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血小板计数法(直接试管法)

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1 原理
  用一种能破坏血液中的红细胞,但能保护血小板形态完整的稀释液稀释血液,滴入血细胞计数池,在高倍镜下直接计数血小板数。

2 器材和试剂
  器材同白细胞计数法。稀释液用许汝和氏尿素稀释液。许汝和氏尿素稀释液配制法:尿素10g, 福尔马林0.1ml, 枸橼酸钠0.5g,加水至100ml,溶解后过虑,在冰箱内保存。

3 操作步骤
  a.用2ml吸管准确吸取血小板稀释液0.38ml置小试管中。
  b.从耳垂采血,用0.02ml吸管准确吸取第一滴血,吹入稀释液中,并吹吸两次洗净吸管壁内的血。
  c.充分振摇,滴入计数池,静置15~20分钟,使血小板下沉,以便计数。
  d.在高倍镜下用计数红细胞所用的5个中方格中的血小板数,乘以1000,即得每立方毫米血中血小板数。
  e.血小板在稀释液中表现为富于折光之小点,约为红细胞的1/2~1/3大小。

4 注意事项
  a.取血时动作要迅速,穿刺要深。
  b.一定要用第一滴血,以使血小板保持完整,在稀释液中易于分散。否则,血小板因耳垂受挤压而破坏较多,形态也不规则,在稀释液中不易分散,这样,会使计数结果偏低。
  c.尿素在室温中容易分散而失效,故稀释液尽可能小量配制,并保存于冰箱之中。
  d.如红细胞不完全溶解,影响血小板计数的准确性时,可加大稀释倍数,或另换稀释液。
  e.如室温较高时,可将滴好的计数池放在培养皿下,中间放一湿棉球,以防计数池中的稀释液干掉。

 

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