相关专题 酵母细胞的培养专题 毕赤酵母表达的培养基配制 2.1 LB(Luria-Bertani)培养基: Trypton l% Yeast Extract 0.5% NaCl l% PH 7.0 制作平板时加入 2%琼脂 粉。121℃高压灭菌 20min。可于室温保存。用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。 2.2 LLB(Low Salt LB)培养基: Trypton l% Yeast Extract 0.5% NaCl 0.5% PH 7.0 制作平板时加入 2%琼脂 粉。121℃高压灭菌 20min。可于室温保存数月。用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时,加入Zeocin 25ug / ml,可以4℃条件下保存1~2周。 2.3 YPD (又称YEPD) Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,(Yeast Extract Pep
相关专题 细胞培养基的配制 细胞培养专题 31营养琼脂 成分: 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000mL 制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。 注:此培养基可供一般细菌 培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。 32营养肉汤 成分: 蛋白陈 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL pH7.4 制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min。 33 乳糖胆盐发酵管 成分: 蛋白胨 20g 猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g 乳糖 10g 0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL 蒸馏
细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。(2) 疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3) 基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。(4) 细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。(5) 单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。基础研究(1) 药物作用机理(2) 基因功能(3) 疾病发生机理2、 生物制药(1) 疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。(2) 基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等(3) 诊断用和药用单克隆抗体生产(4) 细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽
一、双抗夹心法拟和曲线打开EXCEL软件;在工作表中输入第一行: 浓度值, 如0 10 50 100 400输入第二行:该浓度下的调整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。得到公式和R平方值。也可以用上面说的方法,在公司已经提供的图表上, 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和新的曲线。二、计算浓度举例第一次实验:标准曲线为:y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1R2 = 0.9745 为例,已知OD值,计算浓度。由于y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1,所以可以得到:4E-05x2 -0.026x +(y-0.1)=0ax2 +bx +C=0a=4E-05;b= -0
1、 分子生物学:是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。 2、 医学分子生物学:是分子生物学的一个重要分支,又是一门新兴交叉学科。它是从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律,从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。 3、酶工程:过去主要是通过生物化学方法从各种材料中提取、制备酶制剂。现在主要应用基因工程技术制取酶制剂。 4、蛋白质工程:过去主要是采用化学方法对纯化的蛋白质进行结构改造,制备出有特定功能的蛋白质。现在主要应用基因工程技术,从改造目的基因的结构入手,在受体细胞中表达不同结构的蛋白质。 5、微生物工程:又称发酵工程是利用微生物特定性状,使微生物产生有用物质或直接用于工业化生产的技术。 6、DNA的甲基化:DNA的一级结构中,有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰,称为DNA的甲基化。 7、 CG岛:在整个基因组中存在一些成簇、稳定的非甲基化CG,这类CG称为CG岛。 8 、信使RNA:从DNA分子转录的RNA分子中,有一类可作为蛋白质生物合成的模板,称为信使RNA。
基本原理 淋巴细胞受特异性抗原或有丝分裂原刺激后,在转化为淋巴母细胞的过程中,DNA的合成明显增加。且其转化程度与DNA的合成呈正相关,此时若将合成DNA的前体物质胸腺嘧啶核苷用放射性同位素(3 H -TdR)标记,加入到培养体系中,即被转化的淋巴细胞摄取而掺入DNA分子内。培养终止后,测定淋巴细胞内掺入的3 H -TdR的放射量,就能判断淋巴细胞的转化程度。此方法较客观、精确。 试剂及材料 1. 丝裂原:PHA、Con A、PWM或其他丝裂原。 2. 3 H -TdR(100μCi/ml) 3. 5%三氯醋酸、无水乙醇 4. 闪烁液:PPO 4g,POPOP 0.4g溶于1000ml二甲苯中。 5. 玻璃纤维滤膜及负压抽滤装置及β-计数仪; 操作方法 1. 刺激增殖反应: ①常规分离PBMC,用含20%NCS的RPMI-1640完全培养液调整细胞浓度至2.0×106 /ml; ②于96孔细胞培养板各孔中加入含20%NCS
(一)清洗 由于物品清洁与否影响灭菌效果,除污物和液体外,对于实验室使用的物品应该尽量先清洗干净后灭菌,物品洗涤后,应干燥并及时包装: (二)包装 1.包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透人。市售普通铝饭盒与搪瓷盒,不得用于装放待灭菌的物品,应用自动启闭式或带通气孔的器具装放; 2.常用的包装材料包括全棉布、一次性无纺布、一次性复合材料(如纸塑包装)、带孔的金属或玻璃容器等。新包装材料在使用前,应先用生物指示物验证灭菌效果后方可使用。包装材料使用前应仔细检查有无残缺破损; 3.布包装层数不少于两层。用下排气式压力蒸汽灭菌器的物品包,体积不得超过30cm~30cm~25cm;用于预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器的物品包,体积不得超过30cm~30cmX 50cm。金属包的重量不宜超过~,敷料包不超过5kg;对于不符合上述要求的应该延长灭菌时间,并做好监测; 4.新棉布应洗涤去浆后再使用;反复使用的包装材料和容器,应经清洗后才可再次使用,否则因影响透气性而影响灭菌效果; 5.盘、盆、碗等器皿类物品,尽量单个包装;包装时应将盖打开;若必须多个包装在一起时,
PCR扩增反应完成之后,必须通过严格的鉴定,才能确定是否真正得到了准确可靠的预期特定扩增产物。凝胶电泳是检测PCR产物常用和最简便的方法,能判断产物的大小,有助于产物的鉴定。凝胶电泳常用的有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳,前者主要用于DNA片段大于100bp者,后者主要用来检测小片段DNA。1.琼脂糖凝胶电泳 这是实验室最常用的方法,简便易行,只需少量DNA即可进行实验。其原理是不同大小的DNA分子通过琼脂糖凝胶时,由于泳动速度不同而被分离,经溴化乙锭(EB)染色,在紫外光照射下DNA分子发出荧光而判定其分子的大小。 用于电泳检测PCR产物的琼脂糖浓度常为1%—2%,应该使用纯度高的电泳纯级琼脂糖,这种琼脂糖已除去了荧光抑制剂及核酸酶等杂质。(1)制胶 琼脂糖凝胶厚度约为3~5mm。过薄则加样孔样品会溢出来,过厚观察时荧光穿透不强以至有些小片段DNA带型不易分辨。如配制2%凝胶100ml,称取琼脂糖2g于三角瓶中,加入100ml 0.5×TBE液,微波炉加热2-5min,使琼脂糖完全溶解(注意不要暴沸),置室温等温度下降至60℃时,加入终浓度0.5μg/ml的EB液,充分混匀后倒板
【原理】研磨叶片得到的匀浆,经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱,分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中,0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降,因此,分离工作尽可能在短时间内完成。【仪器与用具】冰箱;离心机;扭力天平;显微镜;pH计;研钵;量筒;移液管;离心管;脱脂纱布等。分离器皿都须在0℃下预冷。【试剂】①分离介质含0.33mol/L 山梨醇,50mmol/L Tris-HCl(或Tricine) pH7.6,5mmol/L MgCl2,10mmol/L NaCl,2mmol/L EDTA,2mmol/L 异抗坏血酸钠。配法:称60g山梨醇、6.06g Tris、1g MgCl2·6H2O、0.6g NaCl、0.77g EDTA-Na2、0.4g异抗坏血酸钠,溶解后用1mol/L HCl调pH至7.6,定容至1000ml。②悬浮和测定介质Ⅰ0.66mol/L 山梨醇,2mmol/L MgCl2, 2mmol/L MnCl2,4mmol/L EDTA,10mmol/L焦磷酸钠,100mmol/L Tris-HCl pH7.6。配法:称60g山梨醇、0.2g M
PAGE胶上蛋白质的银染方法有数百种,其原理相似,具体步骤各不相同。银染为蛋白质的非特异性染色,呈“爆炸性”反应模式,用于蛋白定量时准确性差,但其敏感度高、简便易行,仍被广泛应用。下面列举的这三种方法为常用的双向电泳凝胶染色法,可与质谱兼容。其中方法1敏感性最高,方法3背景最低、对比度好。 1. Blam silver staining protocol (Modified) 程序 溶液 时间 固定 40%ETOH 10%HAC 1小时 漂洗 30%ETOH 2×20min 致敏 0.02%Na2S2O3 1min 漂洗 H2O 3×20Secs 染色 0.1%AgO3(预冷) 4℃,20mins
(一)养荷兰猪应该有一套科学的防疫程序,做到预防为主,综合防治:1、搞好卫生,严格消毒相信大家对勤换垫材(木屑)、及时清理粪便这些工作都做得不错吧,但看不见的病原微生物才是荷兰猪真正的大敌!所以,家里除了准备必要的兽药的同时,消毒药物更是不可或缺的,从药店可以买到“高锰酸钾”或“新洁尔灭”按说明书稀释成需要浓度,每周至少消毒两次,这两种药物应该交替使用,各使用一段时间,这样可以降低有害菌的抗药性。2、保持环境安静养荷兰猪的屋子要尽量安静,尽量不要让来你家做客的小朋友参观,这样即可以减少外来细菌的侵害,又可以给猪猪营造出一个安静、舒适的环境。3、保证饲料清洁卫生饲料必须新鲜,且多样化;喷洒过农药,受化肥污染和发霉腐败的食物坚决不能饲喂;每天要清理出剩余食物残渣。4、经常细心检查养荷兰猪的新人最好多到荷兰猪吧里看看帖子,或者从网上、书籍上多多学习一些关于养猪的知识,这样就可以对日常出现的粪便不正常、食欲不振、精神状态不佳等异常情况能够科学地处理和治疗。当发生疾病时,应该做到立即隔离,精心护理;对于病死的荷兰猪要做到与生石灰混合后深埋等无害化处理;对遭到污染的饲养箱和食具要及时彻底消毒,防止
甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家有所帮助。 第一部分 基因组DNA的提取。 这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的。 此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。 使用两者的细节: 1:蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20mg/ml; 2:RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶,即在购买市售RNA酶后进行再处理,配制成10mg/ml。否则可能的后果是不仅没有RNA,连DNA也被消化了。两者均于-20度保存。 验证提取DNA的纯度的方法有二: 1:紫外分光光度计计算OD比值; 2:1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。 我倾向于第二种方法,这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度,并根据Marker的上样量估计其浓度,以用于下一步的修饰。 第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA 如不特别指出,所用双蒸
一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。二、MTT检测法MTT检测法主要反映细胞的能量代谢,是检测细胞增殖活力的一种简便准确的方法,其原理是在活细胞生长和增殖过程中,线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成兰紫色的甲(Formazan),生成的甲量的多少与细胞的数量和细胞的活力成正比三、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)检测法羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐基团,使C E成为一种良好的细胞标记物。CFSE进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时,CFsE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。这样,在一个增殖的细胞群中,各连续代细胞的荧光强度呈对递减,利用流式细胞仪在488nm激
1. Oligo DNA是以OD260单位来计算的,这是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中,260nm波长下吸光度为1A260的Oligo溶液定义为1 OD260单位,根据此定义,1 OD260单位相当于33μg的Oligo DNA,您可以根据此数据和您的Oligo DNA分子量,计算得到摩尔数以计算不同摩尔浓度的溶液。2. 引物序列的分子量计算公式如下:MW=(A碱基数×312)+(C碱基数×288)+(G碱基数×328)+(T碱基数×303)-61例如:引物TGGGCGGCGGTTGGTGTTACG A=1 C=3 G=11 T=6MW=(1×312)+(3×328)+(6×303)-61=65413. Oligo DNA的分子量也可以用以下近似方法计算:Oligo DNA中的每个脱氧核苷酸碱基的平均分子量近似为324.5,则一条Oligo DNA的分子量=碱基数×324.5。例:您得到一管标为5 OD260的20 mer Oligo DNA分子量=20×324.5=6490质量数=5×33=165μg摩尔数=165/6490=0.025μmol=25nmol若加灭菌双
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。二、PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。三、PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。四、实验室中克隆质粒的污染:
实验目的 将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒萃取以除去蛋白质及其它成分,就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的步骤,DNA和RNA不溶于有机溶媒中,而溶于水层。另外,分子选殖(molecular cloning)常利用洋菜胶(agarose)来分离不同大小的DNA片段或用以纯化DNA。核酸定量可利用核酸会吸收260及280 nm波长的UV光,而且可与荧光染剂ethidium bromide (EtBr)键结,这些物理特性即一般定量DNA的的基本原理。此外亦可藉由UV光的吸收来评估DNA的纯度,若纯化DNA的量足够时,可用光谱分析法定量,当DNA量少或不纯时,才用EtBr键结方法。(注意:EtBr为致癌剂,操作时务必带手套,并禁止戴手套的手到处乱摸!)溶媒萃取法 1.仪器用具:(1).桌上型离心机(2).37℃恒温箱(3).排烟柜2.药品及试剂:(1).phenol/chloroform = 1:1(2).chloroform/isoamylalcohol = 24:1(3).RNase A:1m
乙醚:CH3CH2OCH2CH3(一)理化性状和用途透明、无色、易挥发有芳香刺激性气味的液体。沸点:34.6℃;蒸气密度:2.56;闪点;-45℃;自燃点;180℃。爆炸极限:1.9~36%。用作溶剂、麻醉剂、试剂、萃取剂。(二)毒性本品对人体有麻醉性能。当吸入含量为3.5%时,30~40分钟就可失去知觉。(三)短期暴露的影响当浓度达7~10%时,能引起呼吸系统和循环系统的麻痹,最后致死。(四)长期暴露的影响人体过量吸入,会引起严重的急性中毒。呼气中带醚味,并出现呕吐、流涎、出汗、喷嚏、咳嗽、头痛、记忆力减退、无力、兴奋,常并发肾炎、支气管炎、肺炎。(五)火灾与爆炸本品易燃。与强氧化剂反应能起火爆炸。在空气中与氧长期接触或受光照会生成不稳定的过氧化物,受热能自行着火爆炸。着火时,可用干粉、泡沫、二氧化碳、沙土灭火。用水灭火无效,但可用水保持火场容器冷却。(六)化学反应性微溶于水,易溶于盐酸,能与醇、醚、石油醚、苯、氯仿等有机溶剂混溶。(七)人身防护吸入:蒸气或烟雾浓度不明或存在可检测出浓度时,应佩戴有褐色色标的滤毒盒(罐)的防毒面具。皮肤:如果需要应使用手套、工作服、工作鞋,工作场所应
在动物实验过程中,应根据不同的实验目的、动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种,不同方法按给药途径又分为很多具体类型。注射法分为:皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为:鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。(一)皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧,豚鼠在后大腿的内侧或小腹部;大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。(二)皮内注射皮内注射时需将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧,在两指之间,用结核菌素注射器连4(1/2)细针头,紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。(三)腹腔注射用大、小白鼠做实验时,以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头于左(或右)下腹部刺入皮下,使针头向前推0.5~1.0cm,再
一、不同实验动物采血方法的选择决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血pH值以及K+、Na+、Cl-离子浓度,必须采取动脉血液。(一)、大、小鼠的采血方法1、颈静脉或颈动脉采血2、股静脉或股动脉采血3、心脏采血4、尾部采血5、眼眶采血6、断头取血(二)、豚鼠的采血方法1、耳缘剪口采血2、心脏采血方法同大、小鼠、家兔基本相同。取血量可根据需要,采集部分血5~7ml,采集全部血15~20ml。3、股动脉采血方法同大、小鼠。4、后肢背中足静脉采血助手固定动物,将后肢膝关节拉直。术者可从动物脚背面找到背中足静脉,常规消毒后,左手拉住豚鼠趾端,右手持注射器穿刺,抽血后立即用纱布或棉球压迫止血。反复取血可两后肢交替使用。(三)、家兔的采血方法1、耳缘静脉取血法选好耳缘静脉,拔去被毛,用二甲苯或酒精涂
1.用途酒精喷灯是实验中常用的热源。主要用于需加强热的实验、玻璃加工等。酒精喷灯按形状可分为座式喷灯和挂式喷灯两种。初中常用的是座式喷灯。下面介绍座式酒精喷灯的原理、结构、使用及维修。2.工作原理喷灯的火力,主要靠酒精与空气、蒸气混合后燃烧而获得高温火焰。3.结构座式酒精喷灯的外形结构如图所示,它主要由酒精入口、预热碗、预热管、燃烧管、调节杆、调整管等组成。预热管与燃烧管焊在一起,中间有一细管相通,使蒸发的酒精蒸气从喷嘴喷出,在燃烧管燃烧。通过调节调整管,控制火焰的大小。4.使用方法(1)旋开旋塞向灯壶内注入酒精,至灯壶总容量的2/5~2/3之间,不得注满,也不能过少。过满易发生危险,过少则灯芯线会被烧焦,影响燃烧效果。拧紧旋塞,不使漏气。新灯或长时间未使用的喷灯,点燃前需将灯体倒转2~3次,使灯芯浸透酒精。(2)将喷灯放在石棉板或大的石棉网上(防止预热时喷出的酒精着火),往预热盘中注入酒精并将其点燃。等汽化管内酒精受热汽化并从喷口喷出时,预热盘内燃着的火焰就会将喷出的酒精蒸气点燃。有时也需用火柴点燃。(3)移动空气调节器,使火焰按需求稳定。(4)停止使用时,可用石棉网覆盖燃烧口,同时