【目的和要求】 1. 了解从酵母中提取 RNA 的原理和方法。 2. 了解定性鉴定核酸的原理和方法。 【实验原理】 酵母含RNA 达2.67—10.0%，DNA 则少于0.03—0.516％。为此，提取RNA多以酵母为原料。 稀碱法使用稀碱（本实验用0.2% NaOH溶液）使酵母裂解，然后用酸中和, 除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀 RNA 。由此得到的 RNA为变性的RNA，可用作制备核苷酸的原料。 用硫酸水解 RNA 后,可生成磷酸、戊糖和碱基,各成分用以下反应加以鉴定： （1）磷酸与钼酸铵 试剂 作用可生成黄色磷钼酸铵 [(NH) 3 PO 4 ·12MoO 3 ]沉淀。 （2）核糖与地衣酚 试剂 作用呈鲜绿色。脱氧核糖与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物，而核糖无此反应。 （3）嘌呤碱与硝酸银反应可生成白色的嘌呤银化物沉淀。 【实验试剂和器材】 （一）试剂 酵母粉，0.2％氢氧化钠，乙酸，95％乙醇，无水乙醚，10%硫酸，浓硝酸，0.1N 硝酸银，

1、用0．65％Nacl溶液灌注蛙心出现心跳减弱 心肌的收缩活动是由Ca2+排触发的，由于心肌细胞的肌浆网不发达，故心肌收缩的强弱与细胞外Ca2+浓度呈正比。用 0．65％NaCL溶液灌注心，由于灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位二期内流Ca2+减少，胞浆Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减 弱。如果长时间用0．65％NaCL溶液灌流蛙心，心脏最终会停止收缩，但心肌仍能产生动作电位（即产生兴奋），这种现象称为兴奋一收缩脱耦联，是心肌细 胞内缺少Ca2+后的表现。2、用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳减弱用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态的现象。因为细胞外K+浓度增高时K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+可抑制细胞 膜对Ca2+的转运，使进人细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋一收缩耦联过程减弱心肌收缩力降低。当细胞外K+浓度显著增高时，膜内外的K+浓度梯度减小， 静息电位的绝对值过度减少，Na+通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。3、滴加2％CaCL2后，离体蛙心收缩力增强用高Ca

Lab 的经验和客户的难题以华联基因体实验室的长期以来承接客户 RNA 检体的经验来说，我们经常遇到的问题：（1）RNA 的总量不够；（2）RNA 有严重的盐类污染；（3）RNA 有严重的有机溶剂污染；（4）DNA 污染；（5）样品降解严重。前四项问题都还好解决，只需要再次萃取或进行纯化即可解决，但是样品降解就较为棘手，常常因重新准备检体一来一往， 耗掉不少心力和时间，最后也拿不到好的结果。客户经常会问为什么执行芯片实验会如此要求RNA 质量呢? 而其他的检测方法如实时定量聚合连锁反应（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction, Q-PCR）却不需要?回答这个问题前就要从实验的原理说起，简单 的讲 Q-PCR 的检测原理是针对要检测的基因，设计一对基因特异性的引子，透过反转录反应（RT）配合PCR 的放大方式和及时侦测放大的产物量，藉以回推原始的RNA 含量；而RT的方式主要是采用随机引子（Random_primer）、进行互补DNA (cDNA)的翻制，因此即便RNA有些微裂解，作为模板的RNA也可以忠实的被翻制成cDNA。但

相关专题 DNA微阵列基因表达数据分析 用于检测基因表达水平的 DNA 微阵列实验，应用之一是比较实验，目的是比较两个条件下的基因表达差异，从中识别出与条件相关的特异性基因，例如，识别可用于肿瘤分型的特异基因等。为了提高实验的可靠性，对于同一样本，往往有两次或更多次的重复实验，但是，由于 DNA 微阵列的费用仍然很昂贵，不可能重复足够多的次数来满足实验数据分析的要求，因此需要采用统计方法来分析这些数据。对于这些表达数据的分析，目的就是要识别在两个条件下有显著表达差异的基因。何谓显著表达差异?通常是指一个基因在两个条件中表达水平的检测值在排除实验、检测等因素外，达到一定的差异，具有统计学意义，同时也具有生物学意义。常用的分析方法有三类，第一类称之为倍数分析，计算每一个基因在两个条件下的 Ratio 值，若大于给定阈值，则为表达差异显著的基因;第二类方法采用统计分析中的 t 检验和方差分析，计算表达差异的置信度，来分析差异是否具有统计显著性;第三类是建模的方法，通过确定两个条件下的模型参数是否相同来判断表达差异的显著性，例如贝叶斯方法 。

相关专题 生物帮之抗体制备 【原理】 大分子颗粒性抗原 (如细菌、红细胞等)与其相应的抗体相结合，在适量的电解质存在及一定的温度下，经过一定的时间可出现肉眼可见的凝集团块，是为凝集反应。 试管凝集实验的应用，一般均以标准抗原 (已知抗原)测定免疫血清或患者血清中抗体的效价。 【材料】 1:10抗羊红细胞免疫 血清(配制前需经56℃30分钟灭活) 1%绵羊红细胞生理盐水悬液 生理盐水 试管及1ml刻度吸管 试管架及吸液橡皮乳头、红蜡笔 恒温箱 【方法】 1.取试管8支，排列于试管架上并做好标记。 2.每管各加入生理盐水0.5ml。 3.吸取1:10抗绵羊红细胞免疫 血清0.5ml加入第1管中并充分混匀。 4.自第1管中吸出0.5ml加入第2管中，经充分混匀后吸出0.5ml加入第3管中，如此依次稀释至第7管，混匀后吸出0.5ml弃去。此时1~7管所含免疫 血清的稀释度为1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:64

在电泳开始的时候，SDS-PAGE 利用不连续系统，在浓缩胶中浓缩或"堆积"样品，使其成为一条非常锐利的区带。在不连续缓冲系统中，最初胶中的阴离子不同于（或不连续）电泳缓冲液中开始时的阴离子。NuPAGE系统（Bis-Tris和Tris-Acetate）和Laemmli(Tris-Glycine)系统二者均为不连续系统的例证，以相同的方式起作用。但是，作为NuPAGE系统中不同离子的结果，这个系统在一个较低的pH值下工作。Tris-Glycine系统（图1）的情况，主要包括三种离子： a)氯（-），由胶缓冲液提供，由于相对于系统中其它的阴离子，阳极对它具有最高的吸引，因而充当先导离子。b)甘氨酸(-)，电泳缓冲液提供的主要的阴离子，由于在一个带电的环境中，它仅仅部分带有负电荷，并且保持在带有更高电荷的氯离子的后面，充当后随离子。c)Tris碱（+），出现在胶和电泳缓冲液中的共同的离子，在电泳时，Tris-Glycine系统中凝胶和缓冲液的离子形成了胶分离区域的9.5的工作pH值。图1 Tris-Glycine SystemNuPAGE® Bis-Tris系统（图2）的情况，主要包括三种

1、石蜡切片和冰冻切片的比较？ （1）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 （2）冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写着两者都可，那就都能做。 （3）石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构，且容易存放在室温，而冰冻切片比较麻烦，一定要存在-80度的低温冰箱中，尤其是用来做原位杂交的的切片，为了防止RNA降解，保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到4微米左右，所以原位杂交探针容易渗透到组织中去，容易成功，而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。 2、一抗的选择要点和技巧是什么？ （1）单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结

摘要： 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一. 外源质粒 DNA 转化 大肠杆菌 1 实验简介 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程 细菌 中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一.现演示利用化学的方法(热击法)：使用化学试剂(如CaCl2)制备的感受态细胞,通过热击处理将载体DNA分子导入大肠杆菌细胞中. 实验中使用的主要仪器：电热恒温水槽 超净工作台 台式离心机 电热恒温震荡器 电热恒温 培养箱 2 热击 DNA连接产物与大肠杆菌 感受态细胞 冰浴30min后,放置42摄氏度水浴锅中,热击90秒,后迅速将大肠杆菌转移到冰水中放置2-3min. 3 大肠杆菌复苏 上步热击后,一般都要对菌体进行一次复苏过程,向热击加入600-800 ul37摄氏度预热的无

IgE 与高亲和力IgE 受体 IgE主要由鼻咽、扁桃体、支气管、胃肠等处黏膜固有层中的浆细胞产生，这些部位也是变应原侵入并引起过敏反应的好发部位。IgE受体(FcεR)有两种类型：一类为高亲和力受体，即FcεR I(解离常数达1X10-10 M)，此类受体与Fc结合后的稳定性远高于其他Fc受体；另一类为低亲和力受体，称为FcεRⅡ，它和IgE结合的亲和力比FcεR1低100～1 000倍。研究发现FcεR I还有两个异构体，分别表达于IL-4刺激过的B细胞、单核细胞和嗜酸粒细胞表面。 IgE与其他抗体类别的主要区别在于组织中的分布不同，它往往先通过其高亲和力的受体FcεR I紧密结合到肥大细胞表面，然后再识别和结合抗原。当变应原与IgE结合后，细胞表面多个FcεR I受体分子发生交联，导致肥大细胞的活化和生物活性物质的释放，发生I型超敏反应。嗜碱粒细胞和活化的嗜酸粒细胞也表达受体FcεR I，因而也能够结合IgE分子并参与引发I型超敏反应。因而，免疫应答中有两个主要的因素参与决定IgE的产生，一是各种促使ThO细胞向Th2细胞分化的信号；另一则包括了Th2细胞产生的细胞因

由Mullis等在1983年建立的PCR技术已成为分子生物学、遗传学等学科研究领域的经典实验方法。近年来,该技术本身获得了长足发展,可靠性不断提高,在聚合酶链式反应基本原理的基础上,发展了一系列新的概念和实验方法,在生命科学研究中具有重要价值。实时定量RT - PCR的原理、方法和应用1、实时定量RT - PCR的原理实时定量PCR的发明归功于两个重要的发现:一是发现DNA Taq酶有5′ 3′外切酶活性,二是利用荧光能量传递技术构建了双标记寡核苷酸探针,即TaqMan探针。在PCR过程中,这些荧光信号可以被探测器所“即时”捕获,电脑软件可以通过等式ΔRn = R+n - R-n 计算ΔRn ,其中, R+n 是表示每点测量的荧光强度, R-n 表示荧光基线强度,ΔRn 的值表示PCR过程中,探针降解的量,就是PCR产物的量 。以ΔRn的值对循环数作曲线,选择一个荧光阈值,荧光达到荧光阈值的循环数叫做阈值循环数(Cycle Threshold,Ct ) ,而Ct 值随这些起始模板量的增加而线性降低,从而可以通过Ct 值推算起始模板量。该方法的特异性由引物和探针的特异性所决定,只有在PC

1、仪器一定要有良好的使用环境等离子体光谱与其它大型精密仪器一样，需要在一定的环境下运行，失去这些条件，不仅仪器的使用效果不好，而且改变仪器的检测性能，甚至造成损坏，缩短寿命。根据光学仪器的特点，对环境温度和湿度有一定要求。如果温度变化太大，光学元件受温度变化的影响就会产生谱线漂移，造成测定数据不稳定，一般室温要求维持在70～75摄氏度间的一个固定温度，温度变化应小于±1摄氏度。而环境湿度过大，光学元件，特别是光栅容易受潮损坏或性能降低。电子系统，尤其是印刷电路板及高压电源上的元件容易受潮烧坏。湿度对高频发生器的影响也十分重要，湿度过大，轻则等离子体不容易点燃，重则高压电源及高压电路放电击毁元件，如功率管隔直陶瓷电容击穿，输出电路阻抗匹配、网络中的可变电容放电等，以至损坏高频发生器。一般室内湿度应小于70%，最好控制在45～60%之间，应有空气净化装置。过去由于基建施工，我们的环境条件很差，甚至仪器室多次被水淹，受潮及室温变化过大，仪器不是定位困难就是经常发生故障。搬到新的仪器室后条件改善了，仪器运行就正常多了。2、仪器的供电线路要符合仪器的要求为了保证ICP仪的安全运行，供电线路必须

近些年来，非同位素标记分析技术发展迅速。它主要包括：酶标记分析技术、化学发光分析技术、生物发光分析技术和时间分辨荧光分析技术。信号放大时间分辨荧光分析技术克服了其他技术的缺点，具有非同位素、灵敏度高、标记物制备简单、测量快速和分析动态范围宽等优点，成为一种最有发展前途的非同位素标记分析技术。一、信号放大时间分辨荧光分析技术的原理及特点信号放大时间分辨荧光分析（time-resolved fluorescence assay，TRFA）技术是把生物信号放大、镧系元素螯合物的固有优点以及时间分辨和波长分辨两种测量技术合为一体，极其有效地排除了非特异荧光，测量了特异荧光，因而灵敏度很高。信号放大时间分辨荧光分析技术的优点归根到底是源于镧系元素螯合物的固有特点［1］。它们是：（1）激发光谱带较宽，可以增加激发能，提高标记物的比活性。（2）发射光谱带很窄，50%发射谱带的宽仅约为10nm，可以利用通带滤光片，只允许峰值波长±5nm谱段通过供测量，在如此窄的谱段内，非特异荧光很少，可有效降低本底荧光，且能量损失也不大。（3）激发光与发射光之间的stokes位移大，有利于排除激发光散射等的干扰。（4

蛋白质的分子设计是蛋白质工程的一个重要方面。设计分成三类：一是小范围改造，就是对已知结构的蛋白质进行少数几个残基的替换，来研究和改善蛋白质的性质和功能；二是较大程度的改造，是对来源于不同蛋白质的结构域进行拼接组装，期望转移相应的功能；三是蛋白质从头设计。所谓蛋白质从头设计就是给定一个目标三维结构，要求找出与已知顺序无明显同源，能折叠成目标结构的氨基酸顺序来。1、定点突变蛋白质中的氨基酸是由基因中的三联密码决定的，只要改变其中的一个或两个就可以改变氨基酸。通常是改变某个位置的氨基酸，以研究蛋白质的结构、稳定性或催化特性。2、盒式突变一次可以在一个位点上产生20种不同氨基酸的突变体，可以对蛋白质分子中重要氨基酸进行“饱和性”分析。利用定位突变在拟改造的氨基酸密码两侧添加两个原载体和基因上没有的内切核酸酶切点，用该内切核酸酶消化基因，再用合成的发生不同变化的双链Ⅲ伙片段替代被消化的部分。这样一次处理就可以得到多种突变型基因。3、蛋白质融合将编码一种蛋白质的部分基因重组到另一种蛋白质基因上或将不同蛋白质基因的片段组合在一起，经基因克隆和表达，产生出新的融合蛋白质。这种方法可以将不同蛋白质的特性

1. 免疫失败的可能原因及应采取的措施 答：有时不能获得满意的抗血清，可从下列几方面找原因，并改进之。 （1）免疫动物的种属及品系是否合适，可考虑改变动物的种属或品系，或扩大免疫动物的数量。 （2）抗原质量是否良好，可改用其它厂家的产品或改用同一厂家的其它批号，也可考虑改变抗原分子的部分结构，或改进提取方法。 （3）制备的免疫原是否符合要求，可从偶联剂，载体、抗原或载体的比例、反应时间等多方面去考虑，并加以改进。 （4）所用的佐剂是否合适，乳化是否完全，可改用其它佐剂，或加强乳化。 （5）免疫的方法、剂量，加强免疫的间隔时间和次数，免疫的途径是否合适。 （6）动物的饲养是否得当，如营养（饲料、饮水）、环境卫生（通风、采光、温度）是否符合要求，动物的健康情况是否良好等。2. 制备单克隆抗体影响因素、失败原因分析 答：由于制备McAb的实验周期长，环节多，所以影响因素就比较多，稍不注意就会造成失败。其主要失败原因和影响因素有： （1）污染包括细菌、霉菌和支原体的污染。这是杂交瘤工作中最辣手的问题。一旦发现有霉菌污染就应及早将污染板弃之，以免污染整个培养环境。支原体

内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清（浆）标本中，有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质，从而导致测定结果的假阳性。1. 类风湿因子（rheumatoid factors,RF）在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的RF，RF一般为TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现最为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人弘链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。为避免RF对ELISA测定的干扰，通常可以采取下述措施：(1)稀释标本：这在判断急性病原体感染的特异IgM抗体如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗体检验等尤为有用。因为急性感染时，血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高，而RF滴度通常相对要低得多。因此，在测定前

相关专题 目的要求 (1) 了解乳酸脱氢酶活性测定原理。 (2) 学习用比色法测定酶活性的方法。 实验原理 乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase简称LDH，EC.1.1.1.27, L－乳酸： NAD+氧化还原酶）广泛存在于生物细胞内，是糖代谢酵解途径的关键酶之一，可催化下列可逆反应。 LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多，其中紫外分光光度法更为简单、快速。鉴于NADH, NAD+ 在340nm及260nm 处有各自的最大吸收峰，因此以NAD+为辅酶的各种脱氢酶类都可通过340nm光吸收值的改变，定量测定酶活力，如苹果酸脱氢酶、醇脱氢酶、醛脱氢酶、甘油－3－3磷酸脱氢酶等。 本实验测乳酸脱氢酶活力，是在一定条件下，向含丙酮酸及NADH的溶液中，加入一定量乳酸脱氢酶提取液，观察NADH在反应过程中340 nm 处光吸收减少值，减少越多，则LDH活力越高。其活力单位定义是：在25℃，pH7.5条件下每分钟A340下降值为1.0的酶量为1个单位。 试剂和器材 一.试剂

摘要： 下文是感受态细胞转化操作流程及提高转化效率的建议. 1、在冰上预冷2支14-ml BD Falcon聚丙烯圆底 离心管 .1支用来转化样品,1支做pUC18对照.同时将NZY+ broth培养基在42°C预热. 2、冰上融化感受态细胞.融化时轻轻将细胞混匀并分装成100ul/管. 3、每管中加入随试剂盒提供的4 ml b-ME( 巯基乙醇 ). 4、温和转动试管,将细胞在冰上放置10分钟,每2分钟温和转动一下. 5、每管细胞加入0.150 ng样品 DNA (或2 ml连接反应物)(参见DNA 质量与体积说明.)用灭菌dH2O水按1:10稀释对照pUC18 DNA,并取1 ml稀释的pUC18 DNA加入转化细胞. 6、温和转动试管,并在冰上放置30分钟. 7、试管在42°C水浴热激30秒.热激时间对转化效率极度重要.8、试管冰浴2 分钟. 9、每管加入0.9 ml 预热 (42°C) 的NZY+

器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等具体步骤1. 水：细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.2. PBS (也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4•H2O 1.56g，KH2PO4 0. 2g ）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。用HCl或NaOH调PH到7.4。移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。3. 胰蛋白酶溶液：胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，

SNP 是指基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性，在群体中的发生频率不小于1 %。包括单个碱基的转换、颠换、插入和缺失等。所谓转换是指同型碱基之间的转换，如嘌呤与嘌呤( G2A) 、嘧啶与嘧啶( T2C) 间的替换；所谓颠换是指发生在嘌呤与嘧啶(A2T、A2C、C2G、G2T) 之间的替换。依据排列组合原理，SNP 一共可以有6种替换情况，即A/ G、A/ T、A/ C、C/ G、C/ T 和G/ T ，但事实上，转换的发生频率占多数，而且是C2T 转换为主，其原因是Cp G的C 是甲基化的，容易自发脱氨基形成胸腺嘧啶T ，Cp G 也因此变为突变热点。SNP 在动物基因组中分布广泛，每一个核苷酸发生突变的概率大约为10 - 9 。由于选择压力,SNP在单个基因、整个基因组中以及种群间的分布是不均匀的。SNP 在非编码区中要多于编码区，而且在编码区也是非同义突变(有氨基酸序列的改变) 的频率比其他方式突变的频率低得多。而基因间，同一种基因中的编码SNP (coding SNP ,cSNP) 的数目也不相同，可从0～29 个不等。多项研究同时发现不同种族间SNPs 的

定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。至于荧光检测系统，多色多通道检测是当今的主流趋势——仪器的激发通道越多，仪器适用的荧光素种类越多，仪器适用范围就越宽；多通道指可同时检测一个样品中的多种荧光，仪器就可以同时检测单管内多模版或者内标+样品，通道越多，仪器适用范围越宽、性能就更强大。荧光检测系统主要包括激发光源和检测器。激发光源有卤钨灯光源、氩离子激光器、发光二极管LED光源，前者可配多色滤光镜实现不同激发波长，而单色发光二极管LED价格低、能耗少、寿命长，不过因为是单色，需要不同的LED才能更好地实现不同激发波长。监测系统有超低温CCD成像系统和PMT光电倍增管，前者可以一次对多点成像，后者灵敏度高但一次只能扫描一个样品，需要通过逐个扫描实现多样品检测，对于大量样品来说需要较长的时间。定量PCR仪需要考虑的另外一个因素是软件设计，这