网络 四、膜辅蛋白（CD46） 膜辅蛋白（membrane cofactor protein,MCP）由Cole等（1985）应用C3b亲和层析在外周血淋巴细胞上发现的一种膜蛋白。由于其奇特的电泳特征，起初被命名为gp45-70，但进一步研究发现，它对I因子介导的对C3b和C4b的裂解有辅助活性，故更命为MCP。鉴于MCP的多克隆抗体与促衷变因子（DAF）、H因子或CR1均不起反应，从而认为它是补体系统的一种新的调节蛋白，在第四届国际白细胞分型讨论会上将其命名为CD46。 MCP为一单链穿膜糖蛋白，分子量45-70kDa，属于RCA基因簇的成员。也通过GPI锚固定于细胞上。MCP的细胞分布甚广，包括粒细胞、血小板、T细胞（Th、Ts、Tc）、B细胞、NK细胞、造血细胞系、成纤维细胞、表皮细胞、内皮细胞及星状胶质细胞等。但不同类型的细胞上表达的数量有所不同。外周血单个核细胞和粒细胞为1万个/细胞，造血细胞系为2-5万个/细胞，Hela和Hep

网络 五、条件反射对免疫功能的影响 （一）免疫性条件反射的研究概观 　　俄国学者的早期研究工作已发现可针对免疫应答建立起经典式条件反射。至70年代，采用以免疫抑 制药 物环磷酰胺为非条件性刺激（unconditioned stimulus, US），以饲饮糖精水的味觉刺激作为条件刺激（conditioned stimulus, CS)，同时给大鼠上述两种刺激，经过一段时间后（3日），再单独给予CS，可引起明显的免疫抑制，表明为T细胞依赖性抗体（抗SRBC）合成减少，而对照组均无此反应，说明已建立起能改变免疫应答的行为式条件反射。以后的研究表明，同样可建立起对细胞免疫的条件反射，并可用以延长患 自身免疫 性疾病（红班狼疮）小鼠的寿命。另外，条件反射也可导致免疫增强效应，如提高NK细胞活性等。表10-4归纳了行为式条件反射引起的免疫应答改变。 表10-4　行为式条件反射引起的免

王霄霞老师简介：温州医科大学血检教研室主任，从事血细胞形态学教学及临床二十多年。主编有《外周血细胞形态学检查技术（配光盘）》等专业书籍。王霄霞老师微博是迄今为止第一个纯专业的血细胞形态学微博，从2011年11月开博以来，王老师坚持每周更新，目前粉丝13000余人。微博地址：http://weibo.com/u/2513549170 ，欢迎大家关注！ 建议：自己先看图识别，再对照答案！（如对答案有不同见解，请在王老师微博留言。） 彩图1答案：淋巴细胞（左），异型淋巴细胞（右）。左边细胞胞质呈淡蓝色（略带灰）而没有中性颗粒，胞体也不大。右边细胞的胞体大、胞质较深蓝且较多、染色质较粗，这些都是异淋的特点。而早幼红细胞胞核圆形、染色质较细，核常居中，血片出现早幼红细胞的概率远远低于异淋。 彩图2答案： 从左到右，分别是中性分叶核粒细胞、单核细胞及中性杆状核粒细胞（伴巨幼样变）。有时单核细胞的胞核也可呈杆状，但其胞质中不含中性颗粒（根据这点往往就能与中性粒细胞区别开来），且胞核染色质较疏松。 彩图3答

股骨颈骨折复位内固定术（三翼钉内固定术） 股骨颈骨折除老年人头下骨折，股骨颈粉碎骨折或pauwel角＞80°者倾向于人工股骨头置换外，其余均应及早复位内固定。近年来内固定方法发展多有用螺纹钉、加压螺钉，滑动式鹅颈钉等内固定[图1]。但三翼钉内固定仍为基本手术，掌握后可举一反三，本文将作详细描述。 ⑴股骨颈骨折分型 ⑵螺纹针内固定 ⑶加压螺钉 ⑷滑动式鹅颈钉 图1　股骨颈骨折分型与内固定 a 屈髋屈膝牵引 b 牵引下外展、内旋、伸直 c掌跟试验 ⑴手法复位 ⑵手法复位后的体位维持 ⑶止血钳定位法 ⑷铁丝网板定位法 ⑸剪开股外侧肌后缘 ⑹切开骨膜，骨膜下显露股骨 ⑺凿孔 ⑻插入导针 ⑼正确的导针位置 ⑽按三翼钉的翼凿骨开槽，用钉入器钉入三翼钉 ⑾捶击嵌插器，使骨折面密切接合 ⑿三翼钉内固定的正确位置 图2　右股骨颈骨折手法复位三翼钉内固定术 ⑴直视下插入导针 ⑵解剖复位后，循导针钉入三翼钉 图3　右股骨颈骨折切开复位三翼钉内固定术 图4　横板鞋维持伤肢位置 ⑴拔钉器（上图示拔钉器螺旋突起和三翼钉尾螺孔） ⑵顺时针旋转拧出器，逐

【实验目的】 １．了解微音器电位的引导方法。 ２．观察微音器效应。 【实验原理】 当声波作用于耳蜗时，在耳蜗及其附近部位可记录到一种与刺激声波的波形、频率相一致的电位变化。若把这一电位变化经过放大输入到扩音器上就可复制出刺激的声音，将电位变化引入示波器后可观察到这种电位的波形。耳蜗的作用就像一个小的微音器，所以将这种电位称为耳蜗微音器电位。微音器电位实际是耳蜗内的毛细胞将声波刺激的机械能转换为听神经冲动过程中所产生的感受器电位，这种效应又称耳蜗微音器效应。 【实验对象】 耳廓反应阳性的年幼豚鼠。 【实验器材与药品】 小动物手术器械一套、牙科钻、银球引导电极、参考电极（可用针灸针代替）、前置放大器、示波器和监听器、屏蔽罩、万能支架、20％的氨基甲酸乙酯。 【实验方法和步骤】 1． 仪器 连接（图21-1） 将引导电极、参考电极连接到前置放大器的输入端。前置放大器的输出端与示波器相连，示波器输出接监听器，将连接好的监听器置

实验28 真核生物钙调素的酶联免疫测定法 原理 　　本法是一种测定抗体的竞争性固相酶联免疫测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。先将抗原──CaM与固相载体（聚苯乙烯微量滴定板）结合，然后将经待检CaM（标准样品或检样）部分中和的兔抗CaM抗体加入微量滴定板孔中，抑制固相CaM和抗体的反应。接着，废弃上清液，洗涤固相表面，加入辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(PPA)与结合在固相CaM上的抗体反应。最后除去多余的未反应的PPA，测定固相结合物的酶活性。酶活性和待检CaM含量呈负函数关系，即固相CaM结合的抗体与PPA量的吸光度值（或B%）随待检CaM含量增加而减小。以一系列已知浓度的CaM对吸光度作图，获得标准竞争抑制曲线。对于未知样品，只要在同样条件下测定反应后的吸光度值，就可以从标准曲线上查得CaM量。测定过程如图5所示。 　　CaM ELISA药盒适用于所有真核生物钙调素(calmodulin,CaM)含量的定量分析，具有灵敏、专一、微

网络 第二节　腹膜和腹膜腔 一、腹膜的结构和功能概述 腹膜peritoneum属于浆膜，由对向腹膜腔表面的间皮及其下面的结缔组织构成，覆盖于腹、盆腔壁的内面和脏器的外表，薄而透明，光滑且有光泽。依其覆盖的部位不同可分为壁腹膜parietalperitoneum或腹膜层和脏腹膜visceral peritoneum或腹膜脏层。前者被覆于腹壁、盆壁和膈下面；后者包被脏器，构成脏器的浆膜。两者互相延续构成腹膜囊。男性腹膜囊是完全封闭的，女性由于输卵管腹腔口开口于腹膜囊，因而可经输卵管、子宫和阴道腔而与外界相通。腹膜脏层与脏层，脏层与壁层之间的不规则腔隙，叫做腹膜腔peritonealcavity。腹膜腔内含少量浆液，有润滑和减少脏器运动时相互摩擦的作用。（图8-10）。 腹膜除对脏器有支持固定的作用外，还具有分泌和吸收功能。正常情况下腹膜可分泌少量浆液，以润滑脏器表面，减少它们运动时的摩擦。由于腹膜具有广阔的表面积，所以有较强的吸收能力。

实验52 植物组织中可溶性糖含量的测定（蒽酮比色法） 原理 　　植物在个体发育的各个时期，代谢活动也发生相应的变化，碳水化合物的代谢也不例外，其含量也随之发生变化。了解可溶性糖含量的变化，在生理上和实践上都有重要的意义。这里介绍的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物，颜色的深浅与糖含量有关。方法简便，但没有志一性，对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应，产生颜色。 仪器药品 　　721型分光光度计 　　　　 　分析天平 　　研钵 　　　　　　　　　　　恒温水浴锅 　　烧杯 　　　　　　　　　　　容量瓶 　　三角烧瓶 　　　　　　　　　大试管 　　移液管 　　　　　　　　　　漏斗 　　乙醚 　　　　　　　　　　　草酸钠 　　饱和醋酸铅 　　葡萄糖标准溶液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg，配制成500ml溶液，即得每ml含糖为200μg的标准溶液。 　　蒽酮试剂：称取1

网络 第九章　肿瘤与遗传 　　在人们生活的环境中存着不少物理的、化学的和生物的致癌因子，它们在一定条件下可以诱发肿瘤。例如，各种电离辐射和紫外线照射可以引起 白血病 和皮肤癌；多环芳烃化合物如3，4－苯并芘可以引起肺癌，黄曲霉素可以诱发肝癌；亚硝受可以引起各种消化道肿瘤；在生物因子中，已经证明某些病毒可以引起动物肿瘤，并与一些人类肿瘤如鼻咽癌、白血病密切有关。这些因子是通过引起基因异常而致瘤的。 但是尽管人们都接触各种致癌因子，却远非人人都发生肿瘤，这表明还存在个体的易感性，而易感性在很大程度是遗传物质的结构或功能才能使正常细胞转变为癌细胞，但对不同肿瘤，环境因素只有改变遗传因素作用的大小各异。 近年来肿瘤的分子遗传学研究表明，一些与细胞的生长和分化有关的基因在癌变过程中起关键作用，这些基因称为癌基因和肿瘤抑制基因，它们的结构或功能异常使细胞得以无控制生长，并最终导致肿瘤发生。 因此，

实验57 脊髓背根和腹根的机能 　　【目的要求】 　　1．学习暴露脊髓和分离脊神经背、腹根的方法。 　　2．了解背根和腹根的不同机能。 　　【基本原理】 　　脊神经的背根是由传入神经纤维组成，具有传入机能；腹根由传出神经纤维组成，具有传出机能。若切断背根，则相应部位的刺激不能传入中枢；若切断腹根，不能传出冲动，则其所支配的效应器也不再发生反应。 　　【动物与器材】 　　蟾蜍或蛙、常用手术器械、弯头金冠剪、刺激器或多用仪、小型弯头露丝电极、蛙板、蛙腿夹、滴管、棉花、红色和白色细丝线、任氏液。 　　【方法与步骤】 　　1．将蟾蜍或蛙毁脑后腹位固定于蛙板上。沿背部中线剪开皮肤，向前开口至耳后腺水平，向后开口至尾杆骨中段。用剪刀小心剪去脊椎两侧的纵行肌肉及椎间肌肉，暴露椎骨。 　　2．用金冠剪横向剪断环椎，然后将弯头金冠剪小心伸入椎管，自前至后逐节剪断两侧椎弓（图9-3），移去骨片，暴露全部脊髓（勿损伤脊髓）。 　　3．用眼科镊轻轻挑开脊髓表面的银灰色

实验四十一 糖发酵试验 　　一、目的要求 　　了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 　　二、基本原理 　　糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。 　　酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[pH5．2（黄色）-6．8（紫色）]，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明，如图Ⅹ-4。 　　三、器材 　　大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支；盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小管），试管架，接种环等。

实验五十 动物病毒的鸡胚培养法 　　一、目的要求 　　1．了解动物病毒鸡胚培养的意义及用途。 　　2．初步掌握病毒鸡胚培养的基本方法。 　　二、基本原理 　　鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的一种培养方法，此方法可用以进行多种病毒的分离、培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制备等。 　　鸡胚培养的技术比组织培养容易成功，也比接种动物的动物来源容易，无饲养管理及隔离等的特殊要求，且鸡胚一般无病毒隐性感染，同时它的敏感范围很广，多种病毒均能适应，因此，是常用的一种培养动物病毒的方法。 　　各种病毒接种鸡胚均有其最适宜的途径，故应注意选择，见表Ⅻ-1。本实验用牛痘病毒（vaccinia virus）和鸡新城疫病毒（Newcastle-disease virus）接种鸡胚。牛痘病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长，经培养后，产生肉眼可见的白色痘疱样病变，似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。

网络 第三节　蝇 蝇属双翅目环裂亚目（Cyclorrhapha），全世界已知10000多种，我国记录有1500多种。与人类疾病有关者多属蝇科（Muscidae）、丽蝇科（Calliphoridae）、麻蝇科（Sarcophagidae）及狂蝇科（Oestridae）。 形态 成蝇体长一般5～10mm，呈暗灰、黑、黄褐、暗褐等色，许多科类带有金属光泽，全身被有鬃毛（图20－13）。 图20－13 蝇生活史 1．头部　近似半球形。复眼大，两眼间距离多以雄蝇较窄，雌蝇较宽。头顶有3个排成三角形的单眼。颜面中央有1对触角，分3节，第3节最长，其基部外侧有1根触角芒。大部分蝇类的口器为舐吸式，由基喙、中喙和1对唇瓣组成，基喙上有1对触须。口器可伸缩折迭，以唇瓣直接舐吸食物，唇瓣腹面有对称排列的假气管，食物由此流入两唇瓣间的口腔（图20－14）。吸血蝇类的口器为刺吸式，能刺入人、畜皮肤吸血。

网络 第三节　比色分析应用示例――铁的含量测定 一、原理 应用比色分析测定溶液中伯的含量有硫氰酸盐显色法、磺基水杨酸法及邻菲罗啉显色法等各各种方法。现以磺基水杨酸法为例介绍铁的含量测定。 在不同酸度下，Fe3+和磺基水杨酸生成组成不同的配合物。若控制溶液PH值在8-11.5的条件下显色，可生成配位数为6的黄色三磺基水杨酸合铁配合物。反应式如： 上式可简写为 溶液的最大吸收波长λmax=420nm，因此可在420nm 处进行测定（若用光电比色计测定可选择蓝色光片）。此方法适合于测定无大量Cu2+、Ca2+、Cr3+、Ni2+等离子存在的溶液中铁离子的含量。 二、操作步骤 （一）标准曲线的绘制 称取一定量硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2・12H2O]用蒸馏水溶解，加适量配制成含 Fe3+0.1lg・L-1的标准溶液，再稀释成含Fe3+

网络 第二章　染色体病 第一节　人体染色体 一 人体染色体数目、结构和形态 人类体细胞具有46条染色体，其中44条（22对）为常染色体，另两条与性别分化有关，为性染色体。性染色体在女性为XX，在男性为XY。生殖细胞中卵细胞和精子各有23条染色体，分别为22＋X和22＋Y。 染色体在细胞周期中经历着凝缩（condensation）和舒展的周期性变化。在细胞分裂中期，染色体达到凝缩的高峰，轮廓结构清楚，因而最有利于观察（图2－1）。 每一中期染色体都由两条染色单体构成，它们各含一条DNA双螺旋链。两条单体仅在着丝粒外互相连接，该处为染色体的缩窄处，故又称为主缢痕。着丝粒是纺锤丝附着之点，在细胞分裂中染色体的运动密切相关，失去着丝粒的染色体片段通常不能在分裂后期向两极移动而丢失，着比粒又将染色体横向地分为两个臂。图2－1为中期染色体的模式图。 根据着丝粒的位置，人类染色体可以分为三种：①近中着丝粒染色体，着丝粒位于

实验二十七 大肠杆菌生长曲线测定 　　一、目的要求 　　了解大肠杆菌生长曲线的基本特征，从而认识微生物在一定条件下生长、繁殖的规律。 　　二、基本原理 　　一定量的微生物，接种在适合的新鲜液体培养基中，在适宜的温度下培养，以菌数的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，做出的曲线叫生长曲线。一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。 　　测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测得的光密度值（OD值）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计（图Ⅶ-10），只要接种一支试管，定期用它测定，便可做出该菌的生长曲线。 　　三、器材 　　

网络 第三节　人类 基因组 计划 　　基因定位取得了巨大成就，新的分子生物学技术不断发展与完善，使许多学者认为已到了对人类基因组全部30亿bp，5－10万个基因进行整体制图和测序的时候，以达到人类基因组完善而系统认识的目的。1985年美国学者提出了人类基因组项目（human genome project），引起学术界巨大反响和热烈争论，经两次 会议 研究后，1988年美国国会批准，由国立卫生院（NIH）和能源署（DOE）负责执行，此后成立了国际性组织��HUGO（human genome organization），组织了国际性的合作研究。这是一项耗资数十亿美元，全球性的大科学项目，预计2005年可完成基因组顺序分析，这将对生命科学的发展作出巨大的理论和实用价值的贡献。 1990年美国又建立了国家研究中心和国内若干大的中心。1992年法国研究组构建了1－1Mb

　　为研究免疫细胞的功能，常需高纯度的淋巴细胞或其亚群，分离方法介绍如下。 　　一、纯淋巴细胞群的采集 　　通常利用单核细胞在37℃和Ca 2+ 存在条件下，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，据此建立许多从单个核细胞悬液中去除单核细胞的方法，藉以获得高纯度的淋巴细胞群。 　　（一）粘附贴壁法 　　将已制备的单个核细胞悬液倾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中，移至37℃温箱静置1h左右，单核细胞和粒细胞均贴于平皿壁上，而未贴壁的非粘附细胞几乎为纯淋巴细胞，继用橡皮刮下贴壁的细胞即为纯单核细胞群。因B细胞也有贴壁现象，用本法分离的淋巴细胞群中B细胞有所损失。 　　（二）吸附柱过滤法 　　将单个核细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10的柱层中，凡有粘附能力的细胞绝大部分被吸附而粘滞在柱层中，从柱上洗脱下来的细胞主要是淋巴细胞。此法简单易行，对细胞极少损害。 　　（三）磁铁吸引法 　　利用单核细胞具有吞噬的特性，

取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏，制成脾细胞悬液，与一定量的指示细胞（绵羊细胞）和补体结合，注入自制的小室内，经37℃孵育后，单个散在的抗体形成释放抗体，抗体与周围的绵羊红细胞（抗原）结合，并在补体参与下，使绵羊细胞溶解，结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可见的圆形透明溶血区——溶血空斑。计算溶血空斑数目，则可推算脾内存在的抗体产生细胞总数。 材料： 1. 20—22克健康小鼠 2. 解剖器械 3. 注射器，平皿，漏斗，纱布，研钵 4. 20%绵羊红细胞悬液 5. 洁净脱脂载玻片（75ⅹ25毫米），盖玻片（22ⅹ22毫米）。 6. Ph7.2的Hanks液，凡士林油。 7. 微量加样器 8. 指示细胞悬液，配制方法如下： 10%绵羊红细胞 0.5毫升 补体（新鲜豚鼠血清）0.5毫升 含5%小牛血清的Hanks液 2毫升 混合后水浴备用 方法： 1．免疫动物 取25%绵羊红细胞悬液1毫

网络 五、C5分子 C5是形成膜攻击复合体（MAC）的第1个补体分子。C5由以二硫键相连接的α、β链组成，分子量190 kDa，其中α链为115kDa，β链为75kDa（图5-9）。C5与C3和C4的结构相类似，但没有链内硫酯键。靠近N端的第74-75位精氨酸一亮氨酸键为C5转化酶作用的部位。在C5转化酶的作用下，C5α链N末端裂解出一个分子量为11kDa的小片段C5a进入液相中，其余部分为110kDa的大片段C5b，仍结合在细胞膜表面。亲生的C5b在极短时间内能保持与C6结合的构象，可与C6非共价结合形成一牢固的C5b6复合物，并通过与C3b的可逆性结合而固定的细胞膜上。但C5b生成后其潜在的生物学活性存在时间非常短促，若无C6结合则迅速衰变为C5bi。 C5b只形成MAC参与细胞溶解效应，而C5a却具有广泛的生物学活性。概括起来有以下几方面：（1）过敏毒素作用：C5a是具有过敏毒素作用的补体裂解片段中作用最强的介质，较C3a强20倍，较