重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分，尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中，上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离，充分利用上游对下游的影响，对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签，His标签，GST标签等，不同的亲和标签选择不同的纯化方案；可能是可溶性表达，可能形成包涵体，可溶性的蛋白往往需要复杂的纯化步骤，而包涵体易于分离，纯度较高，但回收具有生物活性的蛋白却变的相当困难，需要对聚集的蛋白进行变复性，通常活性蛋白的得率比较低；是否对宿主细胞具有毒性，从而选择抗毒性的表达系统；怎样选择表达系统，是大肠杆菌表达系统，酵母表达系统还是CHO细胞表达系统，不同的表达系统和培养方法显著影响下游的处理过程，目标蛋白表达的定位（胞内、细胞内膜、周质空间和胞外），蛋白表达的量都依赖于所选择的表达系统；蛋白的化学性质，是否容易被蛋白酶降解，是否会和一些金属离子，化学成分发生反应；蛋白的物理性质，是否对温度敏感等。从蛋白基因的获取，蛋白基因的克隆，蛋白的表达，做好一个整体的规划，将对纯化工作的方便快捷高效带来关键的影响。基因工程构建的纯化标记有

原子物理学研究原子的性质、内部结构、内部受激状态，以及原子和电磁场、电磁波的相互作用以及原子之间的相互作用。原子是一个很古老的概念。古代就有人认为：宇宙间万物都是由原子组成的，原子是不可分割的、永恒不变的物质最终单元。 1897年汤姆逊发现了电子，使人们认识到原子是具有内部结构的粒子。于是，经典物理学的局限性进一步的暴露出来了。为此，德国科学家普朗克提出了同经典物理学相矛盾的假设：光是由一粒一粒光子组成的。这一假设导出的结论和黑体辐射及光电效应的实验结果符合。于是，19世纪初被否定了的光的微粒说又以新的形式出现了。 1911年，卢瑟福用粒子散射实验发现原子的绝大部分质量，以及内部的正电荷集中在原子中心一个很小的区域内，这个区域的半径只有原子半径的万分之一左右，因此称为原子核。这才使人们对原子的内部结构得到了一个定性的、符合实际的概念。在某些方面，原子类似一个极小的太阳系，只是太阳和行星之间的作用力是万有引力，而原子核和电子间的作用力是电磁力。 原子物理学的基本理论主要是由德布罗意、海森堡、薛定谔、狄里克莱等所创建的量子力学和量子电动力学。它们与经典力学

相关专题 双向免疫扩散法是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。即可溶性抗原 与相应抗体在琼脂介质中相互扩散，彼此相遇，在比例适当处形成沉淀线。根据沉淀线的有无、形状和位置对抗原或抗体进行定性分析，也可用于抗体的半定量检测。 将可溶性抗原(如小牛血清)与相应抗体(如兔抗小牛血清的抗体)混合，当两者比例合适并有电解质(如氯化钠、磷酸盐等)存在时，即有抗原―抗体复合物的沉淀出现，此为沉淀反应(precipitin reaction)。如以琼脂凝胶为支持介质，则在凝胶中出现可见的沉淀线、沉淀弧或沉淀峰。根据沉淀出现与否及沉淀量的多寡，可定性、定量地检测出样品中抗原或抗体的存在及含量。免疫学 的一些测定方法即基于此特性。 双向扩散法(double diffusion)，最早由Ouchterlony创立，故又称Ouchterlony法。琼脂 凝胶是多孔的网状结构，大分子物质可以自由通过，这种分子的扩散作用使分别两处的抗原和相应抗体相遇，形成抗原―抗体复合物，比例合适时出现沉淀。由于凝胶透明度高，可直接观察到复合物的沉淀线(弧)。沉淀

泪小管泪囊鼻腔吻合术 [适应证] 泪小管闭塞，鼻腔正常，但已证明泪囊完好，而鼻泪管已闭塞者。 [术前准备及麻醉] 泪点、泪囊区皮下、鼻泪管口深部浸润麻醉，中鼻道及中鼻甲前端表面麻醉，筛前神经麻醉均同泪囊鼻腔吻合术。 准备一14cm长的硬膜外导管。 [手术步骤] 1.按泪囊鼻腔吻合术方法切开皮肤，分离肌肉后，在泪筋膜上定出两个切口位置（图1）。 2.先作颞侧切口，切开内眦腱暴露泪总管阻塞部。切去阻塞部。用泪道探针自泪囊颞侧圆孔插入，探通鼻泪管（图2）。 3.如鼻泪管通畅，只作泪小管泪囊吻合术即可。若鼻泪管阻塞，则按本法进行。 4.先作泪小管泪囊吻合术（参考该术式，但暂不缝合）。再按泪囊鼻腔吻合术分离骨膜、造骨孔、作泪囊和鼻粘膜瓣，在泪囊颞侧壁上可看到切下泪总管后留下的小圆孔（图3）。 5.缝合泪囊与鼻粘膜后瓣，泪囊颞侧壁圆孔与泪小管断端后上下角（图4）。 6.用一硬膜外导管自泪小点插入，经小圆孔引入泪囊，并送入鼻腔（图5）。将少许鼻腔纱条拉入泪囊。 7.用5-0丝线或尼龙线缝

颞侧径路泪腺摘除术 泪腺的肿瘤或慢性泪腺炎须手术摘除时，通常有两条径路，即颞侧径路和前方径路。摘除巨大的泪腺肿瘤和特别肥大的泪腺，或肿瘤体积虽不太大，但扩展到眼球后方的，应选择颞侧径路手术。此术与眼眶手术中krönlein手术基本相同。但作泪腺摘除时有特殊要求。 [适应证] 体积较大的泪腺肿瘤、慢性泪腺炎，或肿瘤虽不大，但疑有恶变，要求完整摘除的。 [术前准备及麻醉] 全麻。 [手术器械] 除一般器械外，应准备深部拉钩、骨膜分离器、骨凿、锤子、骨钳等。 [手术步骤] 1.缝合睑裂。作皮肤切口，自外眦角向颞侧水平切开皮肤。再自眶上缘中点沿眶缘向颞侧作弧形皮肤切口，在外眦角颞侧与水平切口相接（图1）。 2.钝性分离切口内眼轮匝肌。用拉钩拉开创口并止血，暴露眶外缘骨膜、眶隔及颞肌筋膜。在眶外缘前面骨膜上，距眶缘2mm处平行眶缘切开骨膜，长30mm。两端各作一水平切口（图2）。 3.分离两侧骨膜，暴露骨壁。用平骨凿及锤子凿断眶缘上下端的厚硕部分骨壁（图3），并自眶而将后部较薄弱的骨壁凿断，达眶下裂

网络 第二十九章　组胺受体阻断药 　　组胺（histamine）是广泛存在于人体组织的自身活性物质（autacoids）。组织中的组胺主要含于肥大细胞及嗜碱细胞中。因此，含有较多肥大细胞的皮肤、支气管粘膜和肠粘膜中组胺浓度较高，脑脊液中也有较高浓度。肥大细胞颗粒中的组胺常与蛋白质结合，物理或化学等刺激能使肥大细胞脱颗粒，导致组胺释放。组胺与靶细胞上特异受体结合，产生生物效应；如小动脉、小静脉和毛细血管舒张，引起血压下降甚至休克；增加心率和心肌收缩力，抑制房室传导；兴奋平滑肌，引起支气管痉挛，胃肠绞痛；刺激胃壁细胞，引起胃酸分泌。组胺受体有H 1 、H 2 、H 3 亚型。各亚型受体功能见表29-1。组胺的临床应用已逐渐减少，但其受体阻断药在临床上却有重大价值。 表29-1 组胺受体分布及效应表 受体类型 所在组织 效　应 阻断药 H 1

网络 第七节　足底 一、皮肤和浅筋膜 足底皮肤坚厚致密，无毛且汗腺多，在负重较大的部位，如足跟、第一和第五跖骨头等处，角化形成胼胝。浅筋膜较厚，富含脂肪组织，其中有致密结缔组织将皮肤与足底腱膜紧密相连。 二、深筋膜 足底深筋膜可分为浅、深二层。浅层又分为内、中、外三部分。内侧部较薄，覆盖于拇展肌和拇短屈肌表面；外侧部稍厚，覆盖于小趾侧肌肉的表面；中间部最厚，称为足底腱膜。深层为骨间跖侧筋膜。 图4-19　足底第一层肌及趾的神经 足底腱膜呈三角形，后端较狭细附于跟骨结节，前端呈扇形分开至各趾，足底腱膜向深面发出两个肌间隔，分别附着于第1、第5跖骨，将足底分为三个骨筋膜鞘，容纳足底的三群肌肉。 三、足底肌群（图4-19、20、21） 足底肌可分为内侧群、中间群和外侧群（表4-1） 表（4-1）足底肌的名称、起止和作用 分 群 肌的名称 起点 止点 作

网络 第五节　混合型酸碱平衡障碍 　　混合型酸碱平衡障碍（Mixed Acid-Base Disturbances）是指两种或两种以上的原发性酸碱平衡障碍同时并存。当两种原发 性障碍 使pH向同一方向变动时，则pH偏离正常更为显著，例如代谢性酸中毒合并呼吸性酸中毒的病人其pH值比单纯一种障碍更低。当两种障碍使pH向相反的方向变动时，血浆pH值取决于占优势的一种障碍，其变动幅度因受另外一种抵消而不及单纯一种障碍那样大。如果两种障碍引起pH相反的变动正好互相抵消，则病人血浆pH值可以正常，例如代谢性酸中毒合并呼吸性碱中毒。 一、常见种类 混合型酸碱平衡障碍常见的有下列五种。 （一）呼吸性酸中毒合并代谢性酸中毒 　　呼吸性酸中毒合并代谢性酸中毒见于：①慢性呼吸性酸中毒如阻塞性肺疾病同时发生中毒性休克伴有乳酸酸中毒；②心跳呼吸骤停发生急性呼吸性酸中毒和因缺氧发生乳酸酸中毒。

网络 第二节　酸碱指示剂 酸碱指示剂是一类在其特定的PH值范围内，随溶液PH值改变而变色的化合物，通常是有机弱酸或有机弱碱。当溶液PH值发生变化时，指示剂可能失去质子由酸色成分变为碱色成分，也可能得到质子由碱色成分变为酸色成分；在转变过程中，由于指示剂本身结构的改变，从而引起溶液颜色的变化。指示剂的酸色成分或碱色成分是一对共轭酸碱。 一、指示剂的变色原理 现以弱酸型指示剂（如酚酞）为例，说明酸碱指示剂的变色原理。 弱酸型酸碱指示剂在溶液中存在下列平衡： HIn表示弱酸的分子，为酸色成分；In-是弱酸分子离解出H+以后的复杂离子，为碱色成分。酚酞的酸色成分是无色的，碱色的成分则呈红色。根据平衡原理： 　　或　　　　　　　　　　　 将等式两边各取负对数得： 　

网络 第二十三章　抗慢性心功能不全药 慢性心功能不全又称充血性心力衰竭（congestive heart failure,CHF），是一种多原因多表现的“超负荷心肌病”。在血流动力学方面表现为心脏不能射出足量血液以满足全身组织的需要。心功能受几种生理因素的影响，如心收缩性，心率、前、后负荷及心肌氧耗量等。CHF时收缩性减弱，心率加快，前后负荷增高，氧耗量增加。 近年发现CHF时既有心调节机制的变化，也有心β-肾上腺素受体信息转导系统的变化。 1．交感神经系统激活 这是CHF发病过程中早期的代偿机制，是一种快速调节。患者交感神经活性增高，血中去甲肾上腺素浓度升高，从而使心肌收缩性增高，心率加快，血管收缩以维持血压，这都起到代偿作用。久后心肌氧耗量增加，后负荷增加，心工作加重，反使病情恶化，形成恶性循环。 2．肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）激活这一系统对循环的调节较为缓慢。症状明显的患者血浆肾素活性升高，血中血管紧张素

网络 第三十一章　作用于消化系统的药物 消化系统包括抗消化性溃疡药、助消化药、止吐药、泻药、止泻药和胆药等。 第一节　抗消化性溃疡药 　　消化性溃疡（peptic　ulcer）的发病与粘膜局部损伤和保护机制之间的平衡失调有关。损伤因素（胃酸、胃蛋白酶和幽门螺旋菌）增强或保护因素（粘液/HCO 3 - 屏障和粘膜修复）减弱，均可引起消化性溃疡。当今的治疗主要着眼于减少胃酸和增强胃粘膜的保护作用。 一、抗酸药 抗酸药（antacids）是一类弱碱性物质。口服后能降低胃内容物酸度，从而解除胃酸对胃、十二指肠粘膜的侵蚀和对溃疡面的刺激，并降低胃蛋白酶活性，发挥缓解疼痛和促进愈合的作用。餐后服药可延长药物作用时间。合理用药应在餐后1、3小时及临睡前各服一次，一天7次。理想的抗酸药应该是作用迅速持久、不吸收、不产气、不引起腹泻或便秘，对粘膜及溃疡面有保护收敛作用。单一药物很难达到这

网络 第二节　抗躁狂 抑郁症 药 　　躁狂 抑郁症 又称情感性精神障碍（affective disorders），是一种以情感病态变化为主要症状的精神病。躁狂 抑郁症 表现为躁狂或抑郁两者之一反复发作（单相型），或两者交替发作（双相型）。其病因可能与脑内单胺类功能失衡有关，但5-HT缺乏是其共同的生化基础。在此基础上，NA功能亢进为躁狂，发作时患者情绪高涨，联想敏捷，活动增多。NA功能不足则为抑郁，表现为情绪低落，言语减少，精神、运动迟缓、常自责自罪，甚至企图自杀。 　　一、抗 抑郁症 药 　　常用抗抑郁药为三环类，包括米帕明（imipramine）、地昔帕明（desipramine）阿米替林（amitriptyline）、多塞平（doxepin）等。它们与吩噻嗪类在化学结构上的主要

网络 第七节　前庭蜗器 前庭蜗器vestibulocochlear包括感受头部位置的位觉器和感受声波刺激的听觉器两部分，所以又称位听器。尽管这两种感受器在机能上是互不相干的，但由于它们在结构位置上关系密切，所以合并于一节讲述。 听觉器包括外耳、中耳和内耳三部分，外耳、中耳是声波的传导装置，内耳的耳蜗是接受声波刺激的感受器的所在部位；位置觉感受器则存在于内耳的前庭和半规管中（图10-31）。 图10-31　外、中、内耳全貌 一、外耳externalear 外耳包括耳廓、外耳道和鼓膜等三部分，具有收集和传导声波的功能。 1．耳廓（图10-32） 耳廓auricle以弹性软骨为支架，外面被覆皮肤而构成。皮下组织很少，但血管神经丰富。下方耳垂部分软骨，仅含结缔组织和脂肪。 耳廓凸面向后，凹面朝向前外。周缘卷曲叫做耳轮，耳轮的前内侧，有与之平行的隆起叫对耳轮，对耳轮的上端

网络 第二节　符号检验 　　将资料用正负号表示，然后根据正负号个数计算χ 2 值进行假设检验，称为符号检验。符号检验的检验假设：若为成对资料，则为H 0 :P(X 1 2 )=P(X 2 1 )，含义是总体内每一对数字（分别用X 1 和X 2 表示)中，X 1 2 的概率等于X 2 1 的概率，都是1/2，而备择假设H 1 为P（X 1 2 ）≠P(X 2 1 )≠1/2；若为不成对资料，检验假设H 0 为F（X 1 ）=F（X 2 ）即两总体的分布函数相等，而H 1 ：F（X 1 ）≠F（X

网络 第二节　抗甲状腺药 　　可用于治疗甲状腺功能亢进（ 甲亢 ）的药物有硫脲类、碘化物、放射性碘及β受体阻断药。 一、硫脲类 　　硫脲类可分为二类：（1）硫氧嘧啶类，包括甲硫氧嘧啶（methylthiouracil），丙硫氧嘧啶（propylthiouracil）；（2）咪唑类，包括甲巯咪唑（thiamazole，他巴唑），卡比马唑（carbimazole， 甲亢 平）它们的化学结构如下： 　　【药理作用及作用机制】硫脲类的基本作用是抑制甲状腺过氧化物酶所中介的酪氨酸的碘化及偶联，而药物本身则作为过氧化物酶的底物而被碘化，使氧化碘不能结合到甲状腺球蛋白上，从而抑制甲状腺激素的生物合成。硫脲类药物对已合成的甲状腺激素无效，须待已合成的激素被消耗后才能完全生效。一般用药2～3周 甲亢

网络 第三节　胆碱酯酶复活药 胆碱酯酶复活药（cholinedterase reactivators）是一类能使已被有机磷酸酯类抑制的胆碱酯酶恢复活性的药物，其出现使有机磷酸酯类中毒的治疗获得了新的发展，它不但使单用阿托品所不能控制的严重中毒病倒得到解救，而且显著地缩短了一般中毒的病程。常用的有碘解磷定和氯磷定，二者均为肟类（oxime）化合物。 碘解磷定 碘解磷定（pyraloxime methoiodide）简称派姆（PAM），为最早应用的胆碱酯酶复活药。水溶性较低，水溶液不稳定，久置可释放出碘。 【药理作用】碘解磷定进入有机磷酸酯类中毒者体内，其带正电荷的季铵氮即与被磷酰化的胆碱酯酶的阴离子部位以静电引力相结合，结合后使其肟基趋向磷酰化胆碱酯酶的磷原子，进而与磷酰基形成共价键结合，生成磷酰化胆碱酯酶和碘解磷定复合物，后者进一步裂解成为磷酰化碘解磷定。同时使胆碱酯酶游离出来，恢复其水解乙酰胆碱的活性（见图7-4）。

全细胞DNA是目的基因的材料来源，因此是必须得到的。我们通过学习细菌的全细胞DNA的制备，来了解DNA制备的基本知识。随后，我们再讲解质粒和噬菌体DNA的制备过程。 从细菌培养物中制备全细胞DNA的步骤： （1）培养细胞的生长和收集（harvested）； （2）细胞的破碎及内含物(content)的释放； （3）从细胞抽提物（cell extract）中除去DNA外的其他所有成分； （4）DNA溶液的浓缩(concentrated)。 细菌培养物的生长和收集 培养细菌需要培养基（culture medium），M9和LB培养基是两种典型的细菌培养基。 M9是一种确定成分培养基（defined medium），其中的所有成分是可知的。这种培养基包含的无机营养成分（inorganic nutrients)的混合物为细菌的生长提供基本元素，如氮，镁和钙，葡萄糖(glucose)提供碳源和能量。在实际应用中，还必须向

在你看来，是不是所有的蜜蜂都长得一个样？然而根据一项新的研究结果，在蜜蜂的眼中，人类的长相却不尽相同，尽管体内神经细胞数量只相当于人类的0.01%，但这些小生物却能够记忆和识别不同的人类面孔。 (蜜蜂能够识别并记住人类的面孔) 对于人类而言，面孔识别是日常生活中的一项重要活动。当我们注视他人的面孔时，大脑中的一个特殊区域——梭形脑回——便被激活。但是大脑中缺乏这样一种专门区域的动物是否也能区分彼此的外观呢？ 由于知道蜜蜂具有区别不同花卉的特殊本领，英国剑桥大学的视觉科学家Adrian Dyer便想搞清，蜜蜂的这种天分是否也能够延伸到其他领域。因此他和同事将4幅不同的人脸照片钉在一扇木板上。通过以蔗糖水作为对蜜蜂的奖赏，研究小组反复诱使这些昆虫嗡嗡地飞向一个目标照片，并且不时变换这些“脸”的位置。 研究人员在12月2日出版的《实验生物学杂志》上报告说，即便不再提供蔗糖水，这些蜜蜂依然能够以90%的正确率继续接近这些目标面孔。并且在蜜蜂的大脑中，已经形成了持久的记忆——即使在训练结束两天后，这些昆虫依然能够挑选出目标面孔。Dyer表示，这

胚胎发育第5周，自原始总心房的左、右两部分之间长出第一隔膜（第一房间隔），从后上向下生长，使两个心房之间仍然开着的部分（称为第一房间孔）逐渐狭窄，并继续向下生长，与心室间隔的心内膜垫愈合而完全封闭。但在第一房间孔完全封闭之前，第一房间隔上部裂开，形成第二房间孔。 胚胎发育第6周，在第一房间隔的右侧长出第二个隔膜（第二房间隔），向前生长一段，正好把第二房间孔像侧幕一样盖住，但从右向左方向的血流仍可通过。第一和第二房间隔构成的通道即为卵圆孔。出生后肺张开，大量血液从肺静脉进入左心房，产生从左心房向右心房的压差，使第一房间隔上部向第二房间隔靠拢，其后通常与之愈合。约25％的幼儿及儿童解剖学上卵圆孔保持开放，但由于左心房的压高于右心房，因此是封闭着的。 1．第二房间隔缺损 为卵圆窝内的一个或多个缺口（亦称为卵圆窝缺损），最大者为整个卵圆窝缺损。其发生是由于第一房间隔上部正常形成第二房间孔的生理性裂缝发生在错误的位置或者太大时，则不能被第二房间隔盖住，结果导致有缺陷的第二房间孔存留。因此，实际上并非第二房间隔缺损，而是第一房间隔中的第二房

网络 第五章　正态分布与正常值范围估计 第一节　正态分布及其性质 一群变量值可能用平均数描述集中的位置，用变异指标描述离散情况，而频数表则把变量值的分布描绘得更具体。为了直观还可把频数表画成直方图。如第四章中曾将7岁男童坐高的频数分布绘成图4.1。从图中可看出数据集中均数周围，左右基本对称，离均数愈近数据愈多，离均数愈远数据愈少的特点。医学科研中如健康人的红细胞数、血红蛋白量、血清总胆固醇，同年龄同性别儿童的身高、体重等，虽然数据各异，但画出的直方图图形是类似的。可以设想，这种类型的资料，如果调查例数无限增多，所用组距又无限的小，那么直方顶端就连成了一条光滑的曲线。这条曲线，典型地反映了这类资料的分布情况，数学上称为正态曲线，其方程为 式中n为总频数，X为变量值，μ为均数，σ为标准差，Y为纵高，e=2.71828……，π=3.14158……。在一个总体中n、μ、σ、e、π都是常数，只有X在变，所以Y=