实验动物的注射方法

实验五十二 实验动物的注射方法

　　一、目的要求

　　练习对实验动物注射的操作方法。

　　二、基本原理

　　很多微生物学与免疫学实验均需利用动物，例如鼠疫杆菌等病原菌的毒力试验、菌苗与疫苗的安全试验、药物对免疫功能的影响等常在小白鼠体内进行；免疫血清的制备常将抗原注射于家兔体内，然后分离家兔的血清；豚鼠常用于被检材料的细菌分离，如从病人痰液内分离结核菌，其他也用于白喉杆菌的毒力试验、过敏试验、吞噬试验与结核菌素试验等。因此学习动物的注射方法是很有必要的。一般常用的注射途径有皮内、皮下、腹腔与静脉四种。

　　三、器材

　　家兔，小白鼠，豚鼠；

　　灭菌生理盐水（代替实验材料，用以注射），注射器，针头，镊子，剪刀，消毒煮沸器，碘酒棉花，酒精棉花，消毒干棉花等。

　　三、操作步骤

　　1．注射器的准备与消毒

　　(1)选择大小适当而针筒与筒心号码一致的注射器，并先吸入清水，试其是否漏水，漏水的注射器不能使用，因其注射量不准确，而且若注射材料为病原菌，则会污染环境。

　　(2)视选择的动物及注射途径之不同而选用不同长短大小的针头，并先试验是否通气或漏水（由于市售针头大小的编号比较混乱，本部分实验一般用老编号或直接用长短来表示）。

　　(3)消毒时将筒心从针筒中拔出，用一块纱布先包针筒，后包筒心，并使两者在纱布内的方向一致，包好后，置煮沸消毒器中。选好的针头包以纱布，置煮沸消毒器之另一端。同时放入镊子一把，加入自来水，以淹没注射器为度，煮沸消毒10分钟。

　　(4)消毒完毕后，用镊子取出注射器，置筒心于针筒中，并将针头牢固地装于注射器的针嘴上，使针头的斜面与针筒上的刻度在一条直线上。

　　(5)吸入注射材料，并将注射器内的空气排尽，若注射材料具有传染性，则排气时应以消毒棉花包住针头，以免传染材料外溢而污染环境。准备注射。

　　2．皮下注射（以豚鼠为例）

　　(1)助手用左手从背面夹持动物颈部，将动物提起，并使大拇指钩住下颌部，其他几个手指将另一边的前腿固定，右手在下方将动物托起，手心向上，用拇指及食指、中指分别夹住右后腿和左后腿，露出蹊部。

　　(2)先用碘酒棉花，后用酒精棉花消毒豚鼠蹊部，注射者将皮肤提起，以预先准备好的带针头（可用长约18—20mm）的注射器（内装灭菌生理盐水），刺入皱褶底部，注射0．5ml或1ml生理盐水。注入时阻力不大，而放下皮肤后，皮下呈扩散状隆起者为注射正确。

　　3．皮内注射（以豚鼠为例）

　　(1)助手按上法（但不必露出蹊部）将豚鼠抓紧。

　　(2)实验者在其腹部任意选择约2cm2的面积剪毛，消毒皮肤。图ⅪⅡ-1豚鼠皮内注射法

　　(3)用最小的针头（老编号为 26号，长约 13 mm）连接在1ml的注射器上，吸取灭菌生理盐水，刺入皮内，注入0．1—0．2ml。如准确注射在皮内，注入时阻力较大，并在注射部位形成坚实的水泡（图ⅪⅡ-1）。

　　4．腹腔注射（以小白鼠为例）

　　(1)用右手拖鼠尾，使其爬行于较粗糙的台面或铁丝试管架的底面（试管架倒放），再用左手拇指和食指抓紧小鼠颈部两耳之间的皮肤，翻转后，用左手无名指及小指夹住鼠尾及后肢（如图ⅪⅡ-2）。

　　(2)消毒腹壁，将鼠头部稍向下，以免针头刺入内脏。

　　(3)将预先准备好的生理盐水注入腹腔0．5ml。注射时先将针头斜刺入皮下，然后转直，再向下直刺入少许进入腹腔，目的是使两个针眼不在一条直线上，可避免拔出针头时注射材料污染皮肤，这是注射病原菌时要注意的。

　　5．静脉注射（以家兔为例）

　　(1)将家兔固定于特制木箱（木箱的一端有一圆洞，使头部露出）中，或由助手按在桌上，一手轻按其颈部，一手轻扶耳根，使其耳向前（如图XIII-3）。

　　(2)在耳翼边缘剪毛，用酒精棉花消毒，并用力摩擦使血管充血，亦可用二甲苯擦，效果更好。

　　(3)注射者以左手固定该耳，右手持注射器刺入血管（针头与静脉几乎相平行），慢慢注入0．5ml。如果注射正确，则针下阻力很小，并可见血管变色。如阻力较大或皮下隆起即停止注射，重新刺入血管，或另选部位。注入时应将针头与耳同时固定，以免针头退出血管。

　　(4)注射后，用消毒干棉花压住注射部位，拔出针头，并继续压数秒钟，以防止出血。

　　6．注射完毕后，如注射材料具有传染性，应以消毒器中的水抽吸几次，然后取下针头，抽出筒心，放消毒器中与抽吸洗过的水一并煮沸消毒，煮毕后洗净注射器及针头，置干燥箱中烘干后，分别收藏备用。若为一般非传染性材料，只需洗净、烘干、收藏。

　　五、实验报告

　　思考题

　　(1)通过本实验，你体会到抓动物时，要使它不乱动，应注意些什么？

　　(2)如果给动物注射传染性材料，应注意些什么？