液相柱填料选择
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填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,其表面积越大,填充柱的柱效超高;然而粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3pm的填料应用。在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。
如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小粒度的填料是很有用的。3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5pm填料的柱效提高近30%;然而,3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,即相同的塔板数或分离能力,但是柱长更短,以缩短分析时间。另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙睛代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小粒度的填料是很有用的。3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5pm填料的柱效提高近30%;然而,3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,即相同的塔板数或分离能力,但是柱长更短,以缩短分析时间。另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙睛代替甲醇,以降低色谱柱的压力。