目前市场上几种代表性的核酸染料： GelRed是一款集高灵敏度、低毒性和光稳定性于一体的核酸凝胶染料。由于染料分子不能透过人体细胞膜，保证了实验环境的安全与洁净。该产品已通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，不会造成任何环境污染。 EB (溴化乙啶）是早期分子实验中常用的小分子核酸凝胶染色剂，但染色效果并不灵敏，背景荧光信号太强，分辨率不高。最重要的EB是一种高诱变性致癌的化学物质。 SYBR Green I和 SYBR Gold 也被厂家宣传为灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR safe 虽然被认为安全，但它的染色灵敏度远远达不到标准。 Goldview从对比试验结果来看，该产品就是AO（丫啶橙，一种剧毒致癌产品，且荧光亮度不佳）。请看Goldview 与 AO 对比试验结果。 下面看一下实验结果： 结果一： 图一结果显示：采用同样的样品及电泳条件（点泳池中跑4块25 ml的凝胶）： 美国原装G

ELISA实验因灵敏度高，特异性强在生物科研上得到了广泛的认可，但对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会对最终的实验结果产生比较大的影响，比如实验出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。出现该现象的可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检测A，检测B或者底物溶液TMB。洗板或者加样过程中，酶标记物被污染失活，稀释液中含有酶抑制剂如叠氮呐等。配置稀释液的蒸馏水可能被污染。洗涤液是浓缩型的，没有按比例进行稀释。酶标记物的活性和效价比较低。溶液的PH值不正确，一般稀释液的PH值应保持在7.2-7.4。 2.显色弱灵敏度低在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中孔的显色比较浅，即只有微弱的信号呈现。出现该现象的可能原因：产品过有效期，试剂没有按规定进行适当的保存。试剂，标准品或者样品在使用前没有平衡到室温。少加了试剂的量或者加入试剂的稀释比例不当。洗板或者加样过程中，酶标物受污染失活。孵育时间和孵育温度未达

一、Bispecific antibodies introductionBispecific antibodies usually do not occur in nature but are constructed by recombinant DNA or cell-fusion technologies. Most are designed to recruit cytotoxic effector cells of the immune system effectively against pathogenic target cells. This complex task explains why, after more than 15 years of extensive research, many different formats of bispecific antibodies have been developed but only a few have advanced to clinical trials. Here, we give a brief hist

蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备，由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合，抗原结合片段（Fab）可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化，但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗体与蛋白A或蛋白G的亲和力，可以选用蛋白A或蛋白G微珠。一般推荐将蛋白A用于与小鼠单抗IgG2a，IgG2b和IgG3亚类抗体交联，而将蛋白G用于IgGl类抗体。蛋白G用于与大鼠单抗的交联，对于各种多克隆抗体，蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的抗体，而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。 一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后，再通过双功能结合剂将其交联。双功能结合剂的种类很多，但通常使用二甲基庚二酸酯（DMP），因其价廉而且易于操作。DMP的两种结合基团相同，都能与游离的氨基结合，由于其碳分子骨架的韧性大，大多数抗体-蛋白A或蛋白G组合在合适的距离内存在反应位点，故能有效地交联。偶然不能有效交联，可以使用带有不同长度碳原子空隙的其他交联剂。 准备工作 应用抗

摘 要： 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记葡萄球菌A蛋白(SPA)，将重组的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上，制成免疫层析检测试条。 血清中IgG与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。 结果 用GICA与ELISA试剂盒对比检测了326份血清标本中抗CagA抗体，本方法的特异性为95.8%，敏感性为97.3%，两法符合率为96.6%。 结论 GICA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。 关键词： 螺杆菌，幽门；细胞毒素相关蛋白A/ 分析；胶体金；免疫层析；抗体/ 分析 中国图书馆分类号 R 573 一、引言 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp) 与上消化道疾病的发生有十分密切的关

一、对象与方法 1. 监测对象 电子阅览室2个、学生食堂3个、教室6个、学生宿舍10个(其中女生宿舍5个、男生宿舍5个)、学生实验室4个。 2. 采样点设置 按照《室内空气质量标准》(GB/T188832002)的要求进行。每个监测目标设置5个采样点,即室内墙角对角线交点为一采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。采样高度为1.5 m.采样点应远离墙壁1m以上,并避开空调、门窗等空气流通处。 3. 空气样品采集与细菌培养 采用自然沉降法采集样品。采样时，将营养琼脂平板置于采样点，打开皿盖，于空气中暴露5 min，盖上皿盖，翻转平板,经37℃、24 h培养后，计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数。根据奥梅梁斯基公式计算空气细菌总数。细菌总数(cfu/m3)= 50 000N/AT，式中：A=平板面积(cm2)；T=平板暴露时间(min)；N=平均菌落数(cfu/平皿)。 4. 评价标准 依据我国《室内空气质量标准》,室内空气菌落总数≤2 500 cfu/cm3 为合格，超过以上结果为不合格。 5. 统计分析 数据用表示,采用SPSS

半抗原是指本身无免疫原性，只具有反应原性的物质。半抗原物质多数为低分子量的化学，例如多糖、多肽、甾体激素、脂肪胺、类脂质、核酸、某些药物（包括抗生素）以及其他化学物品等。半抗原不能直接用作免疫原，只有把这些半抗原和大分子物质结合后，才具有免疫原性，刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞。这种经过人工修饰的半抗原称之为人工抗原，用于偶联半抗原的大分子物质称为载体。一、常用的载体1、蛋白质类蛋白质是一类结构复杂的胶体两性化合物，是一种常用的良好载体。其中以白蛋白最为普遍，这是由于白蛋白具有较高的溶解度，免疫原性强，取材方便。常用的有人血清白蛋白、牛血清白蛋白、兔血清白蛋白等，以牛血清白蛋白最为常用。2、多肽聚合物多肽聚合物是人工合成的。常见的有多聚赖氨酸，分子量可达十几万到几十万，是良好的载体。这种多聚物和半抗原结合后，可刺激动物产生高滴度、高亲和力的抗体。多聚赖氨酸可与半抗原的-NH2或-COOH结合。3、大分子聚合物包括羧甲基纤维素、聚乙烯比咯烷酮等。大分子聚合物皆可与半抗原结合，加入弗氏佐剂可诱导动物产生高效价的抗体。二、选择载体时应考虑以下因素1、带有正电荷的碱性蛋白往往是好的免疫源2、大

人类基因组计划(human genome project，HGP)由美国提出并于1990年10月在美国正式启动。计划在15年时间，即到2005年，投入30亿美元，完成人类全部24条染色体的30亿个碱基序列测定(含X、Y染色体)。其核心内容是构建DNA序列图，即分析人类基因组DNA分子的基本成分碱基的排列顺序，绘制成序列图。 英、日、德、法等国随后积极响应，使人类基因组计划逐步演变成为一项大型国际科技合作计划。作为参与这一计划的唯一的发展中国家，我国于1999年跻身人类基因组计划，承担了1％的测序任务。 2000年6月，人类基因组计划完成了人类基因组序列的“工作框架图”；2002年2月又公布了人类基因组“精细图”；该计划已提前至2001年完成。HGP与曼哈顿原子弹计划和阿波罗登月计划并称为20世纪三大科学计划。 人类基因组DNA序列图谱完成后，鉴定基因组多态性及其单倍型，以及寻找其在生物和医学应用中的重要作用成为了人们关心的热点。人们相信，在个体间，人类基因组DNA序列的差异决定了个体在疾病的易感性和药物的敏感性方面的差异。通过比较大量个体基因组的差异，从遗传的角度可以

准确地书写出植物花程式或绘制出花图式，是学习植物分类学必须掌握的基本技能之一。现分别介绍如下：一、花程式 花程式(flower formula)就是将花的组成、排列、位置、对称性以及各组成部分的相互关系用简单的符号及数字写成的方程式。现将花程式中常用的符号及数字所表示的含义，表述如下：1．符号所表示的含义(1)花各组成部分所用符号一般用花各部分拉丁名词的第一个字母来表示。如：P 表示花被，是拉丁文Perianthium 的缩写。K 表示花萼，是德文Kelch 的略写。C 表示花冠，是拉丁文Corolla 的略写。A 表示雄蕊，是拉丁文Androecium 的略写。G 表示雌蕊，是拉丁文Gynoecium 的略写。(2)花各组成部分形态结构特征所用符号↑表示两侧对称花。 _表示辐射对称花。 ()表示联合。 + 表示某部分排列的轮数关系(一轮以上)。 -(短横线)表示子房位置。若子房上位，“-”写在G 下方，如G；如子房下位，则“-”写在G 上方，如Ḡ ；如子房半下位，在G 上、下方各写一“”，如。表示两性花(两性花的符号有时略而不写)；♂ 表示雄花；♀ 表示雌花。(♂ 、♀

我们知道噬斑法和TCID50法检测的是感染性病毒的浓度，并不体现病毒的总浓度（总颗粒数）。现在有越来越多的研究显示，很多病毒在包装过程中由于缺失基因组，形成空心病毒。或者在合成过程中，基因的突变或者缺陷导致蛋白的突变，造成病毒没有感染性。而这些非感染性病毒的数量在总病毒数量中所占的比例意义重大，能影响体内和体外的研究结果。所以快速的病毒总浓度定量方法是非常必要的。 流感疫苗的生产中，从鸡胚培养来源的流感疫苗在使用专门的试剂裂解后，收获免疫原蛋白HA。非传染性的流感病毒（被证实含有衣壳蛋白和部分的基因组）在裂解后同样能贡献免疫原蛋白HA。所以总病毒浓度的评估对流感疫苗的生产意义重大。此外，总病毒浓度的定量也有助于减毒疫苗的生产。减毒疫苗是复制缺陷的非感染性的但是能引发机体免疫反应的一种疫苗。减毒疫苗既然不能复制，所以就不会引起细胞病变反应，而CCID50法则以细胞病变反应为判断基准。在某种意义上来说，所有的减毒疫苗是由非感染的病毒颗粒构成，因此，采用总病毒浓度定量的方法是减毒疫苗唯一可靠的方法。在动物疾病的预防和治疗中，采用感染性方法测得病毒滴度来决定注射的剂量，往往忽视了非感染性病毒

目前市场上的血清品牌五花八门，除了名气最大的 Gibco，Hyclone 之外还有很多其它的进口品牌和国产品牌。价格也高低不一，可以称得上鱼龙混杂，血清的水深的很。 很多不法奸商为追逐高额利润，大肆造假，炮制出许多所谓 Gibco，Hyclone 等「原装进口胎牛血清」，甚至很多国家严禁进口的疫区血清或者超级紧俏的血清货号，他们都能提供「大量现货」，坑害广大科研工作者，造成实验失败，毕业延期等恶劣影响。 特别是近年来，进口血清紧俏，价格一路高涨，这些假冒名牌血清利用很多科研工作者对市场不了解，纷纷低价销售所谓的进口血清，劣币驱逐良币。让很多终端客户误以为 Gibco 和 hyclone 等血清价格便宜，而使得真正的正品血清因为价格高昂而得不到客户认可。 上海揽宝公司鉴于此，特地选择一些价格适中，质量可靠，久经市场考验的进口血清品牌，以合理的价格奉献给客户，而其中的佼佼者就是 Gemini 血清。该品牌进入国内时间较短，知名度相较于 Gibco 等品牌不是很高，但是正因为此，才使得市面上几乎没有这个品牌的假冒产品，因此请广大科研工作者放心选购。 购买 Gemi

荧光法是一种非常有用的工具，各种各样的分析领域都在利用它。由于它具有高灵敏度、好的选择性以及可提供多参数信息（如，荧光强度、荧光寿命、荧光各向异性）等特点，所以被广泛用于生物制药研究、临床诊断、宇宙空间环境监测、免疫分析中分子间作用原理研究、DNA序列分析、荧光原位杂交以及细胞成分分析等。镧系系复合物由于其特有的荧光特性，而受到广泛关注，特别是在临床生化分析中。利用镧系元素的荧光特性，构建时间分辨荧光免疫分析（time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA）试剂以及创建新的灵敏度高的荧光免疫分析方法（fluoroimmunoassay）是当今临床生化的主要研究方向。1、荧光基本原理：化学体系的光致发光提出较早，光致发光有两种常见的类型荧光和磷光，它们都是化学体系被电磁辐射所激发，然后发射出相同或较长波长的辐射。其中磷光，从分析角度看，意义不是很大。荧光由于其固有的灵敏性而受到人们的偏爱。荧光标记方法的检出限可达10-15～10-18水平。简单和复杂的气态、液态和固态化学体系均可发荧光。最简单的荧光有稀的原子蒸气发出，经过10-8秒后电子回到基态同时发出两种相

细胞培养基的种类繁多，细胞培养方式也较多，如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个细胞培养工作者都很重要。培养基的使用依据不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。1、细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。1.1 细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5%～10%的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右，细胞的形态和功能不受影响。注：SLM120为清大天一公司低血清培养基，上图为培养24小时细胞密度，下图为48小时细胞密度。血清可在培养基灭菌后加入，也可与培养基混合后一起过滤。血清的添加一方面补充了细胞生长、增殖所需的一些因子（如生长因子等），另一方面也增加了培养基的黏滞度，这样可以降低细胞在悬浮培养中或被胰蛋白酶消化后的损伤。但是血清的加入也带来了很多问题，血清都是批量生产，各批之间差异很大，血清含一些对细胞

一、实验目的 1．了解根尖的内部构造。2．了解根的初生结构、初次生结构。3．掌握被子植物根尖的吸收分泌功能。二、实验原理 从根的顶端到着生根毛的部位，叫做根尖，主根、侧根和不定根都具有根尖。根尖是根中生命活动最活跃的部分，根的生长和根内组织的形成都是在根尖进行的。根尖一般分为根冠、分生区、伸长区和成熟区四个部分。经过根尖顶端分生组织的分裂、生长和分化，植物体发育出成熟的根结构，这种由顶端分生组织及其衍生细胞的增生和成熟所引起的生长过程，称为初生生长。初生生长形成的各种成熟组织都属于初生组织，它们共同组成的器官结构称为初生结构。从根的成熟区作一横切或纵切，就能清楚地看到根的初生结构由外至内分别为表皮、皮层和维管柱。A．近外方的组织； B．维管柱 l．表皮；2.皮层；3.内皮层；4.中柱鞘；5.原生木质部；6.后生木质部； 7.初生韧皮部大多数双子叶植物和裸子植物的根在初生结构成熟后，要继续进行次生生长，形成次生结构，包括次生维管组织和周皮，但有些草本双子叶植物和多数单子叶植物的根通常不再进行次生生长。根的次生维管组织是维管形成层活动的结果。维管形成层最早源于初生木质部与初生韧皮部之间原形

这种方法是一种用物理化学方法进行二级结构预测的方法，或称为立体化学方法。在蛋白质中，氨基酸的理化性质对蛋白质的二级结构影响较大，因此在进行结构预测时考虑氨基酸残基的物理化学性质，如疏水性、极性、侧链基团的大小等，根据氨基酸残基各方面的性质及残基之间的组合预测可能形成的二级结构。“疏水性”是氨基酸的一种重要性质，疏水性的氨基酸倾向于远离周围水分子，将自己包埋进蛋白质的内部。这一趋势加上空间立体条件和其它一些因素决定了一个蛋白质最终折叠成的三维空间构象。 随着蛋白质结构数据的积累，人们开始注意到一些较简单的序列与结构关系。可以通过疏水氨基酸出现的周期性预测蛋白质的二级结构，利用各种氨基酸的疏水值定位蛋白质的疏水区域。Lim等人很早就对α螺旋和β折叠归纳出了一套预测模式。例如α螺旋的轮状结构特征，轮的一侧通常处于蛋白质的疏水核心，另一侧则常处于亲水表面。因此，α螺旋中亲疏水氨基酸残基的出现位置也就有一定的规律性，亲水残基多出现在亲水侧面，而疏水残基则多出现在疏水侧面，反映在序列上就是一些特征的亲疏水残基间隔模式。 疏水性氨基酸的位置有助于推断蛋白质中二级结构的定位，

一、糖度计的工作原理 光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象，且入射角正弦之比恒为定值，此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下（同一温度、压力）成正比例，故测定果蔬汁液的折光率，可求出果蔬汁液的浓度（含糖量的多少）。常用仪器是手持式折光仪，也称糖镜、手持式糖度计， 通过测定果蔬可溶性固形物含量（含糖量），可了解果蔬的品质，大约估计果实的成熟度。 手持糖度计一般是圆柱形的。 二、手持糖度折光仪使用说明 （一）、仪器结构 ①、折光棱镜 ②、盖板 ③、校准螺栓 ④、光学系统管路 ⑤、目镜（视度调节环） （二）、使用方法 打开盖板②，用软布仔细擦净检测棱镜①。取待测溶液数滴，置于检测棱镜上，轻轻合上盖板，避免气泡产生，使溶液遍布棱镜表面。将仪器进光板对准光源或明亮处，眼睛通过目镜观察视场，转动目镜调节手轮⑤，使视场的蓝白分界线清晰。分界线的刻度值即为溶液的浓度。 （三）、校正和温度修正 仪器在测量前需要校正零点。取蒸馏水数滴，放在检测棱镜上，拧动零位

微量凯氏定氮仪的安装 1、先选取三个稳固的铁架台，三个铁夹。 2、安装反应管。取一铁架台和一铁夹，将铁夹紧固在铁架台上，松开夹子，将反应管中上部夹紧在铁夹上，其高度和倾斜度应合适。 3、安装冷凝管。另取一铁架台和一铁夹，将铁夹紧固在铁架台上，松开夹子，将冷凝管中部夹紧在铁夹上，使其倾斜度与反应管的导气端弯头平行，小心移动至弯头下端，稍稍松开铁夹后上移冷凝管使其与反应管密封连接好。调节铁架台至合适位置再夹紧铁夹。 4、安装蒸汽发生器。再取一铁架台和一铁夹，将铁夹紧固在铁架台上，松开夹子，将蒸汽发生瓶颈部夹紧在铁夹上。导汽管与反应管的进汽管连接好。 5、将所有的夹子打开。取下样品加入口的磨口塞，从样品加入口加入50mL的蒸馏水，再插回塞好。并给冷凝管接通冷凝水。 6、往蒸汽发生瓶加入蒸馏水至其体积的三分之二处，加入几粒沸石和4滴甲基橙，再加入3mL浓硫酸，然后置于电炉上加热使水沸腾。 7、产生蒸汽后，夹上夹子1，让蒸汽经导管进入反应管外套，待废液排放口排出蒸汽后，夹上夹子3，使蒸汽进入反应管，蒸馏洗涤10分钟。打开夹子1，同时夹上夹子2，

摘要： DNA 甲基化是表观遗传学(Epigenetics)的重要组成部分，在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要作用，是目前新的研究热点之一。随着对甲基化研究的不断深入，各种各样甲基化检测方法被开发出来以满足不同类型研究的要求。这些方法概括起来可分为三类：整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。本篇将主要介绍目前存在的大部分DNA 甲基化研究方法，并对其相关特性进行了简要分析与总结。关键词 ：表观遗传学；DNA 甲基化；甲基化研究方法早在1942年,C.H.Waddington首次提出表观遗传学(epigenetics)的概念,并指出表观遗传与遗传是相对的,它主要研究基因型和表型的关系。几十年后,霍利迪(R.Holiday)针对表观遗传学提出了更新的系统性论断，也就是人们现在比较统一的认识[1]，即在不改变基因组序列的前提下，通过DNA 和组蛋白的修饰来调控基因表达，这种修饰以DNA 甲基化最为常见。继人类基因组计划结束后，2003年人类表观基因组协会(Human Epigenome Consortium,HEC)宣布开始投资和实

制冷器的安装方法一般有三种：焊接、粘合、螺栓压缩固定。在生产上具体用那一种方法安装，要根据产品的要求来定，总的来说对于这三种的安装时，首先都要用无水酒精棉，将制冷器件的两端面擦洗干净，储冷板和散热板的安装表面应加工，表面平面度不大于0.03mm，并清洗干净，以下就是三种安装的操作过程。1、焊接焊接的安装方法要求制冷器件外表面必须是金属化，储冷板和散热板也必须能够上焊料（如：铜材的储冷板或散热板）安装时先将储冷板、散热板、制冷器进行加温（温度和焊料的熔点差不多），在各安装表面都熔上约70℃～110℃之间的低温焊料0.1mm。然后将制冷器件的热面和散热板的安装面，制冷器件的冷面和储冷板的安装面平行接触并且旋转挤压，确保工作面的接触良好后冷却，该安装方法较复杂，不易维修，一般应用在较特殊的场合。2、粘合粘合的安装方法是用一种具有导热性能较好的粘合剂，均匀的涂在制冷器件、储冷板、散热板的安装面上。粘合剂的厚度在0.03mm，将制冷器的冷热面和储冷板、散热板的安装面平行的挤压，并且轻轻的来回旋转确保各接触面的良好接触，通风放置24小时自然固化。该安装方法一般应用在想永久的把制冷器固定在散热板或储

一 质壁分离原理 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。 反之，外界溶液浓度大于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。 二 实验材料 紫色洋葱的鳞片叶、质量浓度为30%、50%的蔗糖溶液、蒸馏水，5%的硝酸钾、碳酸氨溶液，2.5%、10%的氯化钠溶液。 三 实验用具 刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜. 四 实验步骤 1.制作临时装片 (选材、取表皮、制片) 2.观察（先低倍镜观察然后高倍镜观察） 3.引流法加入30％的糖液（重复数次） 4.静置、观察 5.引流法加入清水（重复数次） 6.静置、观察 7.同样的步骤用50%蔗糖、蒸馏水、5%的硝酸钾、碳酸氨溶液,2.5%