相关专题 本月21日,首个“世界第一批经大规模平行测序技术的胚胎植入前胚胎遗传 学诊断/筛查试管婴儿”现身长沙。此次科研成果的主要贡献者为人类干细胞国家工程研究中心主任、中南大学生殖与干细胞工程研究所所长卢光琇。 &NBS p; 卢光琇 这成为人类辅助生殖技术领域新的里程碑——积极性优生领域获重大突破,试管婴儿成功率将进一步提高,而婴儿出生缺陷可得到有效降低。这也标志着我国运用全基因组测序技术,进行的“体外受精胚胎遗传学 诊断”,达世界先进水平。 胚胎植入前遗传学诊断(PGD),又称孕前诊断,是胚胎植入子宫前进行的遗传学诊断,可淘汰遗传学非正常胚胎;但该技术只能检测少数几条染色体是否异常。胚胎植入前遗传学筛查(PGS),则是一种基于全部染色体水平进行的遗传学全新孕前诊断技术。PGS可克服了PGD的局限性,筛除全部染色体异常,确保植入子宫的是染色体正常的胚胎。 2010年起,卢光琇团队与华大基因创始人、中科院院士杨焕明团队合作,将华大研发的大规模平行测序技术引进到“胚胎植入前胚胎遗传学诊断/筛查”中。此次成果集成了多项目前国
自从1976年,卡氏滴定法已经成为石油协会认可的石油产品中水分含量的标准测试方法,1982年成为日本工业标准。这种方法可用于库伦及容量滴定系统。由于石油产品中水分是微量定量分析,库伦法得到广泛应用。库仑法是把样品,如绝缘油、冷冻机油、变压器油,煤油或者柴油加入电解液中。对于容量法,样品溶解在油类专用的脱水溶剂中,用KF滴定剂直接滴定。硅油样品被加到酮类脱水溶剂中后可被直接滴定。石油产品中的一些添加剂,如抗氧化剂,会与KF试剂反应产生干扰。如果润滑油(如汽油机油和柴油机油)和其他产品含有这种物质,卡式滴定需要使用油类的水分汽化系统。 应用实例 1、容量法滴定 滴定剂:AQUAMICRON® Titrant SS-Z (or SS) 脱水溶剂:AQUAMICRON ® Anhydrated Solvent GEX, OLⅡ(or MS, CM) 25-50ml 检测对象:工业汽油,航空汽油,煤油,柴油,重油,变压器油,原料油,制冷机油,防锈油,压缩油,空气过滤器油,热处理 油,轧制油,液压传动油,旋转泵油、航空油,氟油,液体石蜡,沥青,切削液,研磨油,蜡,矿物油,烷基苯2
在临床放射治疗中,为了避免或减小在对病变组织治疗的过程中正常组织接受的照射剂量,对于治疗线束的选择有着严格的标准。 电子、γ射线和X射线均可用于临床放射治疗。由于电子随深度的变化衰减的速度非常快,因此只适用于表皮的治疗。γ射线的能量比较强,穿透性好,通常用于深 部肿瘤的治疗。X射线的穿透性由其能量决定,越大的能量穿透性越好,因此X射线可以根据不同的能量应用于不同深度的肿瘤治疗。 皮肤肿瘤和无皮肤免除的肿瘤通常利用表浅X射线(50-150kVp,称为表浅能量,90%剂量作用于表面以下5mm内)治疗,体内较深部位的肿瘤利用中 电压X射线(200-500kVp,称为中电压能量,超过90%的剂量可以送达表面以下2cm内的深度区域)治疗。 由于具有安全、易控制、易操作等优点,X射线辐照仪取代γ射线辐照仪在生物学的应用是一个必然的技术进步过程。但是,在前期,甚至包括某些厂家在内都没有 意识到X射线在生物学中的应用也要考虑到其能量的问题,即类似临床放射治疗,需要针对样本的种类和应用来选择合适的X射线能量:表浅X射线应用于细胞等无 需考虑深度影响的样本的照射,中电压X
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即 Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法(Western Blot)是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物 NC 膜或 PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。 蛋白质印迹法(Western Blot)即是一种将电泳与 KIJSA 结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定 3 个阶段。蛋白质印迹法(Western Blot)结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。 图示:蛋白质印迹法(Western Blot)实验流程图蛋白质印迹法(Western Blot)采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,「探针」是抗体,「显色」用标记的二抗。经过 PAGE
1. 实验原理 脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。 2. 标本采集: 2.1 标本种类:脑脊液,由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。 2.2 标本要求:将脑脊液分别收集于3个无菌试管中,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1-2毫升。 2.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。 3. 标本储存:立即送检。 4. 标本运输:室温运输。 5. 标本拒收标准:污染,久置标本。 6 试剂:5%苯酚溶液:取纯苯酚25ml,加蒸馏水至500ml,用力振摇,置37℃温箱内1-2天,待完全溶解后,置棕色瓶内保存。 7. 操作步骤:取潘氏试剂2-3ml于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴,衬以黑背景,立即观察结果。 8. 结果判断 阴性:清晰透明,不显雾状 极弱阳性(±):微呈白雾状,在黑色背景下才能看到 弱阳性(+):灰白色云雾状 阳性
方法一A液:1M,MnCl2:B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用无菌水配,配后不需灭菌;C液 称取CaCl2 0.10g,KCl 1.18g,全部转入细口试剂瓶,然后加入46ml三蒸水,轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎,然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。取1管B液(0.6ml),全部加入C液(46ml)中,混匀后,再用1ml移液器加入3.3ml A液,混匀冰浴即可使用。划线得到单菌落,37℃培养箱培养约17小时, 挑取2-4个形态饱满的单菌落接种于装有100ml SOB 培养基的三角瓶。37℃剧烈振荡(300 rpms)培养3-4小时,将培养温度调至18℃剧烈振荡(3280 rpms)培养,其余与普通感受态差不多,每管加入4ml TB缓冲液,轻轻振荡,使菌体重新悬浮,加入280ml DMSO(可用国产分析纯),混匀后分装入1.5ml EP管,冰上静置15分钟。用纱布将所有装有感受态的EP管包好,用棉线系好后放入液氮中速冻,在液氮中静置12小时以上。取出感受态放入-70℃超低温冰箱备用。效率非常高,一般可到1undefined8,好时可到1undefined9,特别适宜于大
以下是我院一位检验科主任竞岗者的演讲报告,他能找准科室建设和发展中的问题和薄弱点,吸取其他科室的创新成果,从流程再造、成本管理、人才建设、质量管理等方面,提出相应的改革对策,对科室三年工作有明确的目标。现发布于博客上,供各位评阅: 科学化的实验室管理对检验科工作具有强力的推动作用,我们可以从以下七个方面着手开展管理工作: 一、规范服务,改进检验服务流程 在科室开展职业道德教育,抓好规范服务的落实,树立员工“一切以病人为中心”的服务理念,把加强科室文化建设与职业道德建设有机地结合起来,围绕“一切为了病人、一切方便病人、一切服务于病人”的宗旨,想病人之所想,不断推出便民利民为民的措施,千方百计把方便让给病人,把实惠送给病人,努力实现工作“零差错”,服务“零投诉”的目标,在科室形成“人性化服务、亲情化关怀、温馨化环境”的良好氛围。 1、“急诊绿色通道”的建立。在急诊科合理配备急诊仪器(如干式生化),开展快速实用、特异性高的急诊检验项目(如斑点免疫结合试验),在尽可能短的内的时间内发出报告,准确及时地提供临床诊疗依据。 2、“弹性工作制度”的建立。目前检验科的
在免疫学研究中,常选用以下的几种实验动物:(一)大鼠:大鼠对绵羊红细胞和牛r球蛋白的免疫反应有品系差异。大鼠有抗体IgE,蠕虫感染常能诱发大量的IgE抗体,它们存在于血液循环中,常规的免疫法只能使大鼠产生少量的抗体,在体内存在的时间较短。百日咳杆菌免疫大鼠主要产生IgE,如在此抗原中加入福氏完全佐剂,免疫大鼠则产生IgGa。(二)小鼠:小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgG1、IgG2a和IgG2b。小鼠很少见到典型的迟发型变态反应,也不象其它动物那样有规律。能诱发速发型变态反应,其全身性过敏反应的特点是循环不畅,循环性虚脱,常在几小时甚至10到20 分钟死亡。BALB/c小鼠常用于制备单克隆抗体。(三)豚鼠:豚鼠中已确定的免疫球蛋白有:IgG(IgG1、IgG2)、IgA和IgE。IgG1 是变态反应的媒介,IgG2在抗原抗体的反应中起结合补体的作用。豚鼠除作为补体的来源外,还被用于结核菌素的皮内试验和接触过敏物质的迟发型变态反应的研究。豚鼠和人的结核菌素反应差别是有无细胞浸润,另外豚鼠的迟发型变态反应在24-48h达到高峰,人在48-96h达到高峰。(四)兔:新西兰白兔常
摘要:SPR技术作为检测,分析生物分子相互作用的有效工具,有些国家已经生产出成熟的商业化的SPR传感系统。对SPR生物传感器的工作原理,应用领域,最新进展作出阐述,并对其在生物分子检测领域的应用和研究发展前景进行了讨论。 引言:表面等离子共振技术(surface plasmon resonance technology, SPR)是20世纪90年代发展起来的一种生物分子检测技术,是基于SPR检测生物传感芯片(biosensor chip)上配位体与分析物作用的一种前沿技术。在20世纪初,Wood观测到连续光谱的偏振光照射金属光栅时出现了反常的衍射现象,并且对这种现象进行了公开描述。1941年,Fano用金属与空气界面的表面电磁波激发模型对这一现象给出了解释。1957年,Ritchie发现,当电子穿过金属薄片时存在数量消失峰。他将这种消失峰称之为“能量降低的”等离子模式,并指出了这种模式和薄膜边界的关系,第一次提出了用于描述金属内部电 子密度纵向波动的“金属等离子体”的概念。2年后,Powell和Swan用
一、操作注意事项:由于RNA酶的广泛存在与难以灭活的顽固特性。使得RNA的提取纯化和后续工作变得非常困难。为了保证RNA的研究工作成功,请仔细阅读下列注意事项,相信它能帮助您解决常见的问题。归根究底,RNA工作的主要问题是防止RNA酶的污染。RNA酶无处不在,在实验操作的任何一步,任何偶然的疏忽或不当操作都有可能造成RNA酶污染,从而导致整个实验失败。因此,严格控制实验条件,避免任何可能的污染是保证实验成功的关键,必须做到以下几点:1. 如果可能,实验室应辟出专门RNA操作区,离心机、移液枪、试剂等均应专用。RNA操作区应保持清洁,并定期进行消毒。2. 操作过程中应自始至终佩戴抛弃式橡胶或乳胶手套,并经常更换,以避免将手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNA酶带入试管或污染用具。尽量避免使用抛弃式塑料手套。塑料手套不贴身,常常造成操作不便,而且多出部分还容易在器具上遭RNA酶污染并向未污染处传递,扩大污染。3. 尽量使用一次性枪头、离心管等塑料制品,尽量避免与其它实验共享器具,以防止交叉污染。推荐使用出厂前已经灭菌的枪头和离心管,大多国外厂商供应的无菌塑料制品很少有RNA酶污染,买
你需要准备好完成初稿所须的详细资料,如果没有你可以为每一节预备好一系列的不同要点的主标题,副标题和段落。有人推荐你从介绍并按顺序写起,以确保流 畅,另一些人建议你从最简单的材料与方法开始写起,然后是讨论、结论、介绍和文献部分以及标题,把摘要放在最后。无论如何,头等要事是动手开始写作,而不是空谈。 1. 准备好所有资料保证你已经将写作所需要的资料准备齐全,比如数据、文献、图表和图片等。 2. 选择期刊决定你计划投稿的期刊,并按期刊的要求写作。写作要求可以参考所选择期刊近期的出版物。 3. 开始写作写作初稿时,只须写下来,只要保证抓住了文章的要点和主题,语句不全或是语法错误无关紧要。 在你思想活跃时写作,而不要选择在疲劳时。试着找一个你能专心思考和写作的时间和地点。 4. 快速的写作初写时,不要担心语句,拼写或者标点,有想法就写下来,保持这样的节奏。疑点放在最后。试着快速和顺畅地写作。用缩写词并为不能马上想起的句子留下空白。 5. 用自己的声音写作表达你自己的想法有助于清晰地写作,这样也可以帮助读者更容易理解你的思想。 6. 不要修改不要想着初稿就能搞定一切,不要修改你写的内容,否则你会走
引物(primers): 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。引物的重要性:在整个PCR体系中,引物占有十分重要的地位。 引物的重要性: 在整个PCR体系中, 引物占有十分重要的地位。PCR的特异性要求引物与靶DNA特异结合,不与其他非目的DNA结合,PCR的灵敏性要求DNA聚合酶能对引物进行有效的延伸,可见引物设计好坏与PCR结果密切相关。 引物设计原则: 1. 引物长度 一般为15-30个核苷酸,在做长片段PCR或做某些特殊的PCR时应使用较长的引物,但最多不超过50个核苷酸。 2. 碱基分布的均衡性 同一碱基连续出现不应超过5个;GC含量一般40-60%;GC含量太低导致引物Tm值较低,使用较低的退火温度不利于提高PCR的特异性;GC含量太高也易于引发非特异扩增。 3. 引物Tm值 一般要求:55℃~65℃。 计算: 对于低于20个碱基的引物,Tm值可根据Tm=4(G C) 2(A T)来粗略估算; 对于较长引物,Tm值则需要考虑
最新一期国际顶级学术期刊《Cancer Cell》杂志以论著形式发表了第二军医大学医学遗传学教研室的研究人员在肝癌转移方面的研究论文,报道了该课题组发现一种表达于人肝癌细胞中的长链非编码RNA(lncRNA),通过直接结合其他RNA分子,调控肿瘤微环境,促进肝癌的早期侵袭及晚期定植。第二军医大学医学遗传学教研室的袁继行博士和孙树汉教授分别是本文的第一作者和通讯作者。背景介绍肝癌是世界上最常见的一种侵袭性人类恶性肿瘤,其主要是由于肝内及肝外转移。目前,世界医学界及生物高技术领域高度重视肝癌转移机制的基础研究,以期研发出更高效的抗肝癌转移治疗药物。转移是一个复杂的过程,包括早期的侵袭、晚期于转移灶的定植等,许多细胞内在的成分和外在微环境因素都可影响肝癌细胞的转移潜能。但是,调控转移级联反应的分子机制仍不清楚。加强对其分子机制的理解,可以促进开发有效的转移靶向治疗和改善肝癌患者的综合预后。多功能的细胞因子转化生长因子β(TGF-β)精细控制一个复杂的信号网络来调控肿瘤的发生和进展。TGF-β通过诱导细胞周期停滞和细胞凋亡来抑制肿瘤。然而,TGF-β还可通过增强细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进
一、 显微镜的基本光学原理(一) 折射和折射率光线在均匀的各向同性介质中,两点之间以直线传播,当通过不同密度介质的透明物体时,则发生折射现象,这是由于光在不同介质的传播速度不同造成的。当与透明物面不垂直的光线由空气射入透明物体(如玻璃)时,光线在其介面改变了方向,并和法线构成折射角。(二)透镜的性能透镜是组成显微镜光学系统的最基本的光学元件,物镜目镜及聚光镜等部件均由单个和多个透镜组成。依其外形的不同,可分为凸透镜(正透镜)和凹透镜(负透镜)两大类。当一束平行于光轴的光线通过凸透镜后相交于一点,这个点称“焦点”,通过交点并垂直光轴的平面,称“焦平面”。焦点有两个,在物方空间的焦点,称“物方焦点”,该处的焦平面,称“物方焦平面”;反之,在象方空间的焦点,称“象方焦点”,该处的焦平面,称“象方焦平面”。光线通过凹透镜后,成正立虚像,而凸透镜则成正立实像。实像可在屏幕上显现出来,而虚像不能。(三) 影响成像的关键因素-相差由于客观条件,任何光学系统都不能生成理论上理想的象,各种象差的存在影响了成像质量。下面分别简要介绍各种相差。1、色差(Chromatic aberration)色差是透镜成
(一)原理: 叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等有机溶剂提取。提取液可用色谱分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各种成分在两相(固定相和流动相)间具有不同的分配系数,所以移动速度不同,经过一定时间后,可将各种色素分开。 (二)材料、仪器设备和试剂 1. 材料:菠菜、小白菜叶片 2. 仪器设备:研钵,漏斗,三角瓶,剪刀,滴管,培养皿(直径11cm),广口瓶,圆形滤纸(直径11cm) 3. 试剂:95%乙醇,石英砂,碳酸钙粉,推动剂:按石油醚:丙酮:苯=10:2:1比例配制(v/v) (三)试验步骤 1. 叶绿体色素的提取 (1) 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(2g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎
相关专题 酵母单杂交 法是研究特定DNA序列和蛋白质相互作用的有效手段,cDNA文库构建作为酵母单杂交实验的核心技术,那么酵母单杂交实验中cDNA文库选择什么试剂盒构建呢? 酵母单杂交体系(yeast one-hybrid system)常用于研究DNA -蛋白质间的相互作用。 酵母单杂交体系可识别稳定结合于DNA上的蛋白质 ,可在酵母细胞内研究真核DNA-蛋白质间的相互作用,并通过筛选DNA文库直接获得靶序列相互作用蛋白的编码基因。也可用于分析鉴定细胞中转录调控因子与顺式作用元件相互作用。 酵母单杂交原理: 将已知的顺式作用元件构建到最基本启动子(minimal promoter,Pmin)上游,把报告基因连接到Pmin下游。将待测转录因子的cDNA与酵母转录激活结构域(activation domain,AD)融合表达载体导入细胞,该基因产物如果能够与顺式作用元件结合,而激活Pmin启动子使报告基因表达。 酵母单杂交体系主要用于分离编码结合于特定顺式调控元件或其他DNA位点的功能蛋白编码基因,验证反式转录
一、预处理 1. 脱蜡至水 (1)二甲苯5分钟,2次 (2)100%酒精1分钟,2次 (3)95%酒精1分钟,1次 (4)85%酒精1分钟,1次 (5)双蒸水1分钟,3次 2. 加热预处理 (1)热预处理液(试剂盒内带)加热至98-100℃时,放入切片,15-20分钟。 (2)双蒸水洗1分钟,3次 3. 胃蛋白酶消化 (1)将胃蛋白酶先放入37℃温箱预热,然后滴加至组织上。 (2)室温,5-30分钟(其间用显微镜观察,如果出现细胞核向外突出,有荷包蛋样改变即可停止,此步较为关键,消化不足和消化过了,都会导致假阴性或只有少量阳性) (3)双蒸水1分钟,3次 4. 酒精脱水 (1)85%酒精1分钟,2次 (2)95%酒精1分钟,1次 (3)100%酒精1分钟,1次 (4)室温或37℃温箱干燥5分钟 二、变性和杂交1. 滴加探针:在组织中央滴加探针(约法10-15 μl),将盖玻片轻轻的盖在组织上,避免产生气泡。2. 将玻片放在原位杂交仪或原位PCR仪上,如没有也可平放于铝制饭盒等底平的器皿底部。3. 95℃变性5分钟,
染色技术是分类白细胞的经典依据,但瑞氏染色这类形态学复合染色不能被自动分析所模拟。一般光学技术只能测到光强等量的参数,而不能测得波长等属性的参数。因此,自动分类就要求用单染来甄别。过氧化氢是生物氧化还原反应的最重要氧化剂,在吞噬过程中广泛应用。因此,可以根据细胞过氧化氢酶染色来推断白细胞的吞噬功能强弱,并结合细胞的大小,从而将白细胞分为:高过氧化氢酶的嗜酸性粒细胞、次之的中性粒细胞、较弱单核细胞以及没有过氧化氢酶的淋巴细胞和嗜碱性粒细胞四类。从而达到分类的目的。由于一般嗜碱性粒细胞很少,因此没有过氧化氢酶的细胞可以近似的认为是淋巴细胞。方法:将血加入到含有清洗剂和甲醛的高渗液体内,其中清洗剂(含非离子活性剂)使细胞破坏,甲醛使白细胞浆内酶被固定。此后加入过氧化氢和4- 氯-萘酚、加热,如果待检细胞浆中含有过氧化氢酶即可分解过氧化氢产生[O],后者可使4-氯-萘酚显色并沉积定位于酶反应部位。细胞通过测试区时,由于酶显色不同和细胞大小的差异,激光束射到细胞上前向角和散射角不同。以X轴为吸光率标记(酶反应强度),Y轴为光散射(细胞大小),每个细胞产生的两个信号,即可将白细胞分为四类。由于淋巴
仪器中文名称 仪器英文名称 英文缩写原子发射光谱仪 Atomic Emission Spectrometer AES电感偶合等离子体发射光谱仪 Inductive Coupled Plasma Emission Spectrometer ICP直流等离子体发射光谱仪 Direct Current Plasma Emission Spectrometer DCP紫外-可见光分光光度计 UV-Visible Spectrophotometer UV-Vis微波等离子体光谱仪 Microwave Inductive Plasma Emission Spectrometer MIP原子吸收光谱仪 Atomic Absorption Spectroscopy AAS原子荧光光谱仪 Atomic Fluorescence Spectroscopy AFS傅里叶变换红外光谱仪 FT-IR Spectrometer FTIR傅里叶变换拉曼光谱仪 FT-Raman Spectrometer FTIR-Raman气相色谱仪 Gas Chromatogra
1.神经行为评分 在梗死后24 h,按照Masao Shmi izu-Sasamata的方法[3]对所有大鼠进行神经行为评分,评分标准包括:①自主活动的程度,②左前肢偏瘫,③提尾时左前肢伸不直,④抗侧推能力,⑤向左倾斜度,⑥向左环行度,⑦对触须的反应。以上指标无异常为0分,中等异常为1分,严重异常为2分,将各项评分相加,总分为0~14分。 2.动物行为学评定 ①0分:无神经损伤症状; ②1分:不能完全伸展对侧前爪; ③2分:向瘫痪侧转; ④3分:向对侧倾倒; ⑤4分:不能自发行走,意识丧失。 3.大鼠神经损伤严重缺损评分(Neurological Severity Scores,NSS): 0分:神经功能正常; 1分:轻度神经功能缺损(提尾时左前肢屈曲); 2分:中度神经功能缺损(行走时向左侧转圈); 3分:中度神经功能缺损(向左侧倾斜) 4分:无自发行走,意识减退; 5分:与缺血有关的死亡。 4. 平衡木试验(Beam Balance Test, BBT): 把大