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生物标本常用反应剂的配制

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1、检查葡萄糖试剂

配方一 本尼迪克( Benedict )溶液

1 400 毫升蒸馏水中溶解 85 克柠檬酸钠和 50 克无水碳酸钠。

2 50 毫升加热的蒸馏水中溶解 8.5 克硫酸铜。

把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠 - 碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。

本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出 0.15 0.20% 的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。

配方二 裴林( Fehling )溶液

1 )把 34.5 克硫酸铜溶于 500 毫升蒸馏水中。

2 )把 125 克氢氧化钾(钠)和 173 克酒石酸钾钠溶解在 500 毫升蒸馏水中。

上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。

2 、检查淀粉的试剂

鲁哥氏( Lugol’s )溶液(碘液)

6 克碘化钾溶于 20 毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入 4 克碘,等碘充分溶解,在加入 80 毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。

碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。

3 、检查蛋白质的试剂

配方一 米伦( Millon )试剂

60 毫升浓硝酸(比重 1.42 )中溶解 40 克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。

在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。

配方二 双缩尿试剂

分别配制 10% 氢氧化钠溶液和 1% 硫酸铜溶液。

3 毫升待测物中加入 1 毫升 10% 氢氧化钠溶液和 1 1% 硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。

4 、检查脂肪的试剂

苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液

0.2 克苏丹 (或苏丹 ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。

5 、酸碱指示剂

配方一 酚酞试剂和试纸

酚酞试剂 1 克酚酞,溶解在 100 毫升 60% 的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。

酚态试纸 1 克酚酞,溶解在 100 毫升 95% 酒精溶液里,加入 00 毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。

酚泰试剂(试纸) pH 值变色范围 8.2 10 ,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。

配方二 红蓝石蕊试纸

取市售石蕊 1 克,放在 80 毫升 10% 酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。 1 份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另 1 份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。

红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。

6 、检查二氧化碳的试剂

检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。

配方一 溴代麝香草酚蓝溶液

0.1 克溴代麝香草酚蓝,溶解在 100 毫升蒸馏水里,滴入少量 0.1% 氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。

溴代麝香草酚蓝溶液 pH 值变色范围是 6.0 (黄)~ 7.6 (蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。

配方二 石灰水

在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。

如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。

7 、检查细胞生活力的试剂

检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制 1% 中性红溶液和 1% 甲基蓝溶液,这两种溶液各取 1 份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。

 

 

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