在于被检组织内，可从被检组织中提取DNA或总RNA，然后分别用Southern或Northern印迹法进行检测。一般情况下，Southern或Northern印迹反应结果与原位杂交结果一致，两者互相支持。但是，当阳性细胞在被检的组织中所占比例很小时，原位杂交结果可能为阳性，而印迹反应则由于靶核酸的含量太低而呈阴性结果。 2．免疫组织化学 如果能获得靶基因产物抗体，可结合免疫组织化学方法，从蛋白质(或多肽)水平在相邻切片或同一切片中证明蛋白质(或多肽)和相应的mRNA共存于同一细胞中。 (二)探针对照 1．已知阳性组织和已知阴性组织对照 用探针在已知

惊跳反射（Startle reflex），又称震惊反射或惊反射，是动物被突发性的强感觉刺激诱发的一种防御性反射，表现为面部及躯体肌肉的快速收缩，之后往往还伴随着当下行为的中止以及心率的增加。这样的反应模式能由听觉、视觉、触觉等多种感觉模式所诱发，表现出了很大的可塑性和行为的多样性，具有一种应对掠食者伤害的防御性功能，在人类也是应对意外刺激或遇到险情时的一种避险保护反应。惊跳反射还是衡量各种认知、注意、感觉和感觉运动整合加工过程的独特方式，因此受到研究者的关注。一、惊跳反射反应指标研究者发现了许多有效可靠的惊跳反射反应指标，比如面部表情肌活动、整个身体的屈曲和伸直反射、心率的增加以及皮肤导电性增加等，但最受关注的仍是眨眼反射。二、惊跳反射的诱发刺激类型在惊跳反射的研究中，诱发刺激可以为听觉刺激、视觉刺激、触觉刺激等。在惊跳反射中最常用的诱发刺激为听觉刺激，通常称为听觉惊跳反射（acoustic startle reflex,ASR）。听觉惊跳刺激可以是宽带白噪声、纯音或其它录制或合成的声音。研究表明，当其他参数保持恒定时，噪声比纯音更可能产生ASR，且振幅更高潜伏期更短。同时，操纵噪声的

[实验目的] 　　了解交感神经对兔耳小动脉管壁平滑肌以及对眼的扩瞳肌的作用。 [实验原理] 　　交感神经中枢经常处于紧张性活动中，其紧张性冲动可通过交感神经传到血管平滑肌和扩瞳肌，引起血管收缩和瞳孔扩大。如果切断交感神经，则其所支配的血管显著扩张，瞳孔缩小。 [实验对象] 　　家兔。 [实验药品] 　　1:10000肾上腺素，生理盐水。 [ 仪器与器械] 　　计算机 生物 信号分析处理系统(或二道生理记录仪)，保护电极，手术器械一套，兔手术台， [实验方法与步骤] 　　1 .实验准备： 　　将兔背位固定于手术台上，剪去颈部及耳部被毛。在非麻醉状态下，自颈部正中线纵行切开皮肤，钝性分离颈部肌肉，暴露气管。分离气管双侧交感神经，在其下方穿双线备用。如果不易判断，可用电刺激来观察兔耳血管的变化情况进行判定。 手术完毕后将兔松开，经15~20 min后进行下列实验观察。 　　2 .

1 降钙素原 降钙素原(PCT)是降钙素(Calcltonin，CT)的前体，主要在甲状腺滤泡旁细胞内合成，是由116个氨基酸组成的糖蛋白，分子量大约13KD。它可以在酶的作用下逐步裂解成57个氨基酸的氨基PCT，32个氨基酸的CT和21个氨基酸的降钙蛋白。降钙素原检测是一种评价细菌感染的最新替代指标，是用于细菌感染/脓毒症鉴别诊断、严重程度判断、治疗监测、预后评估及抗生素管理使用的具有创新意义的诊断指标。 2 降钙素原的临床意义 2.1、细菌感染/脓毒症的鉴别诊断 当有细菌、真菌重症感染时，如脓毒症、全身性炎症反应综合征（SIRS）时，血液中的PCT浓度在2-6小时内迅速升高，而自身免疫、过敏和病毒感染等其他非细菌性感染时，PCT水平轻度升高或是不升高。 2.2、细菌感染/脓毒症的严重程度判断 在感染疾病严重程度的发展过程中，PCT随着严重程度的不同（局部感染、脓毒症、严重脓毒症、脓毒性休克），呈现由低到高的浓度变化，对于感染程度及器官机能障碍的严重性进行准确的判断。 2.3、细菌感染/脓毒症的预后评估及治疗监测 无论是对脓毒症的诊断、

在实验动物的运输过程中，由于恐惧与疼痛、饥渴、疲劳、通风不良、过度拥挤、长时间的旅程而得不到“安宁”等因素会引发动物发生应激反应。发生轻度的应激反应，动物可表现为体重下降、脱水及对疾病的抵抗力降低，严重时可影响动物的质量，甚至导致动物在运输途中衰竭死亡。在运输的不同阶段，动物表现出的症状也不相同。初期动物在恐惧、疼痛、关禁、拥挤等应激因子的刺激下，表现不安、狂躁和敏感性增高，或畏缩、颤抖和咬包装盒（箱）等。经过一段时间逐渐适应后，动物安静下来、对环境表现出冷漠，对正常刺激不反应等。这时机体易受到疾病侵袭。如果再进一步的受到刺激可能引起体温升高、呼吸困难，出现消瘦和脱水状态，发生疾病甚至死亡。实验室检测可以证明动物在经历了应激之后，可引起一系列的病理生理学变化。病理剖解可见肾上腺出血、胃肠粘膜出血、糜烂或溃疡。血液中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度增加，淋巴细胞母细胞化抑制、自然杀伤细胞的细胞毒性功能降低等。在应激后期可导致肾上腺皮质功能衰竭。防止动物应激的重要措施就是缩短运输时间，利用现代航空运输等手段将动物运输到目的地。其次，运输动物的笼具要有足够大的空间，较低的密度。允许动物舒适地站立、

一、材料与方法 1. EDTA（无蛋白酶抑制剂）（Roche） 2. 酸冲洗过的425-600玻璃珠（Sigma） 3. 洋地黄皂苷（digitonin）（EMDChemicals） 4. 蛋白酶抑制剂（DMSO,亮肽素,胃蛋白酶抑制剂）（Sigma） 5. BECKMAN1.5 ml 离心管（BECKMAN） 6. 抗FlagM2亲和胶（Sigma） 7. 3XFLAG多肽（Sigma） 二、仪器设备 1. BECKMAN离心机、TLA-55转子 三、实验步骤 1. 细胞裂解 （1）酵母摇至25OD，集菌。4℃，用1 ml H2O或PBS缓冲液洗涤细胞。若需要，可在-80℃保存样品。 （2）用150 ul 预冷好的免疫沉淀缓冲液重悬细胞，缓冲液（无DTT）中加入0.1%digitonin和蛋白酶抑制剂以及磷酸酶抑制剂。加入玻璃珠没于液面下。在冷藏室，涡旋振荡10分钟。Digitonin是强刺激性非离子去污剂，可以完整提取膜蛋白。 （3）加入850 ul 免疫沉淀缓冲液（包含1.16%Digito

1 样品采集将一定的样品放入灭菌三角瓶中，加入对数生长期的敏感指示菌如大肠杆菌菌液3～5mL，再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。2 增殖培养 30℃振荡培养12～18h, 使噬菌体增殖。3 离心分离将上述培养液以3000rpm离心15～20min, 取上清液，用pH7.0，1%蛋白胨水稀释至10-2～10-3，用于噬菌体检查及效价测定。4 生物测定法4.1双层琼脂平板法4.1.1 倒下层琼脂 融化下层培养基，倒平板（约10mL/皿）待用。4.1.2倒上层琼脂融化上层培养基，待融化的上层培养基冷却至50℃左右时，每管中加入敏感指示菌 (大肠杆菌) 菌液0.2mL，待检样品液或上述噬菌体增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上层平板铺平。4.1.3恒温培养 30℃恒温培养6～12h观察结果。4.1.4 观察结果 如有噬菌体，则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑──噬菌斑。4.2 单层琼脂平板法省略下层培养基，将上层培养基的琼脂量增加至2%，融化后冷却至45℃左右，如同上法加入指示菌和检样，混合后迅速倒平板。30℃恒温培养6～16h后观察结果。4.3离心分离加热法（快速检查）取大

植物组织培养（Plant Tissue Culture）：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体explant），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。（主要有原生质体（Protoplast），悬浮细胞，组织（愈伤组织Callus、茎尖分生组织），器官（胚，花药，子房，根和茎）的培养。其中最常见的是愈伤组织培养。）愈伤组织（Callus）：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。植物细胞全能性（Cellular totipotency）：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。（Haberlandt, 1902）微（快）繁步骤（micropropagation）：母株（完整）→外植体（母株的一小部分，种子亦可）→接种到培养基上→长芽（继代增殖）→长根（试管外生根亦可）→练苗，驯化→完整植株组培发展简史-----细胞学说：Schleiden和Schwann。1、探索：20世纪初，Haberla

MTT实验是检测细胞活力的实验方法，由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此也常常用来检测细胞的增殖情况。 MTT的原理：活细胞有琥珀酸脱氢酶，将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多，笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。 一、培养好细胞点板 养细胞没啥好说的，如果不知道细胞如何养，那就看看相关的文献方法。如果知道了细胞的名字，就可以去ATCC检索细胞的培养信息，这个网站上的培养方法是标准培养方法。当然可以根据自己实验要求进行修改。由于细胞计数很繁琐，点板时的细胞浓度是最难掌握的，这一点笔者的心得如下： 自己先将细胞养一段时间，大概了解细胞的增殖情况，在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%，如果打算养48小时就检测，根据细胞的生长情况反推点板时的细胞浓度状况。这时可以将细胞不进行计数，将消化好的细胞混匀后（可能是10 ml）直接在一个废弃（最好进行过无菌处理）的96孔板中依次加入180、100、50微升细胞，将细胞放置几分钟就会沉到板底了。这时在显微镜下观察，推测哪个孔的细胞48 h能基本长满板底，假设50 微升的孔比较合适

由于各家公司生产的热循环仪提供的各种实验方案不太一致，所以优化的策略也不尽相同，然而在各种方案中，前文所述的那些影响实时PCR 反应的因素却总是相通的。只要能较好地控制实验条件，优化实验步骤，要想获得满意的实验结果并不一定都是困难的。下面本文将就影响到实验结果的一些基本参数和实验步骤谈一谈关于实时定量PCR的优化。1. 基本参数的优化：1.1 MgCl2的浓度　在PCR反应中，MgCl2的浓度对影响酶的活性是至关重要的，不仅如此，合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较低的Cp(crossing point)值，较高的荧光信号强度以及良好的曲线峰值。所以对其的深度选择应慎重。一般来说，对以DNA或cDNA为模板的PCR反应，应选择2－5 mM浓度的MgCl2，对以mRNA为模板的RT－PCR而言，则应选择的浓度为4－8 mM。1.2 模板的浓度：如果研究者是进行首次实验，那么应选择一系列稀释浓度的模板来进行实验，以选择出最为合适的模板浓度，如果条件困难，也至少要选择两个稀释度（高和中、低浓度）来进行实验。一般而言，使Cp位于15－30个循环比较合适，若大于30则应使用较高的模板浓度，如

1、简述该磁力搅拌器主要用于小体积的搅拌反应，且反应过程中无固体产生影响搅拌子转动的反应。2、使用前的准备2．1使用前，首先检查随整机的配件是否齐全，然后按顺序先装好夹具，检查搅拌器工作情况是否正常。2．2 根据反应的溶剂量大小，选取合适的容器和合适的搅拌子，容器置于镀铬盘正中，检查搅拌子工作情况。3、操作过程3．1 将搅拌子小心置于容器中，避免直接投入损坏容器。3．2把所需搅拌的容器放在镀铬盘正中，加入反应的溶液。3．3插上仪器上的插头，接通电源并打开电源调速开关，指示灯亮，即开始工作。3．4调速由低速逐步调至高速，不允许高速档直接启动，以免搅拌子不同步引起跳动。3．5 反应结束后，先把调速降至最小，然后关搅拌开关和电源开关，拔下插头。4、注意事项及说明4．1调速由低速逐步调至高速，不允许高速档直接启动，以免搅拌子不同步引起跳动。4．2不搅拌时不能加热，加热由开关控制。4．3不工作时应切断电源。4．4仪器应保持清洁干燥，严禁溶液进入机内，以免损坏机件。防止剧烈振动，以免内部接触点接触处脱落。4．5保持仪器的清洁与干燥避免与化学药品接触。4．6使用完毕将磁力旋转控制旋钮置于最小处，以免

抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig)。Ig分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig的轻链是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda ）两种型别。五类Ig的重链结构不同，这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ（gamma）链和μ（mu ）链。 重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗体而异，称为可变区，分别用VH和VL表示。两者构成抗体的抗原结合部位，只与相应的抗原决定簇匹 配，发生特异性结合，是抗体专一性结合抗原的结构基础。IgG可被木瓜蛋白酶分解为三个区段，其中两个相同的区段称抗原结合片段（Fab）。每个Fab都保存结合抗原的能力，但只有一 个抗原结合位点，是单价的，与抗原结合后不出现凝集或沉淀。另一区段称Fc段，无抗体活性，但具有IgG特有的抗原性。IgG可被胃蛋白酶分解为两个片段，一个Fab双体，称F（ab）2，能和两个相同的抗原结合；另一片段类似Fc，随后被分解 成小分子多肽，无生物活性。IgM是

一、概述颗粒性抗原（细菌、螺旋体、红细胞等）与相应的抗体血清混合后，在电解质参与下，经过一定时间，抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块，这种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素（Agglutinin），抗原称为凝集原（Agglutinogen）。细菌或其他凝集原都带有相同的电荷（阴电荷），在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后，由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团，因而发生特异性结合，成为抗原抗体复合物。由于抗原与抗体结合，降低了抗原分子间的静电排斥力，抗原表面的亲水基团减少，由亲水状态变为疏水状态，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒。出现了肉眼可见的凝集反应。一般细菌凝集均为菌体凝集（O凝集），抗原凝集呈颗粒状。有鞭毛的细菌如果在制备抗原时鞭毛未被破坏（鞭毛抗原在56℃时即被破坏），则反应出现鞭毛凝集（H凝集），鞭毛凝集时呈絮状凝块。二、玻片凝集反应 玻片凝集反应一般用于未知细菌的定性，所以又称为定性凝集反应。实践中常用于新分离

一、培养基配制的操作程序1.加琼脂和无离子水至定容量的70%左右，加热使琼脂溶解；2.琼脂溶解后，加入培养基母液、激素、糖等，稍加热使糖溶解；3.糖溶解，加无离子水至定容量；4.充分搅拌后，测pH值至要求值；5.培养基分装入瓶后灭菌。二、组培玻璃器皿的选择和清洗1.玻璃器皿的选择（1）试管—适合于初代培养、用少量培养基及试验各种不同配方时选用。（2）三角锥瓶—适用于各种培养（如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养）。（3）L形管和T形管—为专用的旋转式液体培养试管。（4）培养皿—适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。（5）角形培养瓶和圆形培养瓶—适用于液体培养用，如单细胞和原生质体的浅层培养。（6）果酱瓶—常用作组培苗大量繁殖用的培养瓶。（7）兰花瓶—适于蝴蝶兰、大花蕙花等兰花的组培苗大量繁殖用的培养瓶。2.玻璃器皿的清洗（1）清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液。（2）清洗时先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用热的肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。（3）洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠。三、组培

我们都知道基因剪刀 CRISPR/CAS9 技术今年大火，之所以这个技术这么火和其对基因操作的方便性，高效性，准确性及高性价比是分不开的。CRISPR/Cas9 是一种能够对任何物种基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶 Cas9 蛋白通过导向性 RNA (guide RNA， gRNA) 识别特定基因组位点并对双链 DNA 进行切割。一旦 DNA 链被切开后就能对特定基因引入敲除、敲入、突变等编辑。然而基于传统的 sgRNA 载体的 CRISPR-CAS9 技术，由于仅靶向一个位点，所以更适合单个编码基因的敲除，对于多个编码基因和非编码基因则需要同时导入多个 sgRNA 载体/病毒，使操作难度上升不小。为解决多个编码基因同时敲除和 lncRNA 敲除的需求，Multiplex sgRNA 技术应运而生Multiplex sgRNA system 可同时插入不同的 sgRNA，帮助解决同时敲除多基因或非编码基因编辑的需求。可以同时插入 2~5 个 sgRNA 符合不同的实验需求。针对多个编码基因其敲除策略可以为：对于通路研究的同学来说，有时需要同时抑制多个通路，而通路抑